荔枝核治療肝臟疾病研究進(jìn)展?

蔣云霞，羅偉生

廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧530000

荔枝核是荔枝的干燥成熟種子，其味甘、微苦，性溫，歸肝、腎經(jīng)，具有理氣散結(jié)、祛寒止痛等功效。荔枝核活性成分主要有總皂苷、多糖、黃酮、酚酸、蒽醌和多酚等，其具有抗乙肝病毒，抗肝纖維化及保護(hù)肝細(xì)胞，降血脂，減輕脂肪肝，抑制肝癌，增強(qiáng)免疫等多種作用?，F(xiàn)對(duì)近年來(lái)荔枝核及其相關(guān)提取物在治療肝臟疾病方面的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展進(jìn)行論述。

1 抗乙肝病毒作用

荔枝核具備抗乙肝病毒效應(yīng)的重要活性提取成分為荔枝核水提取物及醇提取物、荔枝核黃酮類化合物及荔枝核總皂苷，這些提取成分具有相似的效應(yīng)，可在一定程度上抑制乙肝病毒復(fù)制，降低乙肝病毒的活性及乙肝肝纖維化水平。

1.1 荔枝核水提取物及醇提取物楊燕等［1］通過(guò)兩種濃度（95%/50%）的醇提法和兩種水（過(guò)柱/不過(guò)柱）提取法獲取荔枝核具備抗乙肝效應(yīng)的有效成分均能抑制乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B virus surface antigen，HBsAg）和乙肝e 抗原（hepatitis B eantigen，HBeAg）的復(fù)制。鄭民實(shí)等［2］運(yùn)用ELISA 技術(shù)檢測(cè)300 種中草藥的水提取物抗乙肝病毒的效應(yīng)差別，發(fā)現(xiàn)荔枝核水提取物抗乙肝病毒的功效在300 種中草藥中僅弱于夏枯草。由此認(rèn)為荔枝核水提取物通過(guò)減弱乙肝病毒的活性，減少乙肝病毒的復(fù)制而發(fā)揮抗乙肝病毒的作用。蘇齊鑒等［3］使用水提法和醇提法提取荔枝核有效成分，結(jié)果表明高劑量荔枝核水提物可降低血清鴨乙肝病毒DNA（duck hepatitis B virus DNA，DHBV-DNA），而荔枝核高、低劑量醇提物均無(wú)抑制鴨乙型肝炎病毒（duck hepatitis B virus，DHBV）的作用，推測(cè)荔枝核抗DHBV 的活性成分脂溶性較低，而水溶性較強(qiáng)。謝志春等［4］通過(guò)水提法和醇提法提取荔枝核的有效成分，發(fā)現(xiàn)荔枝核醇提物和低劑量荔枝核水提物均不具有明顯的抗DHBV 作用；但是，高劑量荔枝核水提物能顯著降低血清DHBV-DNA含量，提高DHBV-DNA轉(zhuǎn)陰率。徐慶等［5］認(rèn)為荔枝核提取物A、B、C、D、E、F 在體外仍有較強(qiáng)的抗乙肝病毒效應(yīng)，其中E 成分抑制乙肝病毒復(fù)制功能最強(qiáng)。

1.2 荔枝核黃酮類化合物徐慶等［6-7］發(fā)現(xiàn)大劑量荔枝核總黃酮（total flavonoids from litchi seed，TFL）可使鴨血清HBV-DNA 含量下降且鴨肝細(xì)胞未發(fā)現(xiàn)明顯的破壞及點(diǎn)灶壞死。經(jīng)過(guò)體外培育HepG2.2.15 細(xì)胞（人肝癌細(xì)胞系HepG2 細(xì)胞衍生細(xì)胞）以觀察荔枝核黃酮類化合物對(duì)血清HBsAg、HBeAg 和HBV-DNA 表達(dá)的影響，發(fā)現(xiàn)荔枝核總黃酮可有效遏制HBsAg、HBeAg 病毒復(fù)制率及HBV-DNA在血清中的含量，從而表現(xiàn)出抗乙肝病毒的效用。

1.3 荔枝核總皂苷蔣蔚峰等［8］首次提出荔枝核總皂苷在體外可發(fā)揮抗HBV 效應(yīng)，荔枝核總皂苷組和拉米夫定組均可抑制HBsAg、HBeAg 及細(xì)胞外HBV-DNA含量，表明荔枝核總皂苷與拉米夫定的作用相似，均可降低乙肝病毒復(fù)制率。韋朋海［9］認(rèn)為荔枝核總皂苷可降低鴨血清HBV-DNA 含量，從而改善鴨乙型肝炎病毒引起的鴨肝病理性損傷，但是實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)SL可降低DHBsAg、DHBeAg及降低丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）的血清含量，在此方面需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)確定其效用。

