經(jīng)典名方竹葉石膏湯的物質(zhì)基準(zhǔn)量值傳遞分析

葛 威，劉小康，王康宇，郭云龍，蔡廣知，趙躍剛，貢濟(jì)宇

長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130117

竹葉石膏湯（Zhuye Shigao Decoction，ZSD）源自東漢·張仲景《傷寒論》，具有豐富的臨床應(yīng)用基礎(chǔ)，是國(guó)家中醫(yī)藥管理局發(fā)布的《古代經(jīng)典名方目錄（第一批）》所載方劑之一[1]，由淡竹葉、石膏、麥冬、人參、甘草、半夏及粳米7 味中藥組成，具有清氣分熱、清熱生津、益氣和胃之功效，主治傷寒、溫病、暑病余熱未清，氣津兩傷證。其中，淡竹葉、石膏清熱除煩為君藥，人參、麥冬益氣養(yǎng)陰為臣藥，半夏降逆止嘔為佐藥，甘草、粳米調(diào)養(yǎng)胃氣為使藥?，F(xiàn)代臨床常將其用于治療各種傳染病熱病[2-7]。

經(jīng)典名方是中醫(yī)藥數(shù)千年臨床實(shí)踐的結(jié)晶，具有組方合理、療效確切、安全性高等特點(diǎn)，為中醫(yī)藥的精髓所在，然而研究成功的關(guān)鍵在于能否研制出符合質(zhì)量要求的古代經(jīng)典名方物質(zhì)基準(zhǔn)[8-12]。ZSD 中所含藥味較多，化學(xué)成分復(fù)雜，在一些成分尚未明確的前提下，選擇特征圖譜、含量測(cè)定結(jié)合化學(xué)模式識(shí)別法能更好地評(píng)價(jià)其質(zhì)量的一致性和優(yōu)劣性[13-14]，本實(shí)驗(yàn)以ZSD 為研究對(duì)象，基于飲片-物質(zhì)基準(zhǔn)之間的量值傳遞開(kāi)展研究，探尋ZSD 中的關(guān)鍵質(zhì)量屬性轉(zhuǎn)移規(guī)律，初步確定物質(zhì)基準(zhǔn)出膏率的質(zhì)量控制范圍、定量指標(biāo)及其轉(zhuǎn)移率范圍，以期為石膏湯物質(zhì)基準(zhǔn)的質(zhì)量控制及后續(xù)制劑開(kāi)發(fā)提供借鑒。

1 儀器與材料

1.1 儀器

LC-2030 型高效液相色譜儀，包括DGC-20A型在線脫氣系統(tǒng)，SIL-20A 型自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，UV檢測(cè)器，日本島津公司；AB135-S 型十萬(wàn)分之一電子天平、AL204 型萬(wàn)分之一電子天平，瑞士梅特勒-托利多公司；KES-W22CS208H 型電陶爐，深圳市康佳智能電器科技有限公司；KQ-500E 型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；SCIENTZ-12N 型冷凍干燥機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司；TGL16E 臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司。

1.2 試藥

對(duì)照品異葒草苷、葒草苷、牡荊素，購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司，批號(hào)B21528、B20509、B20875，質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于98%；對(duì)照品人參皂苷Rg1、Re、Rb1，購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)110703-201731、110754-201626、110704-201726，質(zhì)量分?jǐn)?shù)依次為98.4%、97.4%、98.2%；對(duì)照品甘草苷、甘草酸、異甘草苷、甘草素，購(gòu)自上海源葉生物技術(shù)有限公司，批號(hào)551-15-5、1405-86-8、578- 86-9、961-29-5，質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于98%；乙腈、磷酸、甲醇，Thermo Fisher，色譜級(jí)；屈臣氏蒸餾水，廣州屈臣氏食品飲料有限公司。

