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    柴芩承氣湯潛在作用的生物信息學(xué)預(yù)測(cè)*

    2021-06-04 06:52:32張辰龍張玉梅李鵬飛王玉潔
    西部中醫(yī)藥 2021年5期
    關(guān)鍵詞:中藥分析

    張辰龍,張玉梅,李鵬飛,王玉潔

    廈門大學(xué)附屬翔安醫(yī)院中醫(yī)科,廈門 福建361000

    柴芩承氣湯(Chaiqin Chengqidecoction,CQCQD)由“大承氣湯”加柴胡、黃芩、茵陳、梔子組成,具有峻下熱結(jié)、行氣消痞、疏肝解郁、清熱解毒之功。該方是四川大學(xué)華西醫(yī)院蔣俊明教授在傳統(tǒng)熱病理論指導(dǎo)下,以衛(wèi)氣營(yíng)血辨證和臟腑辨證為基礎(chǔ),結(jié)合急性胰腺炎“陽(yáng)明腑實(shí)”的病機(jī)特點(diǎn),遵循“陽(yáng)明腑實(shí)應(yīng)用下法,證治相符,攻伐大邪,遏制燎原之勢(shì)”“六腑以通為用”“熱者,清之”的中醫(yī)理論,提煉出“益氣救陰、活血化瘀、通里攻下、清熱解毒”的治療大法,擬定了CQCQD[1]。該方在臨床使用20 余年,大量臨床實(shí)踐證實(shí)其治療重癥急性胰腺炎急性期療效顯著[2-4]。

    中醫(yī)有“異病同治”概念,即同樣是陽(yáng)明腑實(shí)證,可能診斷的病名不同,因此本研究擬采用文獻(xiàn)回顧分析法和生物信息學(xué)技術(shù),對(duì)CQCQD 現(xiàn)有文獻(xiàn)進(jìn)行歸納總結(jié),并預(yù)測(cè)其潛在的新作用,為CQCQD的新適應(yīng)癥提供數(shù)據(jù)支持。

    1 資料與方法

    1.1 資料來(lái)源與數(shù)據(jù)分析方法在中國(guó)知網(wǎng)(CNKI)數(shù)據(jù)庫(kù)中以“柴芩承氣湯”為主題詞進(jìn)行檢索,共得到135篇文獻(xiàn)(截止2020年8月31日),選擇導(dǎo)出格式為Refworks;在PubMed(legacy 版)數(shù)據(jù)庫(kù)中分別以“Chaiqin Chengqidecoction”并“CQCQD”為檢索詞,得到25 篇文獻(xiàn)(截止2020 年8月31 日),保存為XML格式。以上兩部分?jǐn)?shù)據(jù)均導(dǎo)入軟件CiteSpace5.7.R1(64-bit)中,并將XML 格式轉(zhuǎn)化成WoS格式。數(shù)據(jù)分析以關(guān)鍵詞作為分析節(jié)點(diǎn)類型,輸出結(jié)果以圖片和數(shù)字形式展示[5]。

    1.2 中藥生物信息學(xué)分析登錄BATMAN-TCM:a Bioinformatics Analysis Tool for Molecular Mechanism of Traditional Chinese Medicine[6],首先選擇example1,輸入“DA CHENG QI TANG”;再選擇example4,分別輸入cluster1=CHAIHU,Cluster2=HUANGQIN,Cluster3=ZHIZI,Cluster4=YINCHEN;參數(shù)設(shè)置為:每個(gè)成分被預(yù)測(cè)潛在靶點(diǎn)(包括已知靶點(diǎn))的得分≥20,P值設(shè)置≤0.05。在輸出結(jié)果中突出顯示P≤0.05 的KEGG pathway/GO terms/TTD disease/OMIM disease 的結(jié)果,并按照P值排序后采用GraphPad Prism5制圖[7]。

    2 結(jié)果

    2.1 相關(guān)病種、作用機(jī)制及實(shí)驗(yàn)方法目前相關(guān)研究主要集中在重癥急性胰腺炎方面,其他疾病領(lǐng)域涉及甚少,見表1—2。

    表1 國(guó)內(nèi)CiteSpace分析結(jié)果

    2.2 生物信息學(xué)分析

    2.2.1 TTD 富集分析 通過(guò)TTD 數(shù)據(jù)庫(kù)富集分析共得到數(shù)據(jù)65 條,以CQCQD 中8 味中藥預(yù)測(cè)治療疾病范圍,疾病名稱數(shù)以P≤0.05且疾病數(shù)≥2的疾病名共有34種。見圖1。

