新型冠狀病毒肺炎患者新型冠狀病毒抗體持續(xù)陽(yáng)性時(shí)間的影響因素

李侗曾 梁連春

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院呼吸與感染疾病科（北京100069）

新型冠狀病毒肺炎（COVID?19）是由新型冠狀病毒（SARS?CoV?2）引起的急性呼吸道疾?。?］。該病屬于新發(fā)傳染病，目前的研究結(jié)果對(duì)于其診斷、治療以及預(yù)防等方面有一定的了解，SARS?CoV?2疫苗的研發(fā)也已上市；已有眾多研究［2-6］表明SARS?CoV?2抗體（IgG/IgM），可以用于協(xié)助診斷SARS?CoV?2感染，但鑒于抗體檢測(cè)試劑應(yīng)用于臨床的時(shí)間有限，目前尚缺乏對(duì)于恢復(fù)期COVID?19患者SARS?CoV?2抗體的長(zhǎng)期觀察性研究報(bào)道。隨著感染后SARS?CoV?2隨訪時(shí)間的延長(zhǎng)，可以觀察到SARS?CoV?2抗體由陰性轉(zhuǎn)陽(yáng)性，再由陽(yáng)性逐漸轉(zhuǎn)為陰性，其協(xié)助診斷SARS?CoV?2感染的價(jià)值可能受到發(fā)病時(shí)間長(zhǎng)短限制，對(duì)回顧性的疫情流行病學(xué)調(diào)查、疫苗效果的評(píng)價(jià)有重要影響［7］。本研究以北京佑安醫(yī)院收治的COVID?19患者為研究對(duì)象，分析隨訪至發(fā)病6個(gè)月以后患者抗體持續(xù)陽(yáng)性情況及患者抗體持續(xù)陽(yáng)性的影響因素，為COVID?19的臨床診療、流行病學(xué)調(diào)查及疫苗應(yīng)用提供一定的參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象本研究為回顧性研究，選取2020年1月21日至10月25日于北京佑安醫(yī)院就診的COVID?19患者為研究對(duì)象，納入在隨訪期間SARS?CoV?2抗體檢測(cè)結(jié)果且隨訪時(shí)間超過(guò)6個(gè)月的COVID?19患者43例。隨訪起點(diǎn)是患者發(fā)病時(shí)間，隨訪終點(diǎn)為患者最后1次檢測(cè)SARS?CoV?2抗體時(shí)間。COVID?19的診斷標(biāo)準(zhǔn)和臨床分型依據(jù)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)辦公廳頒布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第八版）》。本研究符合首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)倫理規(guī)范的要求。

1.2 資料收集收集患者的人口學(xué)資料（年齡、性別）、流行病學(xué)接觸史、發(fā)病日期、基礎(chǔ)疾病、血常規(guī)（白細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值、血紅蛋白）、肝腎功能、CRP、是否有發(fā)熱情況等資料。收集患者住院及出院后隨訪期間所有的SARS?CoV?2抗體檢測(cè)結(jié)果。

1.3 SARS?CoV?2抗體檢測(cè)采用唐山英諾特生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的SARS?CoV?2抗體檢測(cè)試劑盒（膠體金法）。

1.4 分組本研究根據(jù)患者發(fā)病后的SARS?CoV?2抗體檢測(cè)結(jié)果，將發(fā)病后6個(gè)月內(nèi)連續(xù)兩次檢測(cè)IgM、IgG抗體均轉(zhuǎn)為陰性的患者定義為轉(zhuǎn)陰組，抗體持續(xù)陽(yáng)性時(shí)間超過(guò)了6個(gè)月的患者定義為持續(xù)陽(yáng)性組［8］。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，非正態(tài)分布的計(jì)量資料以M（P25，P75）表示，計(jì)數(shù)資料以例（%）表示。計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher′s精確概率法檢驗(yàn)。比較抗體持續(xù)陽(yáng)性患者與轉(zhuǎn)陰組患者之間臨床指標(biāo)差異，并將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量納入多因素logistic回歸分析，采用逐步向前的回歸方法篩選變量。P<0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者臨床資料隨訪超過(guò)6個(gè)月的COVID?19患者共有43例，其中男23例（53.5%），臨床分型為普通型37例（86.0%），中位隨訪時(shí)間為182 d。轉(zhuǎn)陰組10例（23.3%），持續(xù)陽(yáng)性組33例。持續(xù)陽(yáng)性組患者的年齡、發(fā)熱的比例顯著高于轉(zhuǎn)陰組患者，而淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于轉(zhuǎn)陰組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 SARS?CoV?2抗體持續(xù)陽(yáng)性時(shí)間的影響因素將表1中年齡、發(fā)熱、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)納入多因素分析，結(jié)果顯示發(fā)熱、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)低是患者SARS?CoV?2抗體持續(xù)陽(yáng)性的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表2。

表1 SARS?CoV?2抗體持續(xù)陽(yáng)性6個(gè)月患者與轉(zhuǎn)陰患者之間臨床特點(diǎn)比較Tab.1 Comparison of clinical characteristics between SARS?CoV?2 antibody positive patients and negative patients for 6 months M（P25，P75）