淡竹葉、石膏、麥冬（去心）、半夏、人參、甘草藥材均來(lái)自神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司，飲片均為實(shí)驗(yàn)室按照原方記載及相關(guān)法規(guī)炮制[15]。各藥材經(jīng)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室蔡廣知副教授鑒定，淡竹葉為禾本科淡竹葉屬植物淡竹葉Lophatherum gracileBrongn.的干燥莖葉，石膏為硫酸鹽類礦物硬石膏族石膏Gypsum Fibrosum（主含CaSO4·2H2O），麥冬為百合科沿階草屬植物麥冬Ophiopogon japonicus(L.F) Ker-Gawl.的干燥塊根，人參為五加科人參屬植物人參Panax ginsengC.A.Mey.干燥根及根莖，半夏為天南星科半夏屬植物半夏Pinellia ternate(Thunb.) Breit.的干燥塊根，甘草為豆科甘草屬植物甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.的干燥根及根莖，質(zhì)量均符合《中國(guó)藥典》2020年版一部要求，粳米為河南大米；批號(hào)信息見(jiàn)表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)的制備

采用隨機(jī)數(shù)表法，分別對(duì)方中各藥味飲片進(jìn)行隨機(jī)組合，見(jiàn)表2。根據(jù)課題組前期考證[16-19]，確定ZSD 劑量為淡竹葉6 g，石膏48 g，麥冬31 g，半夏12 g，人參6 g，甘草6 g。

稱取ZSD 中各藥味飲片于砂鍋中，加入2000 mL 水，浸泡30 min，電陶爐武火（2200 W）轉(zhuǎn)文火（600 W）煎煮至1200 mL，200 目絹布濾過(guò)，濾液加粳米24 g，煎煮70 min，濾去粳米，調(diào)整體積至600 mL。濾液于真空冷凍干燥機(jī)中預(yù)冷凍后，冷凍干燥，即得20 批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)樣品。同法制備各單味藥和陰性樣品。

2.2 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜的建立

2.2.1 色譜條件 Thermo C18色譜柱（250 mm×4.6mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.05%磷酸-乙腈，梯度洗脫：0～10 min，5%乙腈；10～15 min，5%～10%乙腈；15～25 min，10%～19%乙腈；25～60 min，19%～24%乙腈；60～65 min，24%～30%乙腈；65～70 min，30%～75%乙腈；體積流量1.0 mL/min；柱溫30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm；進(jìn)樣量20 μL。

表1 ZSD 各藥味信息Table 1 Information of ZSD

表2 20 批物質(zhì)基準(zhǔn)飲片組合Table 2 Information of 20 batches of substance benchmark

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備 取異葒草苷、葒草苷、牡荊素、甘草苷、甘草素、異甘草苷、甘草酸對(duì)照品適量，精密稱定，加80%甲醇制成制成質(zhì)量濃度分別0.312、0.202、0.204、0.322、0.205、0.211、0.385 mg/mL 的混合對(duì)照品溶液。

2.2.3 供試品溶液的制備 取ZSD 凍干粉1.0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入80%甲醇20 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理20 min，放冷，稱定質(zhì)量，用80%甲醇溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，0.22 μm 微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.2.4 精密度考察 取同一供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜方法重復(fù)進(jìn)樣6 次，記錄色譜圖，以16號(hào)峰（甘草苷）為參照峰，計(jì)算各共有峰與參照峰的相對(duì)保留時(shí)間均小于0.62%，相對(duì)峰面積RSD 值均小于4.82%，表明儀器的精密度良好。

2.2.5 重復(fù)性考察 取同一批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)，按“2.2.3”項(xiàng)下方法平行制備6 份供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，結(jié)果各共有峰與參照峰的相對(duì)保留時(shí)間的RSD 值均小于1.28%，相對(duì)峰面積的RSD 值均小于4.59%，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.2.6 穩(wěn)定性考察 取同一供試品溶液，分別于供試品溶液制備后0、4、8、12、24 h，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖，結(jié)果各共有峰與參照峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD 值均小于1.03%，相對(duì)峰面積的RSD 值均小于4.70%，表明供試品溶液在室溫下24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.7 特征圖譜的建立及相似度評(píng)價(jià) 取20 批ZSD 供試品溶液、混合對(duì)照品溶液、各單味藥樣品和陰性樣品，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，記錄56 min 色譜圖。使用“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2012 版）”軟件對(duì)20 批物質(zhì)基準(zhǔn)進(jìn)行圖譜疊加得圖1，并生成對(duì)照特征圖譜，見(jiàn)圖2。

