抑制Polo樣激酶1表達(dá)靶向DNA錯(cuò)配修復(fù)相關(guān)通路并抑制卵巢癌的相關(guān)研究*

李 娟，何 苗，袁春蘭，李紅梅，鄧小梅，肖 雪

（四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院，四川省人民醫(yī)院機(jī)器人微創(chuàng)中心，四川成都610072）

卵巢癌（ovarian cancer，OC）是最致命的婦科惡性腫瘤，其高死亡率歸因于發(fā)現(xiàn)晚、耐藥和缺乏靶向治療［1］。雖然患者最初對(duì)常規(guī)化療敏感，但大多數(shù)患者在12～24個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)，最終死于該病。因此，迫切需要識(shí)別OC的潛在預(yù)后標(biāo)志物和開(kāi)發(fā)新的治療策略來(lái)提高臨床療效。錯(cuò)配修復(fù)（mismatch repair，MMR）是一種進(jìn)化上保守的機(jī)制，可以糾正DNA復(fù)制或損傷過(guò)程中產(chǎn)生的突變，在維持基因組穩(wěn)定性方面起著至關(guān)重要的作用［2］。在OC中，MMR缺陷（MMR deficiency，dMMR）是繼BRCA1和BRCA2突變后遺傳性O(shè)C的最常見(jiàn)原因［3］。Polo樣激酶1（Polo-like kinase 1，PLK1）是絲氨酸/蘇氨酸激酶家族的一員，它在細(xì)胞分裂的不同階段連接到有絲分裂紡錘體上，從而穩(wěn)定著絲粒-微管的附著，并觸發(fā)G2-M相變［4］。PLK1在多種腫癌中過(guò)度表達(dá)，如非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌和黑色素瘤，并與腫瘤進(jìn)展和預(yù)后不良相關(guān)，使得PLK1成為抗腫瘤治療的一個(gè)有希望的靶點(diǎn)［5］。最近研究顯示，PLK1抑制劑通過(guò)調(diào)節(jié)DNA修復(fù)蛋白增強(qiáng)非小細(xì)胞肺癌的放射增敏作用［6-7］，表明PLK1在腫瘤MMR中起著潛在的調(diào)控作用。然而，關(guān)于PLK1在OC相關(guān)MMR中的分子機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。在本研究中，我們分析了PLK1在OC細(xì)胞和組織中的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系，并探討PLK1抑制對(duì)耐5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）OC細(xì)胞活力和凋亡的影響，及其作用機(jī)制是否與MMR有關(guān)。

材料和方法

1 患者和標(biāo)本

在2011年4月～2018年12月期間，126名OC患者納入本研究。所有患者術(shù)前均出現(xiàn)高水平的糖類(lèi)抗原125，術(shù)前未進(jìn)行化療或放療。匹配的鄰近正常卵巢組織距離腫瘤＞2 cm。收集患者的臨床病理特征，包括年齡、腫瘤類(lèi)型、絕經(jīng)期、FIGO分期和腫瘤分級(jí)。術(shù)后隨訪(fǎng)記錄總生存時(shí)間，中位隨訪(fǎng)時(shí)間為39.7個(gè)月。使用針對(duì)MLH1、MSH2、MSH6和PMS2蛋白的抗體進(jìn)行免疫組化，缺乏一個(gè)或多個(gè)這些蛋白的表達(dá)診斷為dMMR。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意，研究前從每位參與者獲得書(shū)面知情同意書(shū)。