2 抗肝纖維化及保護(hù)肝細(xì)胞作用

2.1 抗肝纖維化研究證明荔枝核提取物TFL在抗纖維化方面具有良好效應(yīng)，許多學(xué)者對(duì)TFL抗肝纖維化的分子傳導(dǎo)通路及機(jī)制進(jìn)行研究。趙永忠等［10］認(rèn)為TFL 大劑量組與水飛薊素組均能抑制膽管阻塞性肝硬化大鼠血清透明質(zhì)酸（hyaluronic acid，HA）、層黏連蛋白（laminin，LN）及Ⅲ型前膠原（procollagen type Ⅲ，PCⅢ）表達(dá)。覃浩等［11］發(fā)現(xiàn)TFL 200 mg/（kg·d）和秋水仙堿均可使二甲基亞硝胺（dimethylnitrosamine，DMN）造模大鼠血清肝纖維化指標(biāo)（HA、LN、PCⅢ）含量降低，并可促使肝星狀細(xì)胞（Hepatic stellate cells，HSC）加速凋亡，從而減輕DMN 導(dǎo)致的肝纖維化病理?yè)p害程度。羅偉生等［12-13］發(fā)現(xiàn)TFL 可保護(hù)肝細(xì)胞并降低肝纖維化病變程度，可能與上調(diào)Bcl-2，下調(diào)Bax 及核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65 有關(guān)。其課題組在之后的研究［14］中發(fā)現(xiàn)TFL抗肝纖維化的效應(yīng)與減少HSC-T6細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)分泌從而下調(diào)Smad3/4 表達(dá)，上調(diào)PPAR-γ及C-ski mRNA表達(dá)有關(guān)。歐士鈺等［15］認(rèn)為TFL 可抑制基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2，MMP2）基因表達(dá)，這種蛋白酶可減少細(xì)胞外基質(zhì)的分泌，從而減少纖維組織形成。何志國(guó)等［16］認(rèn)為較大劑量TFL 減輕膽管阻塞型大鼠肝纖維化病變程度的作用可能是通過(guò)下調(diào)肝組織Toll 樣受體4（toll like receptor 4，TLR4）及NK-κB含量來(lái)實(shí)現(xiàn)。張揚(yáng)武等［17］認(rèn)為TFL通過(guò)上調(diào)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（peroxisome proliferator activated receptor，PPAR-γ）含量、下調(diào)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1)而發(fā)揮抑制大鼠肝星狀細(xì)胞T6細(xì)胞株（hepatic stellate cell T6，HSC-T6）增生、活化作用。覃桂金等［18］認(rèn)為TFL可抑制HSC-T6的NF-κB 核轉(zhuǎn)位，下調(diào)HSC-T6 中的TLR4、p-IκBα、p-NF-κB p65、NF-κB、Collagen I蛋白等多種因子表達(dá)，這種抑制作用呈劑量相關(guān)性。曹杰等［19］研究發(fā)現(xiàn)不同劑量TFL均可減少TLR4、NF-κB、白細(xì)胞介素1受體I（interleukin-1 receptor I，IL-1RI）蛋白表達(dá)量，TFL濃度越高，HSC-LX2內(nèi)TLR4、NF-κB及IL-1RI 等因子含量越低，從而認(rèn)為，TFL 可促進(jìn)HSC-LX2凋亡，對(duì)細(xì)胞晚期凋亡作用更明顯。

2.2 保護(hù)肝細(xì)胞作用肖柳英等［20］通過(guò)研究荔枝核顆粒沖劑對(duì)小鼠免疫性肝炎及急性中毒肝損傷的影響發(fā)現(xiàn)，不同劑量荔枝核顆粒沖劑均可減少小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase，ALT)、天門冬氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase，AST)、丙二醛(malonaldehyde，MDA)含量，提升超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，表明荔枝核可減輕并改善小鼠的免疫性肝炎及急性中毒性肝損傷所致肝細(xì)胞損害。黃紅等［21］認(rèn)為TFL 高、中、低劑量均可減少DMN 所致肝損害模型的血清ALT、AST 含量，且TFL 高、中劑量組ALT、AST 下降幅度均大于秋水仙堿。周學(xué)東等［22］發(fā)現(xiàn)不同劑量TFL 均能改變肝纖維化病理分期及減輕大鼠肝組織損害程度，同時(shí)血清中AST、ALT 含量也較前下降，從而發(fā)揮減少正常肝細(xì)胞凋亡、改善肝組織損傷作用，而其作用機(jī)制可能與上調(diào)Bcl-2、下調(diào)Bax表達(dá)有關(guān)。在治療急性酒精性肝損傷方面，黃景珠等［23］發(fā)現(xiàn)荔枝核提取液可減輕酒精肝病變程度，并降低AST、ALT 及MDA 水平，提高SOD 活性表達(dá)，從而減少肝細(xì)胞破壞及抑制氧化應(yīng)激效應(yīng)起到保護(hù)肝細(xì)胞的作用。