圖1 20 批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜Fig.1 HPLC characteristic spectrum of substance benchmark of ZSD

圖2 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜Fig.2 Characteristic spectrum of substance benchmark of ZSD

將特征圖譜進(jìn)行特征峰歸屬，對(duì)應(yīng)圖譜見(jiàn)圖3、4，全方共確定21 個(gè)特征峰，經(jīng)比對(duì)，其中峰5、9、12（異葒草苷）、13（葒草苷）、14（牡荊素）、17共6 個(gè)共有峰屬于君藥淡竹葉；峰3、4、6、8、10、11 屬于臣藥麥冬；峰1、2、7 屬于臣藥半夏；峰15、16（甘草苷）、18、19（甘草素）、20（異甘草苷）、21（甘草酸）屬于佐使藥甘草。

圖3 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)與單味藥對(duì)照?qǐng)D譜Fig.3 Control spectrum of substance benchmark of ZSD and single-flavor drugs

20 批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)（S1～S20）特征圖譜與對(duì)照特征圖譜相似度分別為0.986、0.989、0.992、0.993、0.981、0.997、0.977、0.950、0.961、0.952、0.989、0.979、0.946、0.980、0.964、0.993、0.976、0.956、0.989、0.966，均大于0.90，結(jié)果表明，20批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)整體相似性均較好，說(shuō)明ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)的制備工藝穩(wěn)定，所建立的ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜可用于評(píng)價(jià)方中藥味質(zhì)量傳遞規(guī)律。

2.2.8 飲片-物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜的傳遞分析 將各物質(zhì)基準(zhǔn)與其對(duì)應(yīng)批次的各單味飲片的特征圖譜分別導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”（2012版），對(duì)相應(yīng)特征峰進(jìn)行標(biāo)記峰匹配，計(jì)算相似度，結(jié)果淡竹葉和麥冬均大于0.990，麥冬和半夏均大于0.900，各單味藥與物質(zhì)基準(zhǔn)中對(duì)應(yīng)特征峰的相似度良好。結(jié)果表明，ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)與飲片指紋圖譜間的整體相似度良好，飲片中物質(zhì)群向物質(zhì)基準(zhǔn)中傳遞較為穩(wěn)定。

2.2.9 主成分分析（principal component analysis，PCA）和偏最小二乘判別分析（partial least squares- discriminant analysis，PLS-DA） 為分析不同批次ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)間的質(zhì)量差異，以20 批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)的21 個(gè)共有峰面積為原始數(shù)據(jù)，利用SIMCA- P14.1 軟件進(jìn)行PCA，結(jié)果顯示，20 批樣品可分為4 類，其中S1、S3、S16、S17 為一類，S2、S15 為一類，S4～S6、S11～S14、S18 為一類，S7～S10、S19、S20 為一類，見(jiàn)圖5。

圖4 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)與各單味藥陰性樣品對(duì)照?qǐng)D譜Fig.4 Comparison of substance benchmark of ZSD and negative samples of each single-flavor drugs

圖5 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)PCA 得分圖Fig.5 PCA scoring of substance benchmark of ZSD

為進(jìn)一步分析各組間差異，并找出各組間差異成分，建立PLS-DA 模型，得分矩陣見(jiàn)圖6，以PLS-DA 模型的可變投影重要度指數(shù)（VIP）大于1.0 和t檢驗(yàn)P值小于0.05 為標(biāo)準(zhǔn)，篩選出11 個(gè)對(duì)分組貢獻(xiàn)較高的峰，按VIP 大小順序，分別為峰17、6、7、20（異甘草苷）、12（異葒草苷）、16（甘草苷）、10、19（甘草素）、15、8、18，結(jié)果見(jiàn)圖7。

圖6 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)的PLS-DA 的得分矩陣Fig.6 PLS-DA score matrix of 15 batches of substance benchmark of ZSD

