小檗堿對高脂加鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的影響*

郭志利，姚克青，姚玉英

1.石家莊醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河北 石家莊050000；2.北京市朝陽區(qū)桓興腫瘤醫(yī)院，北京050599

糖尿病是一種由體內(nèi)胰島素分泌不足或靶細(xì)胞對胰島素敏感性降低而引起的糖、脂代謝紊亂的慢性疾病［1］，其主要特征為高血糖。糖尿病是世界性公共衛(wèi)生問題，主要分為Ⅰ型糖尿病和Ⅱ型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM），其中T2DM約占糖尿病患者總數(shù)90%左右［2］。隨著人們生活水平的提高和生活習(xí)慣的改變，全球T2DM發(fā)生率呈上升趨勢，是繼心腦血管疾病后危害人類健康的第二大殺手［3］。國際糖尿病聯(lián)盟報(bào)道顯示，我國糖尿病確診人數(shù)為1.1億，是世界第一糖尿病大國［4］，預(yù)計(jì)到2040年T2DM患者人數(shù)會(huì)達(dá)到1.5億。T2DM作為一種終身性慢性疾病，需要患者長期服藥并定期門診隨訪，多種原因會(huì)導(dǎo)致患者血糖控制不佳，引起各種并發(fā)癥，累及多個(gè)器官和系統(tǒng)損傷。T2DM發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其中胰島素抵抗（insulin resistance，IR）和胰島β細(xì)胞功能障礙在T2DM發(fā)病中作用顯著［5］；近年來研究發(fā)現(xiàn)，慢性低度炎癥也是T2DM重要的發(fā)病機(jī)制之一［6］，炎癥因子長期保持高水平不但損害血管內(nèi)皮，而且增加血液黏度，激活急性反應(yīng)，加重血脂紊亂，加速T2DM的進(jìn)展［7］，因此，控制炎癥也是T2DM治療的途徑之一。當(dāng)前對于T2DM的治療一般采取運(yùn)動(dòng)飲食干預(yù)、二甲雙胍、胰島素等治療。中醫(yī)對糖尿病的治療歷史悠久，經(jīng)驗(yàn)豐富，在臨床治療中亦逐漸普及。黃連是常用的清熱解毒藥，研究顯示其有效成分小檗堿對炎癥反應(yīng)具有明顯作用［8］，本研究將其作用于高脂加鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)的T2DM大鼠，觀察其對大鼠糖代謝、脂代謝及相關(guān)炎癥因子的影響。

1 材料

1.1 動(dòng)物健康清潔級SD大鼠70只，5周齡，雌性，體質(zhì)量（140±6.8）g，由江蘇省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，許可證號：SCXK（蘇）2018－0015，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施使用許可證號：SYXK（蘇）2017－0006。專人看管，分籠飼養(yǎng)，環(huán)境溫度20～25℃，相對濕度50%～70%，定期消毒。無外界干擾下常規(guī)飼養(yǎng)，自由攝食、飲水，12 h／12 h晝夜循環(huán)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開始實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)獲得石家莊醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，符合中國倫理委員會(huì)有關(guān)動(dòng)物研究指導(dǎo)原則。

1.2 試劑與藥品STZ（美國Sigma公司，批號：S0103）；鹽酸二甲雙胍（深圳市中聯(lián)制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字：H44024853，批號：1207340）；小檗堿注射液（國藥準(zhǔn)字：H43021804，批號：110857，山東優(yōu)維藥業(yè)有限公司）；血清胰島素ELISA試劑盒（fasting insulin，F(xiàn)INS，欣博盛生物有限公司，貨號：Z12317）；Trizol試劑（Thermo Fisher Scientific公司，批號：ARB12952）；總膽固醇試劑盒（total cholesterol，TC，上海羽朵生物科技有限公司，貨號：A12931）；三酰甘油測定試劑盒（triglycerides，TG，基蛋生物科技股份有限公司，貨號：J－2473）；血清脂聯(lián)素（adiponectin，ADPN）檢測試劑盒、瘦素（leptin，LEP）檢測試劑盒（北京杰輝博高生物技術(shù)有限公司，貨號：YAD1732、YD－D30630）；腫瘤壞死因子－α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）檢測試劑盒、白細(xì)胞介素－6（interleukin－6，IL－6）檢測試劑盒（北京百奧萊博科技有限公司，貨號：ARB13606、ARB13449）；即用型PBS粉劑（武漢谷歌生物科技有限公司，批號：gg13275）；檸檬酸、檸檬酸鈉（山東省中創(chuàng)檸檬生化有限公司，批號：ab1357、ab49237）；熒光定量RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（武漢基因美生物科技有限公司，批號：ab72468）；大鼠TNF－α、IL－6 qPCR引物由上海杏園瑞民生物工程有限公司合成；常規(guī)飼料（江蘇省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，主要包括70%碳水化合物、20%蛋白質(zhì)、10%脂肪以及必要微量元素，熱量為300 Kcal／100 g）；在常規(guī)飼料的基礎(chǔ)上加入豬油、大豆等，經(jīng)調(diào)整后的高脂飼料配方如下：55%脂肪、25%蛋白質(zhì)、20%碳水化合物以及必要微量元素，熱量為610 Kcal／100 g。