    2.2.2 OMIM 富集分析 OMIM 富集共得到數(shù)據(jù)159 條,以CQCQD 中8 味中藥預(yù)測(cè)治療疾病范圍,疾病名稱數(shù)以P≤0.05 且疾病數(shù)≥2 的疾病名共有11種。見圖2。

    表2 英文CiteSpace分析結(jié)果

    圖1 TTD富集分析

    圖2 OMIM富集分析

    2.2.3 KEGG 富集分析 KEGG 富集分析共得到數(shù)據(jù)98 條,以CQCQD 中8 味中藥預(yù)測(cè)可能作用機(jī)制,結(jié)果P≤0.05且通路名稱數(shù)≥5的共有34種,見圖3。

    圖3 KEGG富集分析

    2.2.4 GO 富集分析 GO 富集分析共得到數(shù)據(jù)141 條,以CQCQD 中8 味中藥預(yù)測(cè)靶基因數(shù)目,結(jié)果P≤0.05 的靶基因數(shù)目共有105 條,靶基因總數(shù)≥1000個(gè)的通路名稱共29條,見圖4。

    圖4 GO富集分析

    3 結(jié)論

    3.1 適應(yīng)癥范圍的擴(kuò)大柴芩承氣湯由大承氣湯化裁而來(lái),主治陽(yáng)明腑實(shí)證,大便不通,頻轉(zhuǎn)矢氣,脘腹痞滿,腹痛拒按,按之則硬,甚或潮熱譫語(yǔ),手足濈然汗出,舌苔黃燥起刺,或焦黑燥裂,脈沉實(shí)[8]。可見柴芩承氣湯可用于重癥急性胰腺炎、急性單純性腸梗阻、急性膽囊炎、呼吸窘迫綜合癥、擠壓綜合征、急性闌尾炎等的治療。從中、英文文獻(xiàn)CiteSpace 回顧研究可以看出,目前臨床使用主要集中于重癥急性胰腺炎、腹脹、腎損傷、腹部疼痛、肝損傷、腸功能障礙。根據(jù)TTD disease/OMIM disease 分析結(jié)果推測(cè),柴芩承氣湯亦可適用于除重癥急性胰腺炎外的兩個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)的病種,如能正確使用,可為疾病的治療增加中醫(yī)藥治療手段。

    3.2 科研關(guān)注點(diǎn)的擴(kuò)大從文獻(xiàn)回顧分析中得出,目前針對(duì)柴芩承氣湯的研究多集中在常見臨床指標(biāo)方面,基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究主要集中在炎癥、免疫和腸道動(dòng)力學(xué)方面;研究方法多采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[9-10]。根據(jù)KEGG 分析結(jié)果推測(cè),柴芩承氣湯亦可能通過(guò)調(diào)節(jié)鈣超載來(lái)治療重癥急性胰腺炎;今后柴芩承氣湯基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究可選擇更多的信號(hào)通路來(lái)揭示其作用機(jī)理符合中藥多成分多靶點(diǎn)治療疾病的事實(shí),可彌補(bǔ)目前中藥機(jī)制研究中多個(gè)通路交互作用時(shí),通過(guò)人為阻斷形成單一通路研究的缺陷,反映中藥在體內(nèi)的真實(shí)作用機(jī)制。

    基因作為中藥體內(nèi)代謝及藥效發(fā)揮的重要環(huán)節(jié),以調(diào)控基因表達(dá)和基因修飾為研究方向,以多組分、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)的體內(nèi)代謝研究為重點(diǎn),有助于研究中藥體內(nèi)代謝過(guò)程、作用靶點(diǎn)和分子機(jī)制[11-13];根據(jù)GO 分析結(jié)果推測(cè),柴芩承氣湯中的8味中藥各自可能對(duì)如“2.2.4”項(xiàng)下所示通路上各靶基因表達(dá)有相應(yīng)干預(yù)作用。提示,可在高通量基因芯片篩選的基礎(chǔ)上,結(jié)合生物信息學(xué)技術(shù)進(jìn)行柴芩承氣湯中各中藥體內(nèi)代謝系統(tǒng)方面的深入研究,為中藥現(xiàn)代化研究打開新局面。

    柴芩承氣湯目前臨床多用于重癥急性胰腺炎的治療,在其他病種治療方面使用率較低。本研究通過(guò)中藥生物信息學(xué)分析,且從分子和基因水平預(yù)測(cè)出柴芩承氣湯可用于除了重癥急性胰腺炎之外的諸多疾病,對(duì)柴芩承氣湯在其他病種中的應(yīng)用奠定了理論基礎(chǔ)。然而生物信息學(xué)的預(yù)測(cè)結(jié)果存在不確切性,對(duì)于預(yù)測(cè)結(jié)果可以先從實(shí)驗(yàn)室開始,同時(shí)結(jié)合中醫(yī)臨床辨證論治過(guò)程,共同判定中藥處方的新適應(yīng)癥,以保證中醫(yī)藥臨床新適應(yīng)癥使用的安全性和確切性。

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