圖7 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)PLS-DA 的VIP 值Fig.7 VIP values of substance benchmark of ZSD by PLS-DA

2.3 6 種指標(biāo)成分含量測(cè)定

2.3.1 指標(biāo)選擇 木犀草素黃酮苷類成分為淡竹葉中主要藥效成分，具有解熱、抗炎、利尿、保護(hù)DNA免受氧化損傷的作用[20-21]。其中異葒草苷含量較高、分離度良好、轉(zhuǎn)移率穩(wěn)定、無(wú)陰性干擾；實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)半夏中主要成分在復(fù)方中存在陰性干擾，麥冬藥 材、飲片中含量較高的皂苷類成分在方中煎煮后出現(xiàn)不同程度的轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)移率偏差較大，不適合作為含量測(cè)定指標(biāo)。因此，最終選擇異葒草苷、甘草苷、甘草酸和人參皂苷Rg1、Re、Rb1為定量指標(biāo)。

2.3.2 色譜條件

（1）異葒草苷：Thermo C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.05%磷酸水溶液-乙腈，梯度洗脫：0～10 min，5%～10%乙腈；10～20 min，10%乙腈；20～30 min，10%～13%乙腈；30～40 min，13%～15%乙腈；40～60 min，15%～16%乙腈；60～65 min，16%～5%乙腈；體積流量1.0 mL/min；柱溫30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)360 nm；進(jìn)樣量20 μL。

（2）甘草苷、甘草酸：Thermo C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.05%磷酸水溶液-乙腈，梯度洗脫：0～8 min，19%乙腈；8～35 min，19%～50%乙腈；35～36 min，50%～100%乙腈；36～40 min，100%乙腈；40～45 min，100%～19%乙腈；45～50 min，19%乙腈；檢測(cè)波長(zhǎng)237 nm；體積流量1.0 mL/min；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10 μL。

（3）人參皂苷Rg1、Re、Rb1：Thermo C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為0.05%磷酸水溶液-乙腈，梯度洗脫：0～35 min，19%乙腈；35～55 min，19%～29%乙腈；55～70 min，29%乙腈；70～100 min，29%～40%乙腈；100～115 min，40%～19%乙腈；115～120 min，19%乙腈；檢測(cè)波長(zhǎng)為203 nm；體積流量為1.0 mL/min；柱溫為35 ℃；進(jìn)樣量10 μL。

色譜圖見(jiàn)圖8～10。

圖8 異葒草苷含量測(cè)定HPLC 圖Fig.8 HPLC of isoorientin determination

圖9 甘草苷和甘草酸含量測(cè)定HPLC 圖Fig.9 HPLC of liquiritin and glycyrrhizic acid determination

圖10 人參皂苷Rg1、Re、Rb1 含量測(cè)定HPLC 圖Fig.10 HPLC of ginsenoside Rg1, Re and Rb1 determination

2.3.3 供試品溶液的制備

（1）異葒草苷：取ZSD 凍干粉1.0 g，精密稱定，加30%甲醇20 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理20 min，放冷，稱定質(zhì)量，加30%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，經(jīng)0.22 μm 微孔濾膜濾過(guò)，即得。

（2）甘草苷、甘草酸：取凍干粉0.5 g，精密稱定，精密加入70%乙醇25 mL，稱定質(zhì)量，超聲20 min，放冷，稱定質(zhì)量，加70%乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，經(jīng)0.22 μm 微孔濾膜濾過(guò)，即得。

（3）人參皂苷Rg1、Re、Rb1：取凍干粉1.5 g，精密稱定，加蒸餾水20 mL，超聲處理20 min，加水飽和正丁醇20 mL 萃取2 次，合并上層，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液10 mL，至蒸發(fā)皿中蒸干，殘?jiān)蛹状既芙庵? mL 量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，0.22 μm 微孔濾膜濾過(guò)，即得。

