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    接骨木藥材質(zhì)量標準研究?

    2021-06-04 06:52:30師慶媛馬鵬文朱昱瀾鄧月婷
    西部中醫(yī)藥 2021年5期
    關鍵詞:接骨木展開劑齊墩

    師慶媛,馬鵬文,朱昱瀾,鄧月婷,2△

    1 甘肅省中藥固體分散制劑重點實驗室/甘肅隴神戎發(fā)藥業(yè)股份有限公司,甘肅 蘭州 730102;2 甘肅省中藥質(zhì)量與標準研究重點實驗室

    接骨木為忍冬科植物接骨木SambucuswilliamsiiHance 的干燥帶葉莖枝、根或根皮。接骨木植物在我國分布廣泛,主要在東北、華北、華中、云南、甘肅等地。在民間應用較多,又名續(xù)骨木、公道老、馬尿騷等[1]。接骨木藥用價值高,化學成分復雜,具有預防骨質(zhì)疏松、抗病毒、抗炎、抗癌、抗氧化、抗艾滋病等多種功效。近年國內(nèi)外對接骨木化學成分和藥理活性成分的研究成果不斷涌現(xiàn),但對于質(zhì)量標準的研究較少,《中華人民共和國藥典》(2015 年版)[2]中未收載接骨木藥材的檢驗標準,在《黑龍江省中藥材標準》(2001 年版)[3]中涉及了性狀、顯微鑒別等檢驗項目。本研究在此基礎上增加了齊墩果酸的TLC 鑒別,另將水分、灰分一并納入考察范圍,為接骨木藥材的質(zhì)量控制提供參考。

    1 材料

    1.1 儀器WD-9403A 型熒光-紫外分析儀(北京沃德生物醫(yī)學儀器公司);HH-6 型數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司);AX204 型電子天平(上海梅特勒公司);DHG-9030A 型電熱恒溫干燥箱(上海鴻都電子科技有限公司);KQ-400KDE 型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

    1.2 試劑齊墩果酸對照品(批號:110709-201607)購于中國食品藥品檢定研究院;其他試劑均為分析純。

    1.3 藥材試驗所用10 個批次藥材產(chǎn)地分別為安徽、湖北、湖南、河南、云南。

    2 方法與結果

    2.1 溶劑的篩選取本品粉末3 g,分別加入20 mL的乙醇、甲醇和乙酸乙酯,超聲處理30 min(功率500 W,頻率40 KHz),濾過,濾液蒸干,殘渣加相應的溶劑2 mL,使溶解,作為供試品溶液。吸取供試品溶液4 μL、齊墩果酸對照品溶液6 μL,點于同一硅膠G 薄層板上,以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%的硫酸乙醇溶液,置105℃加熱至斑點顯色清晰,日光下觀察,然后在365 nm下檢視。乙酸乙酯為溶劑時,日光下斑點最明顯,365 nm 熒光下最清晰,故選乙酸乙酯為提取溶劑。見圖1—2。

    圖1 不同提取溶劑薄層色譜(日光)

    圖2 不同提取溶劑薄層色譜(365 nm熒光)

    2.2 展開劑的選擇取本品粉末3 g,加入乙酸乙酯20 mL,超聲處理30 min(功率500 W,頻率40 KHz),濾過,濾液蒸干,殘渣加相應的溶劑2 mL,使溶解,作為供試品溶液。吸取供試品溶液4 μL、齊墩果酸對照品溶液6 μL,點于同一硅膠G 薄層板上,分別以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯-冰醋酸(65∶25∶10∶1)、環(huán)己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶3∶0.5)、環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯-甲酸(9∶2∶1∶0.2)、環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%的硫酸乙醇溶液,置105℃加熱至斑點顯色清晰,日光下觀察,然后在365 nm 下檢視。結果顯示,當以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)為展開劑時,斑點清晰,分離度較好,因此選擇環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)作為齊墩果酸鑒別的展開劑。

    2.3 點樣量的選擇依次吸取2、4、6 μL 齊墩果酸對照品和2、4、6 μL 接骨木供試品溶液,點于同一硅膠G 薄層板上,以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%的硫酸乙醇溶液,置105℃加熱至斑點顯色清晰,日光下觀察,然后在365 nm下檢視。齊墩果酸對照品6 μL、供試品4 μL顏色斑點和分離度最佳。見圖3—4。

    圖3 不同點樣量薄層色譜(日光)

    圖4 不同點樣量薄層色譜(365 nm熒光)

    2.4 薄層鑒別系統(tǒng)驗證按照《中華人民共和國藥典》(2015 版)薄層色譜法實驗[4-5],依次吸取齊墩果酸對照品6 μL、不同產(chǎn)地接骨木溶液4 μL,點于同一硅膠G 板上,展開劑為環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯(5∶2∶1),展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,105℃加熱至斑點清晰,分別在可見光、365 nm 下檢視,接骨木供試品與齊墩果酸對照品在相應位置顯示相同顏色的斑點,見圖5—6。

    圖5 不同產(chǎn)地接骨木薄層(日光)

    圖6 不同產(chǎn)地接骨木薄層(365 nm熒光)

    2.5 水分及總灰分按照(《中華人民共和國藥典》(2015 年版)通則0831 項下第二法及2302 第一法測定接骨木藥材水分及總灰分。接骨木藥材的水分最低為2.8%,最高為5.2%,以最高測定值的120%設限,為6.2%,故建議將標準定為水分不得超過6.0%;接骨木藥材灰分最低值為0.8%,最高值為2.3%,以最高測定值的120%設限,為2.8%,故建議將標準定為總灰分不得超過3.0%,見表1。

    表1 接骨木藥材水分及總灰分 %

    3 討論

    接骨木作為常用中藥材,具有接骨續(xù)筋、祛風利濕、活血止痛等藥理作用[6]。但由于產(chǎn)地不同,接骨木藥材所含成分有區(qū)別。有文獻選取蘆丁作為接骨木定性定量的目標化合物[7],但筆者選取蘆丁、鹽酸小檗堿成分進行TLC 檢查,特征斑點不明顯,故不選擇蘆丁及鹽酸小檗堿作為定性指標。而在本研究中,接骨木樣品中齊墩果酸成分通過薄層鑒別可以很好分離,提取方法簡單、快捷,斑點清晰明顯,所用試劑普及,易于操作,故將齊墩果酸鑒別納入質(zhì)量標準中[8]。

    在浸出物檢查中,雖然相對水、95%乙醇,將稀乙醇作為溶劑浸出物含量稍高,但最高值為5.82%,最低值為3.10%,整體偏低,故不作為參考指標。含量測定中筆者根據(jù)文獻資料考察熊果酸含量[6],結果顯示10 批接骨木藥材中熊果酸含量在0.02~0.06%之間,含量較低,故不做參考。

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