2 方法

2.1 臨床病理學(xué)研究采用免疫組化法檢測(cè)PLK1在OC組織及鄰近正常卵巢組織中的表達(dá)水平。組織切片經(jīng)加熱、脫石蠟、復(fù)水、過(guò)氧化氫浸泡，抑制內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性。在100℃下使用檸檬酸鈉緩沖液（pH 6.0）進(jìn)行抗原修復(fù)5 min。然后，用兔多克隆PLK1抗體（Abcam）（稀釋1∶200）在4℃下孵育過(guò)夜。用PBS清洗切片，并在37℃下與生物素標(biāo)記的Ⅱ級(jí)抗一起孵育30 min。最后，切片用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）和蘇木精染色染色。免疫組化法評(píng)分由兩名病理學(xué)家根據(jù)染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞百分比獨(dú)立分析。染色強(qiáng)度分別為0（陰性）、1（陽(yáng)性1+）、2（陽(yáng)性2+）、3（陽(yáng)性3+）。細(xì)胞百分比分別為1（1%～25%）、2（26%～50%）、3（51%～75%）和4（76%～100%）。染色強(qiáng)度得分乘以陽(yáng)性細(xì)胞百分率（0～12）計(jì)算最終染色得分。評(píng)分≥6分為PLK1高表達(dá)，評(píng)分＜6分為PLK1低表達(dá)。

2.2 細(xì)胞系與細(xì)胞培養(yǎng)人OC細(xì)胞系（OVCAR3、SKOV3、ES2和MCAS）、正常卵巢上皮細(xì)胞株HOSEPIC及293T細(xì)胞均取自中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)。所有細(xì)胞系均在含有10%胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS；GIBCO）、1×105U/L青霉素和100 mg/L鏈霉素（GIBCO）的RPMI-1640培養(yǎng)液中培養(yǎng)。OVCAR3和SKOV3細(xì)胞系均通過(guò)5-FU的逐步遞增處理，形成耐5-FU的OC細(xì)胞系（OVCAR3-5FUres和SKOV3-FUres）。5-FU（Sigma-Aldrich）溶解于二甲基亞砜（Sigma-Aldrich）中，并在實(shí)驗(yàn)前儲(chǔ)存在避光的密閉容器中。將親代細(xì)胞系OVCAR3和SKOV3暴露于5-FU濃度逐漸增加（1～100μmol/L）的環(huán)境中。將5-FU（1μmol/L）加入OVCAR3-5FUres和SKOV3-FUres的培養(yǎng)液中，以維持耐藥性。實(shí)驗(yàn)前至少2周將細(xì)胞保存在無(wú)5-FU的培養(yǎng)液中。使用Lipofectamine 2000（Invitrogen）將PLK1重組質(zhì)粒（Addgene）、PLK1-shRNA慢病毒（sh-PLK1，上海吉瑪基因有限公司）轉(zhuǎn)染到OVCAR3、SKOV3、OVCAR3-5FUres和SKOV3-5FUres細(xì)胞中。

2.3 細(xì)胞活力檢測(cè)采用CCK-8（Dojindo）測(cè)量細(xì)胞活力。為了分析PLK1對(duì)5-FU治療的影響，分別將轉(zhuǎn)染PLK1重組質(zhì)粒、sh-PLK1或陰性對(duì)照的細(xì)胞用0、2、4、8、16、32、64和128μmol/L 5-FU處理48 h。將CCK-8溶液添加到培養(yǎng)液中，并在37℃和5%CO2下培養(yǎng)1小時(shí)。使用微板閱讀器（Thermo Fisher）獲得樣品在450 nm處吸光度（A）值。

2.4 建立穩(wěn)定表達(dá)PLK1的細(xì)胞將S-FLAG-streptavidin-binding protein（SFB）三重標(biāo)記的PLK1表達(dá)載體轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞，在含2 mg/L嘌呤霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)7 d。然后選擇對(duì)嘌呤霉素有抗性的無(wú)性系進(jìn)行擴(kuò)增。Western blot證實(shí)SFB-PLK1的表達(dá)。

2.5 串聯(lián)親和純化收集50個(gè)10 cm2培養(yǎng)皿中穩(wěn)定表達(dá)SFB標(biāo)記的PLK1的293T細(xì)胞，用NETN300緩沖液（50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.0，300 mmol/L NaCl，0.5 mmol/L EDTA，0.5%Nonidet P-40）在冰上裂解20 min。用等量的ddH2O稀釋上清液，用鏈霉親和素偶聯(lián)珠在4℃孵育2 h。用飽和生物素（Sigma）在NETN100緩沖液中洗脫30 min。洗脫液與s蛋白瓊脂糖珠（Millipore）在4℃下孵育2 h，用NETN100緩沖液洗滌3次。與s蛋白瓊脂糖珠結(jié)合的蛋白用SDS上樣緩沖液洗脫，并進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳。切除整個(gè)蛋白條帶（小于1 cm）并上質(zhì)譜分析。