1.3 儀器電子天平（成都倍賽克儀表研究所）；超凈工作臺(tái)（蘇州凈化設(shè)備儀器公司）；MH550冰凍切片機(jī)（美國Thermo Fisher公司）；RT－2100C自動(dòng)酶標(biāo)儀、RT 200C全自動(dòng)生化分析儀（美國Rayto公司）；CytoFLEX流式細(xì)胞儀（美國Beckman Coulter公司）；快速實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（廣州華峰生物科技有限公司）；羅氏卓越型血糖儀ACCU－CHEK Performa（Roche Diagnostics）。

2 方法

2.1 試液配制①檸檬酸緩沖液：稱取檸檬酸1.9 g和檸檬酸鈉2.8 g，分別溶解于100 mL蒸餾水中，取檸檬酸溶液30 mL和檸檬酸鈉溶液20 mL混合，并加入蒸餾水定容至100 mL，得到檸檬酸緩沖液。②STZ溶液：稱取0.4 g STZ溶于50 mL檸檬酸緩沖液中，置于冰水浴中，使用前5 min完成溶液配制，1 h內(nèi)注射完畢。

2.2 T2DM大鼠模型制備及分組給藥70只大鼠從1號～70號進(jìn)行編號，采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)選取10只作為空白對照組（A組），其余60只作為造模組。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)記錄方法造模［9］：適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后禁食4 h，監(jiān)測血糖使其處于正常范圍；A組大鼠給予常規(guī)大鼠飼料喂養(yǎng)，造模組大鼠給予高脂飲食。飼養(yǎng)4周后禁食12 h，造模組大鼠給予STZ溶液腹腔注射，劑量為50 mg·kg－1，A組大鼠給予等量檸檬酸緩沖液腹腔注射。注射過程約10～15 min，避免過快注射。造模組大鼠注射30 min后給予15%葡萄糖溶液灌胃，劑量10 mL·kg－1。注射60 min后給予4 mL 4℃生理鹽水灌胃，避免因長時(shí)間禁食而引起低血糖休克和酮癥酸中毒。A組大鼠僅給予4 mL 4℃生理鹽水灌胃。分別于注射72 h及1周后采集靜脈血測量空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG），取3次測量平均值作為最終結(jié)果，若2次FBG≥16.7 mmol·L－1則認(rèn)為糖尿病大鼠造模成功。造模后7 d內(nèi)4只大鼠死亡，病死率為6.67%，6只大鼠造模失敗，剔除上述大鼠后剩余50只大鼠，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為5組，分別為T2DM模型組（B組）、陽性對照組（C組）、小檗堿低劑量組（D組）、小檗堿中劑量組（E組）、小檗堿高劑量組（F組），每組10只大鼠。

造模成功后第3天開始給藥，連續(xù)12周。A組：常規(guī)飼料喂養(yǎng)，同體積生理鹽水灌胃；B組：高脂飼料喂養(yǎng)，同體積生理鹽水灌胃；C組：高脂飼料喂養(yǎng)，鹽酸二甲雙胍臨床等效劑量0.250 mg·g－1灌胃給藥；D組：高脂飼料喂養(yǎng)，小檗堿注射液0.125 mg·g－1灌胃給藥；E組：高脂飼料喂養(yǎng)，小檗堿注射液0.250 mg·g－1灌胃給藥；F組：高脂飼料喂養(yǎng)，小檗堿注射液0.375 mg·g－1灌胃給藥。治療期間A、D、E組未有大鼠死亡，B組2只大鼠死亡，C、F組1只大鼠死亡，解剖判定均系感染死亡。

