野胡麻的生藥學(xué)研究

朱燕寧　張莎　李勤　李安林　田占萍　姚藍(lán)

【摘 要】 目的：建立野胡麻的生藥學(xué)鑒定方法。方法：對(duì)不同產(chǎn)地野胡麻全草的性狀特征進(jìn)行鑒別考察;以野胡麻全草為研究對(duì)象，分別對(duì)根、莖、果實(shí)的粉末特征以及根、莖、葉的組織構(gòu)造特征進(jìn)行考察;以標(biāo)志性成分京尼平苷為標(biāo)準(zhǔn)品，采用薄層色譜（Thin layer chromatography，TLC）進(jìn)行理化鑒別，對(duì)不同產(chǎn)地野胡麻成分進(jìn)行分析。結(jié)果：野胡麻為多年生直立草本，莖近基部被棕黃色鱗片，葉呈針狀或?qū)挆l形，全緣或有疏齒，葉為異面葉?？偁罨ㄐ蝽斏ㄝ嘟镔|(zhì)，花冠紫色或深紫紅色。根橫切面韌皮部較寬，形成層明顯，其粉末中石細(xì)胞具有長方形和圓形兩種石細(xì)胞，網(wǎng)紋導(dǎo)管多見，具含針晶的薄壁細(xì)胞。莖橫切面髓為中空，有石細(xì)胞環(huán)帶存在，形成層不明顯，不等式氣孔多見，螺紋導(dǎo)管較多，非腺毛長而彎曲。果實(shí)的粉末中可見果皮細(xì)胞壁連珠狀增厚。野胡麻中含有多種化合物，且其環(huán)烯醚萜苷類成分且其含量較高。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)建立方法簡(jiǎn)便、可行，為野胡麻的生藥學(xué)鑒定提供理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 野胡麻;性狀鑒別;顯微鑒定;薄層色譜

【中圖分類號(hào)】R932 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2021）04-0025-06

Abstract：Objective To establish a method for pharmacognostic identification of Dodartia orientalis.Methods The characteristics of Dodartia orientalis from different areas were identified， the powder characteristics of root， stem an-d fruit and the tissue structure characteristics of root， stem and leaf were inve-stigated respectively， and the landmark ingredient geniposide was used as the standard， and the components of Dodartia orientalis from different areas were analyzed by thin layer chromatography （Thin layer chromatography，TLC）.Results Dodartia orientalis is a perennial erect herb， the stem is brownish yellow scales near the base， the leaves are needle-shaped or broadly striped， entire or sparsely toothed， and the leaves are heterofacial leaves. Racemes terminal， caly-x subleathery， Corolla purple or deep purplish red. The phloem in the transverse section of the root is wide and the cambium is obvious. the stone cells in t-he powder have two kinds of stone cells： rectangular and round， reticulated du-cts are common， and there are parenchyma cells containing needle crystals. In the cross section of the stem， the medulla is hollow， there are stone cell bands， the cambium is not obvious， the inequality stomata are common， there are many threaded ducts， and the non-glandular hairs are long and curved. The cel-l wall of pericarp was thickened one after another in the powder of the fruit. Dodartia orientalis contains a variety of compounds， and its iridoid glycosides are high in content.Conclusion The method established in this experiment is simple and feasible， which provides a theoretical basis for the pharmacognosti-c identification of Dodartia orientalis.

Keywords：Dodartia orientalis;Character Identification; Microscopic Identification; TLC

野胡麻來源于玄參科植物野胡麻Dodartia orientalis.的全草，分布于我國新疆、內(nèi)蒙古、甘肅、四川，蒙古人民共和國、蘇聯(lián)、伊朗也有，具有清熱解毒、散風(fēng)止癢的功效，常用于用于上呼吸道感染、肺炎、氣管炎、扁桃體炎、淋巴結(jié)炎、尿道感染、神經(jīng)衰弱，外用可治皮膚瘙癢、蕁麻疹、濕疹。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[1-3]可知目前從野胡麻全草中分離出來的主要化學(xué)成分有環(huán)烯醚萜類和環(huán)烯醚萜苷類、二萜類、三萜類和苯乙醇苷類等。

目前國內(nèi)關(guān)于其生藥學(xué)研究較少，僅有李鵬等[4]1篇研究成果僅對(duì)野胡麻的根、莖、葉的顯微特征進(jìn)行了簡(jiǎn)單的考察，但對(duì)野胡麻藥材植物形態(tài)細(xì)節(jié)特征、各器官的組織構(gòu)造特征、粉末特征，以及對(duì)于其薄層色譜鑒別特征未有相關(guān)描述。因此，本研究通過選取6批不同地區(qū)的野胡麻原藥材，針對(duì)原植物形態(tài)特征;植物的根、莖、葉、果實(shí)、種子的粉末特征以及組織構(gòu)造特征，以及不同批次野胡麻藥材的化學(xué)成分進(jìn)行初步考察，為野胡麻的研究與開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 研究依據(jù)