2.6 質(zhì)譜分析將凝膠條帶切成1 mm×1 mm×1 mm的小片，凝膠用胰酶消化過(guò)夜。用乙腈提取肽段，真空干燥。樣品在高效液相色譜溶劑A（2.5%乙腈和0.1%甲酸）中溶解后，裝載到Proxeon EASYnLCII液相色譜泵（Thermo Fisher）上。通過(guò)增加流動(dòng)相A的濃度（97.5%乙腈，0.1%甲酸），在30 min內(nèi)用乙腈梯度（6%～30%）洗脫樣品。洗脫后直接通過(guò)Orbitrap Elite MS（Thermo Fisher）檢測(cè)。通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)每個(gè)肽產(chǎn)生的特定片段離子進(jìn)行檢測(cè)、分離和碎片化。使用SEQUEST將蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)與獲得的片段模式匹配，對(duì)質(zhì)譜進(jìn)行分析。對(duì)半胱氨酸的羧基氨基甲基修飾和蛋氨酸殘基的氧化修飾分別為靜態(tài)修飾和可變修飾。構(gòu)建目標(biāo)-誘餌庫(kù)篩選出的肽段的假發(fā)現(xiàn)率（false discovery rate，F(xiàn)DR）＜1%。

2.7 免疫共沉淀和Western blot法收集細(xì)胞，用NETN300緩沖液在冰上裂解10 min。用相同體積的ddH2O稀釋上清液，并在4℃下用鏈霉親和素結(jié)合珠、2μg指示抗體和40μL蛋白A瓊脂糖微球孵育2 h。結(jié)合蛋白用SDS負(fù)載緩沖液洗脫，經(jīng)SDS-PAGE分離。所有Western blot實(shí)驗(yàn)均按標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行。使用的主要抗體有：人MutS蛋白同系物2（human mutShomolog 2，hMSH2；Abcam）、PLK1和GAPDH（Sigma）。

2.8 Annexin V-FITC/PI凋亡檢測(cè)在細(xì)胞凋亡檢測(cè)中，將穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PLK1抑制劑、陰性對(duì)照或hMSH2 siRNA的OVCAR3-5FUres細(xì)胞置于10 cm培養(yǎng)皿中，用5-FU（10μmol/L）處理48 h。然后將細(xì)胞胰蛋白酶化并收集到離心管中，以800×g離心3 min，用冷PBS洗滌2次。采用Annexin V-FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒（Invitrogen）檢測(cè)細(xì)胞凋亡。處理后取細(xì)胞，用冷PBS沖洗。將1×105個(gè)細(xì)胞重新懸浮在100μL 1×結(jié)合緩沖液中，然后添加5μL Annexin V-FITC和1 μL PI工作液。室溫孵育15 min后，加入400μL膜聯(lián)蛋白結(jié)合緩沖液并混合，然后使用FACSCalibur流式細(xì)胞儀（BDBiosciences）測(cè)量細(xì)胞凋亡率。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。連續(xù)變量表示為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD），分類(lèi)變量表示為頻率。雙尾Studentt檢驗(yàn)確定體外實(shí)驗(yàn)中各組間的顯著性。采用χ2檢驗(yàn)分析PLK1與臨床病理特征的關(guān)系。用Kaplan-Meier法計(jì)算生存率和對(duì)數(shù)秩檢驗(yàn)生存曲線(xiàn)之間的差異。采用Spearman秩相關(guān)分析評(píng)價(jià)OVCAR3、SKOV3、OVCAR3-5FUres和SKOV3-5FUres細(xì)胞中PLK1表達(dá)與IC50的關(guān)系。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 PLK1在OC中高表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系