3 討論

SARS?CoV?2屬于β屬的冠狀病毒，與其他冠狀病毒有一定的同源性。以往研究表明，嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒（SARS?CoV）IgM抗體出現(xiàn)時(shí)間早于IgG，抗體在發(fā)病后4個(gè)月達(dá)到高峰，并持續(xù)時(shí)間至少2年［9］。中東呼吸綜合征（MERS?CoV）抗體在發(fā)病后至少持續(xù)34個(gè)月［10］。在本研究中，經(jīng)過(guò)對(duì)恢復(fù)期患者的長(zhǎng)期隨訪，發(fā)現(xiàn)患者發(fā)病后6個(gè)月SARS?CoV?2 IgM全部轉(zhuǎn)陰，23.3%的恢復(fù)期COVID?19患者IgG轉(zhuǎn)陰；本研究最長(zhǎng)隨訪到發(fā)病后231 d，該患者的IgG仍為陽(yáng)性。這一結(jié)果與其他研究一致［11-12］，但與上述兩種冠狀病毒抗體相比，SARS?CoV?2抗體持續(xù)時(shí)間明顯較短，這對(duì)COVID?19疫情的回顧性診斷或流行病學(xué)調(diào)查有一定的參考價(jià)值。

表2 影響SARS?CoV?2抗體持續(xù)陽(yáng)性（6個(gè)月）的logistic回歸分析Tab.2 Logistic regression analysis of SARS?CoV?2 antibody persistence（6 months）

謝朝梅等［4］發(fā)現(xiàn)COVID?19患者的核酸轉(zhuǎn)陰時(shí)間與IgM、IgG轉(zhuǎn)陽(yáng)時(shí)間有關(guān)，IgM、IgG轉(zhuǎn)陽(yáng)時(shí)間越快，核酸轉(zhuǎn)陰時(shí)間也越快，考慮SARS?CoV?2抗體有可能對(duì)感染SARS?CoV?2有一定的保護(hù)作用，SARS?CoV?2抗體檢出時(shí)間有助于對(duì)新冠疫苗保護(hù)時(shí)間的預(yù)估分析。在本研究中，COVID?19患者的抗體在發(fā)病后6個(gè)月23.3%轉(zhuǎn)為陰性，因此對(duì)于感染SARS?CoV?2以后發(fā)生再次感染的風(fēng)險(xiǎn)隨著距離首次感染時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加。近期香港大學(xué)報(bào)道了1例二次感染SARS?CoV?2的案例，該患者在首次感染后的4個(gè)月再次感染SARS?CoV?2，但該患者兩次感染的病毒株基因排序有多個(gè)不同之處，由此可知，即使SARS?CoV?2抗體有保護(hù)作用，其持續(xù)時(shí)間較短，且缺乏交叉保護(hù)作用，是否存在抗體依賴(lài)性感染增強(qiáng)作用尚需進(jìn)一步研究。另外，一項(xiàng)來(lái)自美國(guó)的研究報(bào)道了一例患者在48 d內(nèi)感染了兩種不同基因型的SARS?CoV?2，并且第二次感染更為嚴(yán)重，這就表明感染過(guò)SARS?CoV?2并不能對(duì)患者有完全的保護(hù)作用，對(duì)于所有患者都應(yīng)采取同樣的防護(hù)措施［13］。

本研究進(jìn)一步分析了可能影響COVID?19患者SARS?CoV?2抗體持續(xù)時(shí)間的因素，多因素回歸分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)較低、發(fā)熱的患者在發(fā)病后6個(gè)月抗體持續(xù)陽(yáng)性率較高，在未轉(zhuǎn)陰患者中危重癥的比例也較高。有研究發(fā)現(xiàn)SARS?CoV?2 S1蛋白特異性IgG水平與年齡、乳酸脫氫酶（LDH）水平呈正相關(guān)，與淋巴細(xì)胞百分率呈負(fù)相關(guān)，與本研究結(jié)果一致［14］。另外，也有眾多研究表明淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)下降是COVID?19重癥化的預(yù)警指標(biāo)［14-17］，由此推測(cè)，抗體持續(xù)陽(yáng)性的時(shí)間可能與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。一項(xiàng)來(lái)自法國(guó)的隨訪時(shí)間為6個(gè)月的前瞻性研究結(jié)果顯示大約一半的輕癥患者抗體檢測(cè)陰性［8］，另外一項(xiàng)對(duì)無(wú)癥狀感染者的研究顯示，40%的COVID?19無(wú)癥狀感染者的在診斷后的3～6個(gè)月內(nèi)的IgG變?yōu)殛幮?，而與輕癥患者相比，重癥患者產(chǎn)生的抗體滴度顯著升高，且在至少持續(xù)5～7個(gè)月［18-19］，該研究再次證實(shí)了抗體持續(xù)時(shí)間與患者病情相關(guān)，對(duì)于無(wú)癥狀感染者，免疫應(yīng)答較弱，抗體水平快速下降，對(duì)回顧性免疫性調(diào)查造成一定影響［20］。

隨著對(duì)SARS?CoV?2病毒的研究不斷加深，核酸以及抗體檢測(cè)試劑的普及，COVID?19診斷、治療及預(yù)防措施也不斷提高。本研究結(jié)果提示淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)偏低、臨床有發(fā)熱癥狀的COVID?19患者的抗體陽(yáng)性持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)，本研究可以為COVID?19疫情的追蹤調(diào)查、疫苗的研發(fā)等提供參考依據(jù)。