2.3.4 陰性樣品的制備 按ZSD 制備工藝，制備缺淡竹葉、缺人參、缺甘草的陰性樣品，并制備各陰性樣品供試品溶液。

2.3.5 對(duì)照品溶液的制備 取異葒草苷、甘草苷、甘草酸和人參皂苷Rg1、Re、Rb1對(duì)照品適量，精密稱定，加30%甲醇、70%乙醇、甲醇溶解，制得質(zhì)量濃度分別為0.271、0.072、0.079、0.057、0.046、0.049 mg/mL 的各對(duì)照品溶液。

2.3.6 方法學(xué)考察 對(duì)含量測(cè)定方法進(jìn)行方法學(xué)考察，結(jié)果見(jiàn)表3。結(jié)果顯示本實(shí)驗(yàn)異葒草苷、甘草苷、甘草酸和人參皂苷Rg1、Re、Rb1含量測(cè)定專屬性、線性、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性及準(zhǔn)確度均良好。

2.4 指標(biāo)成分的轉(zhuǎn)移率測(cè)定

根據(jù)公式轉(zhuǎn)移率＝(物質(zhì)基準(zhǔn)中各成分含量×物質(zhì)基準(zhǔn)質(zhì)量)/(飲片中各成分含量×飲片投料量)，計(jì)算各成分轉(zhuǎn)移率，結(jié)果見(jiàn)表4，結(jié)果顯示，20 批物質(zhì)基準(zhǔn)異葒草苷轉(zhuǎn)移率為31.94%～50.91%，甘草苷轉(zhuǎn)移率為35.77%～62.55%，甘草酸轉(zhuǎn)移率為13.09%～22.63%，人參皂苷Rg1轉(zhuǎn)移率為57.28%～83.95%，人參皂苷Re 轉(zhuǎn)移率為42.21%～72.27%，人參皂苷Rb1轉(zhuǎn)移率為38.19%～64.57%，均符合相關(guān)規(guī)定（平均值的70%～130%）。

表3 含量測(cè)定方法學(xué)考察Table 3 Investigation on assay methodology

2.5 出膏率測(cè)定

按公式出膏率＝飲片投料量/物質(zhì)基準(zhǔn)質(zhì)量計(jì)算出膏率，結(jié)果見(jiàn)表4。結(jié)果表明，20 批物質(zhì)基準(zhǔn)的出膏率為16.99%～27.06%，平均出膏率為21.77%，符合相關(guān)規(guī)定（平均值的70%～130%）。

3 討論

3.1 物質(zhì)基準(zhǔn)的制備方法及藥味來(lái)源

《傷寒論》中記載ZSD 制備方法為上七味，以水一斗，煮取六升，去滓，內(nèi)粳米，煮米熟，湯成去米[1]。本研究根據(jù)ZSD 的處方劑量和煎煮方法，嚴(yán)格按原方描述進(jìn)行煎煮，制備相應(yīng)的物質(zhì)基準(zhǔn)對(duì)應(yīng)實(shí)物，并參考了《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求（征求意見(jiàn)稿）》對(duì)物質(zhì)基準(zhǔn)進(jìn)行冷凍干燥，冷凍干燥過(guò)程，保證質(zhì)量的穩(wěn)定，對(duì)處方中各藥味的有效成分影響相對(duì)較少，保證化學(xué)成分的穩(wěn)定性，亦方便儲(chǔ)存。根據(jù)《申報(bào)資料（征求意見(jiàn)稿）》指導(dǎo)原則，收集各藥味不少于3 個(gè)產(chǎn)地（包含道地藥材產(chǎn)地、主產(chǎn)區(qū)）的20 批次藥材進(jìn)行研究，并炮制為對(duì)應(yīng)飲片，結(jié)合復(fù)方物質(zhì)基準(zhǔn)質(zhì)量研究，探索藥材-飲片-物質(zhì)基準(zhǔn)的一致性傳遞規(guī)律。

表4 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)中指標(biāo)成分的含量、轉(zhuǎn)移率和出膏率Table 4 Content, transfer rate and extraction amount of index components in substance standard of ZSD