與HOSEP1C細(xì)胞相比，在OC細(xì)胞系中，PLK1水平顯著上調(diào)（P＜0.01），見(jiàn)圖1A。在大多數(shù)OC組織中，PLK1表達(dá)較癌旁組織顯著上調(diào)（P＜0.05），見(jiàn)圖1B。圖1C顯示了免疫組化分析PLK1在OC組織中低表達(dá)和高表達(dá)的典型圖片。Kaplan-Meier分析顯示，PLK1高表達(dá)OC患者的平均存活時(shí)間顯著低于PLK1低表達(dá)OC患者（P＜0.01），見(jiàn)圖1D。OC中PLK1水平的升高與FIGO分期、腫瘤分級(jí)、dMMR等臨床病理特征顯著正相關(guān)（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2 PLK1在5-FU耐藥OC細(xì)胞系中上調(diào)，并降低對(duì)5-FU的敏感性

Figure 1.The expression of PLK1 is up-regulated in OCcells and tissues，which is related to the overall survival rate of OCpatients.A：Western blot was used to detect PLK1 protein expression in human OC cell lines（ES2，SKOV3，MCAS，OVCAR3）and normal ovarian epithelial cell line HOSEPIC（n=3）.B：Western blot was used to detect the expression of PLK1 in OC tissue and paracancerous tissue.T：tumor tissue；N：paracancerous tissue；P：paired tissue（n=5）.C：the typical pictures of low and high expression of PLK1 in OCtissues were analyzed by immunohistochemistry（n=126）.D：Kaplan-Meier survival analysis of OC patients with high or low PLK1 expression（n=126）.Scale bar=50μm.Mean±SD.**P＜0.01 vs HOSEPICgroup；#P＜0.05，##P＜0.01 vs OCgroup.圖1 PLK1在OC細(xì)胞和組織中的表達(dá)上調(diào)，與OC患者的總體生存率相關(guān)

與正常OVCAR3和SKOV3細(xì)胞相比，OVCAR3-5FUres和SKOV3-5FUres細(xì)胞中PLK1表達(dá)均顯著上調(diào)（P＜0.01），見(jiàn)圖2。為了探討PLK1在OC細(xì)胞5-FU耐藥中的生物學(xué)作用，采用CCK-8法計(jì)算5-FU的IC50值（5-FU降低細(xì)胞活力50%的濃度），其中5-FU對(duì)SKOV3細(xì)胞的IC50為（10.45±0.61）μmol/L，對(duì)SKOV3-5FUres細(xì) 胞 為（39.89±1.89）μmol/L，對(duì)OVCAR3細(xì)胞為（7.34±0.36）μmol/L，對(duì)OVCAR3-5FUres細(xì)胞為（48.45±2.88）μmol/L。各細(xì)胞系中PLK1的表達(dá)與5-FU的IC50值呈正相關(guān)（r=0.997，P=0.008），見(jiàn)圖3A。為了證實(shí)5-FU耐藥與PLK1表達(dá)之間的關(guān)系，將OVCAR3-5FUres和SKOV3-5FUres轉(zhuǎn)染sh-PLK1或陰性對(duì)照（sh-NC），然后用濃度增加的5-FU（0、2、4、8、16、32、64和128μmol/L）處理細(xì)胞48 h。CCK-8結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照細(xì)胞相比，轉(zhuǎn)染sh-PLK1的細(xì)胞活力顯著降低（P＜0.05），見(jiàn)圖3B、C。相比之下，轉(zhuǎn)染PLK1重組質(zhì)粒的OVCAR3和SKOV3細(xì)胞的活力顯著高于對(duì)照細(xì)胞（P＜0.05），見(jiàn)圖3D、E。