3 降血脂、減輕脂肪肝作用

潘競(jìng)鏘等［24］認(rèn)為荔枝核可改善四氧嘧啶（alloxan，ALX）所致內(nèi)源性脂質(zhì)代謝紊亂及高脂乳劑所致外源性脂質(zhì)代謝紊亂。郭潔文等［25］發(fā)現(xiàn)荔枝核總皂苷可改善高脂血癥-脂肪肝小鼠的各血脂指標(biāo)，發(fā)揮改善肝細(xì)胞脂變，減輕脂肪肝的作用。張巍等［26］發(fā)現(xiàn)不同劑量荔枝核提取物可改善非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）大鼠血脂指標(biāo)，并可下調(diào)肝組織巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）表達(dá)，且呈劑量相關(guān)性。黃玉影［27］認(rèn)為荔枝核有效部位群（包括皂苷、黃酮、鞣質(zhì)）能顯著降低非酒精性脂肪肝合并胰島素抵抗大鼠血清TG、LDL-C、游離脂肪酸和肝脂質(zhì)，并提高SOD 含量，發(fā)揮改善肝細(xì)胞脂質(zhì)蓄積病理變性的作用，這種作用機(jī)制可能與抑制肝組織SREBP-1c mRNA與蛋白的相對(duì)表達(dá)量有一定聯(lián)系。

4 抑制肝癌、增強(qiáng)免疫作用

相關(guān)研究［28-29］發(fā)現(xiàn)荔枝核水提液可能通過(guò)上調(diào)Bcl-2 表達(dá)以促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡。王小英等［30］發(fā)現(xiàn)荔枝核顆粒亦可顯著降低艾氏腹水瘤、S180 腫瘤和肝癌腫瘤的增長(zhǎng)繁殖速度。陳鳳儀等［31］認(rèn)為荔枝核具有減輕肝癌實(shí)體瘤質(zhì)量，加強(qiáng)紅細(xì)胞免疫的作用。熊愛(ài)華等［32］認(rèn)為荔枝核含藥血清可減少人肝癌HepG2 細(xì)胞的增長(zhǎng)繁殖，加速其凋亡速度，而這種促使HepG2 細(xì)胞凋亡的作用呈現(xiàn)劑量相關(guān)性，但抑瘤效果弱于環(huán)磷酰胺。張菊艷［33］發(fā)現(xiàn)按脾臟淋巴細(xì)胞與HepG2 細(xì)胞（3∶1）的比例進(jìn)行共培養(yǎng)的體系聯(lián)合荔枝核乙酸乙酯相抑制肝癌HepG2 細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖作用更顯著。其發(fā)現(xiàn)荔枝核乙酸乙酯相不僅可單獨(dú)抑制HepG2 細(xì)胞的增殖，還可以通過(guò)提升脾淋巴細(xì)胞的活化水平與誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡能力而減緩腫瘤增殖速度。其也確定荔枝核乙酸乙酯相不會(huì)對(duì)正常淋巴細(xì)胞形成毒性作用，并且可適當(dāng)增強(qiáng)免疫細(xì)胞的功能，從而推測(cè)荔枝核乙酸乙酯相抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用可能與增加IL-1β表達(dá)，避免淋巴細(xì)胞抑制腫瘤生長(zhǎng)的效應(yīng)被遏制，提高人體免疫能力，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān)。相關(guān)研究［34-35］分離出多種荔枝核單體成分：倍半萜糖苷類化合物及黃酮苷類化合物，如A倍半萜糖苷、Kaempferol7-Oneohesperidoside 黃酮醇苷和Taxifolin4'-O-β-Dglucopyranoside黃酮醇苷。這三種化合物均可減少HepG2 細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，而抑制HepG2 細(xì)胞增生最為顯著的是半萜糖苷。陶小紅［36］發(fā)現(xiàn)荔枝核提取物組分L2.3也可加速體外培育的人肝癌HepG-2 細(xì)胞的凋亡速度，并且這種降低腫瘤細(xì)胞活性、加速癌細(xì)胞凋亡的作用呈現(xiàn)劑量和時(shí)間依賴關(guān)系，而該機(jī)制可能與激活凋亡因子Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及上調(diào)Fas表達(dá)有關(guān)。

5 結(jié)語(yǔ)

荔枝廣泛分布于我國(guó)具有熱帶、亞熱帶季風(fēng)氣候的南方區(qū)域，其來(lái)源廣泛，價(jià)格低廉。近年來(lái)眾多學(xué)者針對(duì)荔枝核的不同劑型及其活性成分進(jìn)行深入、細(xì)致的研究，證明荔枝核在抗乙肝病毒，抗肝纖維化及保護(hù)肝細(xì)胞，降血脂，減輕脂肪肝，抑制肝癌，增強(qiáng)免疫等5 個(gè)方面具有治療肝臟疾病作用。但是，目前研究仍較多停留在荔枝核的粗提取物方面，缺乏具體、準(zhǔn)確的生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)等方面的分析，且荔枝核在治療肝臟疾病方面完整、準(zhǔn)確的分子機(jī)制及其信號(hào)傳導(dǎo)通路尚無(wú)法明確，今后需要進(jìn)一步深入研究。