2.3 糖脂代謝指標(biāo)檢測分別于造模后及治療后禁食12 h采集頸動(dòng)脈血，進(jìn)行生化指標(biāo)測定。葡萄糖氧化酶法檢測FBG、TC、TG的水平；酶聯(lián)免疫法（enzyme－linked immjunosorbent assay，ELISA）檢測FINS、ADPN及LEP的水平，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（homeostasis model－insulin resistance，HOMA－IR）和胰島素敏感指數(shù)（homeastasis model－insulin sensitivity，HOMA－IS）。

2.4 炎癥相關(guān)指標(biāo)檢測采用ELISA法檢測大鼠血清TNF－α、IL－6水平；采用PCR檢測大鼠脾臟組織中TNF－α、IL－6的mRNA水平，具體如下：取脾臟組織切片碾碎成粉末狀，加入1 mL Trizol溶液混勻，一步法獲取脾臟組織總RNA，反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA樣品。PCR反應(yīng)條件設(shè)置為95℃下30 s使其變性，60℃退火，90℃下使其延伸，通過Poly core軟件，對其循環(huán)數(shù)進(jìn)行計(jì)算，獲得TNF－α、IL－6的mRNA水平。

2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）的形式表示，組間比較采用LSD－t檢驗(yàn)，P＜0.05時(shí)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 小檗堿對T2DM模型大鼠血糖及胰島素指標(biāo)的影響與A組比較，造模后B、C、D、E、F組大鼠FBG、HOMA－IR水平顯著升高（P＜0.05），F(xiàn)INS、HOMA－IS水平顯著降低（P＜0.05），提示糖尿病大鼠造模成功；與B組比較，治療后C、D、E、F組大鼠FBG、HOMA－IR的水平顯著降低（P＜0.05），F(xiàn)INS、HOMA－IS的水平顯著升高（P＜0.05），提示小檗堿對血糖及胰島素指標(biāo)均有一定的調(diào)控效果；其中，F(xiàn)組FBG、FINS、HOMA－IR、HOMA－IS水平與D、E組比較有顯著差異（P＜0.05），與C組比較無顯著差異（P＞0.05），提示高劑量小檗堿對血糖及胰島素調(diào)控效果優(yōu)于低、中劑量，與二甲雙胍效果相當(dāng)。結(jié)果見表1。

表1 各組大鼠血糖及胰島素指標(biāo)比較 （±s）

表1 各組大鼠血糖及胰島素指標(biāo)比較 （±s）

注：與本組造模后比較，*P＜0.05；與同期A組比較，＃P＜0.05；與同期B組比較，＄P＜0.05；與同期D、E組比較，＆P＜0.05

FBG（c／mmol·L－1）－1 FINS／mU·L HOMA－IR HOMA－IS組別 n造模后 治療后A組 10 4.71±0.88 4.68±0.85 30.25±4.73 30.46±4.59 6.33±0.88 6.34±0.90 0.158±0.025 0.158±造模后 治療后造模后 治療后造模后 治療后0.26 B組 8 24.86±5.41＃ 25.06±5.87＃ 13.14±2.75＃ 13.05±2.28＃ 14.52±2.41＃ 14.53±2.43＃ 0.069±0.014＃ 0.069±0.011＃C組 9 25.03±5.64＃ 5.83±1.18*＄＆13.46±2.81＃ 25.78±4.83*＄＆14.97±2.53＃ 6.68±1.13*＄＆0.068±0.011＃ 0.150±0.010*＄＆D組 10 24.75±5.83＃ 8.64±1.74*?！?3.29±2.64＃ 20.26±5.95*?！?4.62±2.52＃ 7.78±1.18*?！?.068±0.013＃ 0.129±0.011*?！鏓組 10 25.26±6.05＃ 7.86±1.59*?！?3.54±2.73＃ 22.76±6.03*＃＄15.20±2.47＃ 7.95±1.23*?！?.066±0.012＃ 0.126±0.012*＃＄F組 9 24.89±5.78＃ 6.03±1.28*＄＆13.48±2.68＃ 26.03±5.72*＄＆14.91±2.56＃ 6.97±1.18*＄＆0.067±0.012＃ 0.143±0.013*＄＆