3 PLK 1與hMSH2相互作用

為了深入了解PLK1在OC細(xì)胞中的作用，我們建立了穩(wěn)定表達(dá)SFB標(biāo)記PLK1的293T細(xì)胞，并進(jìn)行了串聯(lián)親和純化和質(zhì)譜分析，其中hMSH2是鑒定的最豐富的蛋白質(zhì)之一（圖4A及表2），表明PLK1可能與癌細(xì)胞中的hMSH2有功能聯(lián)系。我們用外顯親和力檢測(cè)了串聯(lián)蛋白的相互作用，可見(jiàn)SFB標(biāo)記的PLK1與HA標(biāo)記的hMSH2相互作用（圖4B）。共聚焦顯微鏡分析還顯示，SFB標(biāo)記的PLK1與HA標(biāo)記的hMSH2共定位（圖4C）。

4 PLK1通過(guò)靶向hMSH2促進(jìn)細(xì)胞凋亡

所有的細(xì)胞均用10μmol/L 5-FU或相同體積的DMSO作為對(duì)照，孵育48 h。結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染sh-PLK1的OVCAR3-5FUres細(xì)胞的凋亡率顯著高于相應(yīng)的陰性對(duì)照（sh-NC）細(xì)胞（P＜0.01）；在不同處理組中，轉(zhuǎn)染sh-PLK1和5-FU處理的OVCAR3-5FUres細(xì)胞凋亡率最高；此外，hMSH2基因敲除使sh-PLK1轉(zhuǎn)染的OVCAR3-5FUres細(xì)胞的凋亡率降低（P＜0.01），見(jiàn)圖5。

表1 PLK 1蛋白表達(dá)水平與臨床病理特征相關(guān)Table 1.Correlation between PLK1 protein expression and clinicopathological features

Figure 2.The relative expression of PLK1 in 5-FU-sensitive and-resistant SKOV3 cells（A）and OVCAR3 cells（B）was detected by Western blot.Mean±SD.n=3.**P＜0.01 vs SKOV3 group；##P＜0.01 vs OVCAR3 group.圖2 Western blot檢測(cè)PLK 1在5-FU敏感和耐藥的SKOV3細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)

討 論

Figure 3.PLK1 reduces the sensitivity of OCcells to 5-FU.A：Spearman rank correlation analysis was used to evaluate the relationship between PLK1 expression and IC50 of 5-FU in OVCAR3，SKOV3，OVCAR3-5FUres and SKOV3-5FUres cells；B and C：CCK-8 assay was used to detect the activity of 5-Fu-resistant OCcells transfected with sh-PLK1 or negative control；D and E：CCK-8 assay was used to determine the viability of OCcells transfected with PLK1 or negative control.Mean±SD.n=3.*P＜0.05，**P＜0.01 vs sh-NCgroup；#P＜0.05，##P＜0.01 vs NCgroup.圖3 PLK1降低OC細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性

Figure 4.PLK1 interacted with hMSH2.A：293T cells stably expressing either the vector control or SFB-tagged PLK1 were used for tandem affinity purification；B：co-immunoprecipitation analysis of SFB-tagged PLK1 and HA-tagged hMSH2 in 293T cells；C：confocal microscopic analysis of SFB-tagged PLK1 and HA-tagged hMSH2 in 293Tcells.n=3.圖4 PLK1與hMSH2相互作用

表2 質(zhì)譜鑒定與PLK 1相互作用的蛋白Table 2.Identification of proteins interacting with PLK1 by mass spectrometry

Figure 5.Down-regulation of PLK1 increased the sensitivity of OVCAR3-5FUres cells to 5-FU by targeting hMSH2.Mean±SD.n=3.##P＜0.01 vs sh-NC+DMSOgroup；*P＜0.05 vs sh-PLK1+DMSOgroup；△△P＜0.01 vs sh-PLK1+5-FUgroup.圖5 PLK1表達(dá)降低通過(guò)靶向hMSH2增加OVCAR3-5FUres細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性