續(xù)表4

3.2 特征圖譜樣品制備方法的考察

本實(shí)驗(yàn)對(duì)物質(zhì)基準(zhǔn)復(fù)溶溶劑、提取方式、提取時(shí)間和料液比進(jìn)行了大量試驗(yàn)考察，結(jié)果顯示，以80%甲醇為溶劑時(shí)，特征圖譜各色譜峰分離效果較好；提取時(shí)間在20 min 以上時(shí)、提取率隨時(shí)間延長(zhǎng)無(wú)明顯變化；料液比為1∶20 時(shí)提取率較高；不同提取方式對(duì)物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜無(wú)顯著影響。因此最終確定樣品制備方法為取ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)凍干粉1.0 g，加入80%甲醇20 mL，超聲提取20 min，放冷，稱定質(zhì)量，用80%甲醇溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量，濾過(guò)。

3.3 ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)特征峰歸屬

20 批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)共確定了21 特征峰，分別歸屬于淡竹葉、半夏、麥冬和甘草。本實(shí)驗(yàn)尚存在不足之處，方中石膏、粳米、人參3 味藥未指認(rèn)出特征峰。石膏中主要成分為Ca2+和微量元素[22]，粳米中主要成分為淀粉，人參中主要成分最佳吸收波長(zhǎng)為203 nm，但在203 nm 下檢測(cè)時(shí)，仍未能檢測(cè)出特征峰。對(duì)于色譜無(wú)法分離和因靈敏度不足而未檢出的成分，課題組將采用其他方法進(jìn)一步研究。

3.4 指標(biāo)成分含量測(cè)定分析

經(jīng)典名方物質(zhì)基準(zhǔn)是經(jīng)典名方復(fù)方制劑的化學(xué)基準(zhǔn)和生物效應(yīng)基準(zhǔn)。本研究在充分考慮藥材來(lái)源、飲片炮制、制備工藝等影響質(zhì)量的因素，系統(tǒng)開(kāi)展藥材、飲片及名方物質(zhì)基準(zhǔn)所對(duì)應(yīng)實(shí)物質(zhì)量研究，綜合考慮并確定關(guān)鍵質(zhì)量屬性，據(jù)此建立相應(yīng)的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)和評(píng)價(jià)方法，確定科學(xué)合理的物質(zhì)基準(zhǔn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。選擇含量測(cè)定指標(biāo)均建立在課題組大量實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上。如ZSD 中君藥石膏，《中國(guó)藥典》2020年版中以含水硫酸鈣為指標(biāo)，無(wú)法采用色譜技術(shù)，研究組后期采用光譜方法對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制。ZSD 全方共133 g，其中淡竹葉、甘草、人參各6 g，在方中僅占4.5%，因此指標(biāo)成分含量普遍較低。該研究測(cè)定的20 批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)中異葒草苷為0.041～0.188 mg/g，甘草苷為0.959～1.655 mg/g，甘草酸為1.074～1.900 mg/g，人參皂苷Rg1為0.399～0.622 mg/g，人參皂苷Re 為0.223～0.377 mg/g，人參皂苷Rb1為0.167～0.394 mg/g。

4 結(jié)論

物質(zhì)基準(zhǔn)作為經(jīng)典名方制劑的質(zhì)量基準(zhǔn)和衡量其質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)參照物，在經(jīng)典名方開(kāi)發(fā)中至關(guān)重要。本研究根據(jù)文獻(xiàn)研究的結(jié)果及相關(guān)指導(dǎo)原則確定了ZSD 的處方組成、煎煮方法，按照現(xiàn)代研究方法，制備了ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)對(duì)應(yīng)實(shí)物，20 批ZSD 物質(zhì)基準(zhǔn)特征圖譜相似度較高，6 個(gè)指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率、出膏率在均值±30%之間，表明該制備工藝穩(wěn)定。在含量測(cè)定和特征圖譜中體現(xiàn)出了處方各藥味的信息，并初步確定了指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率、對(duì)應(yīng)實(shí)物出膏率的要求限度，為經(jīng)典名方ZSD 復(fù)方制劑的研究奠定基礎(chǔ)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突