3.2 小檗堿對T2DM模型大鼠脂代謝指標(biāo)的影響

與A組比較，造模后B、C、D、E、F組大鼠血清TC、TG、LEP水平顯著升高（P＜0.05），ADPN水平顯著降低（P＜0.05），提示糖尿病大鼠造模成功；與B組比較，治療后C、D、E、F組大鼠血清TC、TG、LEP的水平顯著降低（P＜0.05），ADPN水平顯著升高（P＜0.05），提示小檗堿對脂代謝指標(biāo)有一定的調(diào)控效果；其中，F(xiàn)組血清TC、TG、ADPN、LEP水平與D、E組比較有顯著差異（P＜0.05），與C組比較無顯著差異（P＞0.05），提示高劑量小檗堿對血脂代謝調(diào)控效果優(yōu)于低、中劑量，與二甲雙胍效果相當(dāng)。結(jié)果見表2。

表2 各組大鼠脂代謝指標(biāo)比較 （±s）

表2 各組大鼠脂代謝指標(biāo)比較 （±s）

注：與本組造模后比較，*P＜0.05；與同期A組比較，＃P＜0.05；與同期B組比較，＄P＜0.05；與同期D、E組比較，＆P＜0.05

組別 n TC（c／mmol·L－1）TG（c／mmol·L－1）ADPN（ρ／mg·L－1）LEP（ρ／μg·L－1）造模后 治療后A組 10 0.85±0.12 0.86±0.11 0.40±0.08 0.41±0.08造模后 治療后造模后 治療后造模后 治療后7.74±1.12 7.81±1.15 1.42±0.21 1.43±0.21 B組 8 2.24±0.35＃2.63±0.36＃ 1.53±0.24＃1.82±0.28＃ 5.62±1.04＃5.67±1.08＃ 1.86±0.35＃ 1.91±0.36＃C組 9 2.20±0.31＃1.51±0.27*＄＆1.46±0.27＃0.89±0.22*＄＆5.76±0.95＃7.62±1.05*＄＆1.83±0.36＃ 1.48±0.25*＄＆D組 10 2.18±0.29＃1.97±0.22*?！?.52±0.27＃1.25±0.24*?！?.68±1.98＃6.87±1.15*?！?.85±0.34＃ 1.67±0.35*?！鏓組 10 2.27±0.33＃1.84±0.23*?！?.56±0.29＃1.13±0.21*＄5.61±1.03＃7.06±1.12*?！?.82±0.32＃ 1.59±0.32*＃＄F組 9 2.21±0.32＃1.56±0.21*＄＆1.51±0.28＃0.92±0.19*＄＆5.65±1.06＃7.57±1.16*＄＆1.85±0.32＃ 1.50±0.33*＄＆

3.3 小檗堿對T2DM模型大鼠血清炎癥因子的影響與A組比較，造模后B、C、D、E、F組大鼠血清TNF－α、IL－6水平顯著升高（P＜0.05），提示高脂加STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型體內(nèi)炎癥反應(yīng)加??；與B組比較，治療后C、D、E、F組大鼠血清TNF－α、IL－6水平顯著降低（P＜0.05），提示小檗堿對炎癥反應(yīng)有一定的調(diào)控效果；其中，F(xiàn)組血清TNF－α、IL－6的水平與D、E組比較有顯著差異（P＜0.05），與C組比較無顯著差異（P＞0.05），提示高劑量小檗堿對炎癥反應(yīng)的調(diào)控效果優(yōu)于低、中劑量，與二甲雙胍效果相當(dāng)。結(jié)果見表3。

3.4 小檗堿對T2DM模型大鼠脾臟中炎癥因子mRNA表達(dá)的影響與A組比較，造模后B組大鼠脾臟TNF－α、IL－6的mRNA表達(dá)水平顯著升高（P＜0.05）；與B組比較，治療后C、D、E、F組大鼠脾臟TNF－α、IL－6的mRNA表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）；其中，F(xiàn)組大鼠脾臟TNF－α、IL－6的mRNA表達(dá)水平與D、E組比較有顯著差異（P＜0.05），與C組比較無顯著差異（P＞0.05），提示高劑量小檗堿對炎癥反應(yīng)的調(diào)控效果優(yōu)于低、中劑量，與二甲雙胍效果相當(dāng)。結(jié)果見表4。