已經(jīng)證實(shí)PLK1在許多不同的腫瘤類(lèi)型中過(guò)度表達(dá)，并且干擾PLK1的功能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯和凋亡［8-9］。在這項(xiàng)研究中，我們檢測(cè)PLK1在OC細(xì)胞和腫瘤組織中均上調(diào)，并且高水平的PLK1蛋白顯著縮短了OC患者的總生存期。此外，降低PLK1表達(dá)通過(guò)直接靶向hMSH2，提高了體外OC細(xì)胞對(duì)5-FU治療的敏感性。化療耐藥是OC患者預(yù)后不良的主要原因，尤其是對(duì)基于5-FU的輔助治療反應(yīng)微弱或完全不起作用的dMMR狀態(tài)的OC患者。最近一些數(shù)據(jù)表明，MMR系統(tǒng)與化療耐藥相關(guān)；當(dāng)MMR系統(tǒng)出現(xiàn)功能性錯(cuò)誤或缺陷時(shí)，修復(fù)過(guò)程失敗，未修復(fù)的突變分散在整個(gè)基因組中，導(dǎo)致腫瘤相關(guān)基因的突變，出現(xiàn)化療耐藥［7］。識(shí)別和修復(fù)DNA錯(cuò)配有利于改善OC患者的腫瘤預(yù)后。因此，我們認(rèn)為PLK1是改善dMMR OC患者化療耐藥的一個(gè)有價(jià)值的靶點(diǎn)。先前的研究表明PLK1的異常表達(dá)參與了包括OC在內(nèi)的一些腫瘤的惡性過(guò)程［10-13］。研究證實(shí)，PLK1在OC組織中顯著上調(diào)，并通過(guò)激活Wnt途徑和增加相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子c-Myc和Nanog來(lái)影響OC細(xì)胞的重編程［14］。然而，PLK1與5-FU耐藥之間的關(guān)聯(lián)在OC中仍然是未知的。本研究顯示PLK1在5-FU耐藥的OC細(xì)胞系中上調(diào)。此外，我們檢測(cè)PLK1與dMMR狀態(tài)呈正相關(guān)?？偟膩?lái)說(shuō)，這些數(shù)據(jù)表明PLK1在腫瘤MMR中起著潛在的調(diào)控作用。

多項(xiàng)的證據(jù)表明，表觀遺傳改變可能在OC化療抵抗中起重要作用［15］。在哺乳動(dòng)物中，MMR基因不僅在DNA復(fù)制和修復(fù)中起著關(guān)鍵作用，而且在DNA損傷信號(hào)和隨后的細(xì)胞凋亡中也起著關(guān)鍵作用［3］。由于化療是眾多癌癥治療中DNA損傷的主要成分，MMR蛋白的丟失使細(xì)胞對(duì)DNA損傷因子產(chǎn)生抵抗力［7］。Ding等［16］報(bào)告，MLH1過(guò)表達(dá)可以使OC細(xì)胞對(duì)順鉑誘導(dǎo)死亡敏感。Jia等［17］揭示了上皮性卵巢癌中PMS2的表達(dá)受到Akt的翻譯后調(diào)控，進(jìn)一步支持MMR系統(tǒng)對(duì)鉑誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡至關(guān)重要。本研究借助串聯(lián)親和純化和質(zhì)譜分析支持了hMSH2是PLK1在OC細(xì)胞中的結(jié)合蛋白。hMSH2本身［18］或作為hMSH2-hMSH6復(fù)合物［3］可識(shí)別化療藥物引起的特定DNA損傷。此外，hMSH2可與ATR相互作用，并將其招募到DNA損傷部位，進(jìn)一步激活一系列凋亡蛋白，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡［19］。因此，hMSH2在OC的耐藥中起重要作用。本研究顯示，hMSH2基因敲除逆轉(zhuǎn)了PLK1抑制劑的功能。這些結(jié)果表明PLK1通過(guò)下調(diào)hMSH2來(lái)增強(qiáng)OC細(xì)胞對(duì)5-FU的抗性。

綜上所述，PLK1可能成為dMMR OC的一個(gè)有希望的治療靶點(diǎn)，抑制PLK1表達(dá)通過(guò)靶向hMSH2提高了OC細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性。因此，PLK1抑制劑可能與化療藥物聯(lián)合用于OC治療。