表3 各組大鼠血清炎癥因子比較 （±s，ng·L－1）

表3 各組大鼠血清炎癥因子比較 （±s，ng·L－1）

注：與本組造模后比較，*P＜0.05；與同期A組比較，＃P＜0.05；與同期B組比較，＄P＜0.05；與同期D、E組比較，＆P＜0.05

組別 n TNF－α IL－6造模后 治療后A組 10 134.26±15.61 135.74±15.46 231.75±34.1造模后 治療后230.14±35.78 B組 8 205.42±24.85＃ 218.63±25.87＃ 310.33±35.49＃ 318.75±36.81＃C組 9 211.31±25.83＃ 147.37±18.46*＄＆ 306.46±34.83＃ 238.41±33.64*＄＆D組 10 208.46±24.13＃ 164.85±20.26*?！?311.76±35.87＃ 257.18±35.48*＃＄E組 10 212.38±25.64＃ 161.34±21.27*?！?312.59±36.25＃ 251.64±36.16*?！鏔組 9 207.76±26.02＃ 152.35±20.34*＄＆ 308.83±36.46＃ 240.35±37.49*＄＆8

表4 各組大鼠脾臟中炎癥因子比較 （±s）

表4 各組大鼠脾臟中炎癥因子比較 （±s）

注：與A組比較，＃P＜0.05；與B組比較，＄P＜0.05；與D、E組比較，＆P＜0.05

組別 n TNF－αmRNA IL－6 mRNA A組10 15.74±2.74 9.46±1.89 B組 8 40.68±5.03＃ 21.23±3.46＃C組 9 18.64±3.14＄＆ 11.75±2.21＄＆D組 10 27.16±3.86?！?16.67±3.05?！鏓組 10 24.51±3.53?！?13.85±2.87?！鏔組 9 19.13±3.23＄＆ 12.05±2.26＄＆

4 討論

T2DM在中醫(yī)中屬于“消渴”病的范疇，基本病機(jī)總結(jié)為陰津虧損、陰虛為本、燥熱偏盛。熱為始動(dòng)因素，陰虛為基本病理，二者貫穿于消渴發(fā)生發(fā)展的整個(gè)過程中［10－11］；臨床治療以“清熱潤燥、養(yǎng)陰生津、活血化瘀”為基本原則，再根據(jù)具體病情，補(bǔ)以滋陰、補(bǔ)腎、溫陽、健脾、益氣等治法?！侗静菥V目》記載“黃連主治消渴、尿多”，黃連屬于清熱藥下屬分類的清熱燥濕藥，入口極苦，具有清熱燥濕、瀉火解毒之功效。黃連的化學(xué)成分包括小檗堿、黃連堿、甲基黃連堿、小檗紅堿等，其中小檗堿是其主要有效成分；現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，小檗堿具有抗菌、抗病毒、降血糖、抗炎等作用［12］。為了闡明黃連的降糖機(jī)制，筆者采用不同劑量小檗堿治療高脂加STZ誘導(dǎo)的T2DM大鼠模型，觀察其對T2DM大鼠多種作用效果，進(jìn)而探討其可能的作用機(jī)制。

肥胖和先天性胰腺功能障礙是導(dǎo)致T2DM發(fā)生的主要誘因［13］。高脂飲食是肥胖患者的主要特點(diǎn)，過量的脂肪攝入會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)異位堆積，阻礙正常細(xì)胞氧化代謝，降低胰島素敏感性，加重機(jī)體糖脂代謝紊亂［14］。脂肪主要集中于肝臟和肌肉，該部位是糖脂代謝的重要部位，脂肪含量過高會(huì)啟動(dòng)IR［15］。高脂飲食是T2DM造模中的重要步驟，但其存在誘導(dǎo)效果不穩(wěn)定［16］，因此筆者在實(shí)驗(yàn)中加入了STZ，其作為一種DNA烷化劑，能作用于胰腺細(xì)胞中磷酸煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，參與細(xì)胞輔酶的糖和脂肪的氧化作用，導(dǎo)致細(xì)胞輔酶糖脂代謝異常，加快胰腺細(xì)胞凋亡［17］，同時(shí)STZ對胰島β細(xì)胞的損害明顯，因此高脂飲食加STZ誘導(dǎo)的大鼠符合人類T2DM的發(fā)病模式，符合本實(shí)驗(yàn)的要求。

血糖升高是T2DM最直觀的體現(xiàn)，而胰島素是體內(nèi)唯一能夠降低血糖的激素，一旦胰島素信號通路中的任意環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常，就會(huì)導(dǎo)致胰島素?zé)o法正常發(fā)揮作用，導(dǎo)致IR的發(fā)生［18］，IR發(fā)生后會(huì)增加胰島β細(xì)胞的負(fù)擔(dān)，最終導(dǎo)致其枯竭，引起T2DM的發(fā)生。HOMA－IR和HOMA－IS是臨床評價(jià)胰島素調(diào)控水平的常用指標(biāo)。本研究通過檢測血糖和胰島素水平，計(jì)算HOMA－IR和HOMA－IS后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過小檗堿治療后，T2DM模型大鼠的FBG、HOMA－IR顯著降低（P＜0.05），F(xiàn)INS、HOMA－IS顯著升高（P＜0.05），其中以高劑量組效果最為顯著，提示小檗堿可改善T2DM大鼠血糖及胰島素水平。

肥胖是IR發(fā)生的常見誘因，脂代謝紊亂伴隨T2DM發(fā)生和發(fā)展［19］。本研究顯示，經(jīng)過小檗堿治療后，大鼠TC、TG水平顯著降低，提示小檗堿具有降低高脂血癥的作用。治療后各組TC、TG水平仍高于空白對照組（P＜0.05），未恢復(fù)到正常水平，其原因可能與對造模組大鼠進(jìn)行高脂飲食喂養(yǎng)有關(guān)。肥胖時(shí)，ADPN、LEP等特異性脂肪因子和TNF－α、IL－6等非特異性炎癥因子分泌異常均會(huì)引起炎癥反應(yīng)，阻礙胰島素信號傳導(dǎo)，誘發(fā)IR［20］。TNF－α、IL－6均可下調(diào)IRS－1表達(dá)，抑制胰島素受體信號通路和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，在維持糖脂代謝和內(nèi)皮功能中作用明顯［21］。LEP可影響葡萄糖代謝與胰島素釋放過程，同時(shí)可以調(diào)節(jié)脂肪合成與分解過程，通過負(fù)反饋機(jī)制調(diào)控生物體體質(zhì)量與能量平衡［22］。肥胖時(shí)，LEP受體水平降低，負(fù)反饋機(jī)制遭到破壞，無法抑制胰島β細(xì)胞分泌胰島素，引起高胰島素血癥和IR。ADPN可通過提高HOMA－IS，加快葡萄糖利用和脂肪酸氧化等途徑改善IR。本研究顯示，經(jīng)小檗堿治療后ADPN顯著升高（P＜0.05），LEP顯著降低（P＜0.05），說明小檗堿能提高ADPN水平，降低LEP水平，提示小檗堿對脂代謝水平調(diào)控效果顯著，且與劑量有關(guān)，隨著劑量的增加，調(diào)控作用增強(qiáng)。

研究證明，慢性低度炎癥狀態(tài)是T2DM的重要發(fā)病機(jī)制［23］，也是患者體內(nèi)的常見狀態(tài)，表現(xiàn)為血清中多種炎癥細(xì)胞因子和其他組織中炎癥標(biāo)志物的表達(dá)升高。本研究對大鼠造模后血清TNF－α、IL－6檢測發(fā)現(xiàn)，造模組大鼠血清TNF－α、IL－6的水平顯著高于空白對照組（P＜0.05），證實(shí)T2DM模型大鼠中存在炎癥狀態(tài)。治療后血清TNF－α、IL－6的水平均顯著降低（P＜0.05），證實(shí)小檗堿對炎癥因子具有調(diào)控作用。由于血清中炎癥因子的表達(dá)量少，且易受到其他物質(zhì)的干擾，導(dǎo)致檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性受到影響。因此，筆者通過PCR對脾臟部位的炎癥因子TNF－α、IL－6的mRNA水平進(jìn)行測定，獲得準(zhǔn)確的相對表達(dá)量，進(jìn)一步加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。研究顯示，治療后大鼠脾臟中TNF－α、IL－6的mRNA相對表達(dá)量均顯著降低（P＜0.05），且高劑量組調(diào)控效果最為顯著。

小檗堿可降低高脂加STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠血糖，調(diào)控胰島素水平和脂代謝，減輕機(jī)體的炎癥反應(yīng)，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。