在科學(xué)技術(shù)飛速發(fā)展的今天，雖然化學(xué)藥物占據(jù)著主導(dǎo)地位，但天然藥物仍是先導(dǎo)化合物，以及活性成分發(fā)現(xiàn)的重要途徑。目前，國內(nèi)外的許多藥物就是天然產(chǎn)物為先導(dǎo)化合物，經(jīng)過結(jié)構(gòu)修飾、結(jié)構(gòu)改造及生物合成而產(chǎn)生的。野胡麻來源于玄參科植物野胡麻Dodartia orientalis.的全草，具有多種藥理作用，但經(jīng)筆者查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)國內(nèi)外對(duì)其化學(xué)成分與藥理作用研究較多，對(duì)其生藥學(xué)鑒定未有較為完整的描述，因此，本研究通過對(duì)不同批次的野胡麻進(jìn)行性狀鑒定、顯微鑒定、理化鑒定，為野胡麻的研究與開發(fā)提供理論依據(jù)。

2 材料與儀器

2.1 實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)所用藥材均采自于新疆不同地方，由新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院中藥系姚藍(lán)副教授鑒定為野胡麻Dodartia orientalis L.正品。1號(hào)采自新疆維吾爾自治區(qū)巴音郭楞蒙古自治州和碩縣，2號(hào)采自新疆維吾爾自治區(qū)昌吉回族自治州木壘照壁山鄉(xiāng)宋家井，3號(hào)采自新疆維吾爾自治區(qū)伊犁哈薩克自治州尼勒克縣喀拉托別鄉(xiāng)闊克托干村，4號(hào)采自新疆維吾爾自治區(qū)塔城地區(qū)額敏縣霍吉爾特蒙古民族鄉(xiāng)阿勒熱村，5號(hào)采自新疆維吾爾自治區(qū)伊犁哈薩克自治州伊寧縣圖地于孜村，6號(hào)采自新疆維吾爾自治區(qū)昌吉回族自治州呼圖壁縣105團(tuán)西虹路。

2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑 WD-9403C紫外儀（北京市六一儀器廠），十兩裝高速中藥粉碎機(jī)（型號(hào)：LG-500A），顯微鏡，薄層硅膠板H（青島海洋化工廠20161006），試劑：甲醇（北京捷特澳科貿(mào)有限公司J1-9093-68）、石油醚（廣州化學(xué)試劑廠C63-84208E）、正丁醇為分析純（廣州化學(xué)試劑廠C64-22925-1L）

3 方法

3.1 實(shí)驗(yàn)方法

3.1.1 采集藥材 查閱資料，尋找野胡麻生長適宜的環(huán)境，并記錄數(shù)據(jù)，記錄其在新疆的分布范圍。

3.1.2 顯微鑒定野胡麻根及莖 橫切面染色：取間苯三酚2.5g，溶于50mL 95%乙醇溶液當(dāng)中，即成間苯三酚試液。先在根和莖切片上滴1滴濃鹽酸，再滴1滴間苯三酚試液染色即成。

將藥材粉碎后，過60目，采用水合氯醛裝片，置顯微鏡下觀察。并將藥材做組織橫切面觀察其特征。

3.1.3 薄層色譜 檢識(shí)分別選取6批藥材，每批藥材選取全草，粉碎機(jī)粉碎、過60目篩。取藥材粗粉3g，加入甲醇30mL，浸潤15min，超聲提取30min，過濾。將濾液揮干后，加入10mL蒸餾水溶解殘?jiān)謩e用等體積石油醚萃取3次，再用等體積正丁醇溶液各萃取3次，收集正丁醇萃取液，作為供試品溶液。將京尼平苷以甲醇為溶劑制成1mg/mL的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。分別在展開劑乙酸乙酯、無水乙醇和水中展開，取出晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液為顯色劑，在105℃下烘至顯色。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 采集地?cái)?shù)據(jù)

4.2 性狀鑒定 野胡麻為多年生直立草本，根粗壯，主根可延伸至地下5m以上，帶肉質(zhì)，須根少。莖單一或束生，近基部被棕黃色鱗片，莖從基部起至到頂端，多回分枝，枝伸直，細(xì)瘦，具縱形細(xì)紋，斷面纖維性明顯，呈掃帚狀。葉呈針狀或?qū)挆l形，全緣或有疏齒，下部葉對(duì)生，上部葉互生?？偁罨ㄐ蝽斏扉L，花常3～7朵，稀疏;花梗短或無花梗，長約0.5～1mm;花萼近革質(zhì)，長約4mm，萼齒寬三角形，近相等;花冠紫色或深紫紅色，長1.5～2.5cm，花冠筒長筒狀，上唇短而伸直3裂，寬卵形，在靠近兩邊邊緣處具2淺裂，中間部位具1深裂;下唇展開呈長卵形舌狀，2裂，其中兩側(cè)裂片較寬、近圓形，中間裂片長于兩側(cè)裂片，突出，橢圓形舌狀。同時(shí)，下唇距花冠筒基部2/3處褶襞展開處，密被多細(xì)胞紫色或白色腺毛;雄蕊花藥腎圓形，靠近邊緣1/2處呈紫色，中間淡黃色;子房卵圓形，長1.5mm，花柱伸直，柱頭通體紫色、不分裂、扁卵圓形、頂端無毛、聚集多數(shù)花粉粒（如圖2所示）。蒴果圓球形，直徑約5mm，褐色或暗棕褐色，具短尖頭;種子卵形，長0.5～0.7mm，黑色、多數(shù)[5]?；ü?～9月。

4.3 顯微鑒定

4.3.1 根橫切面 木栓層木栓細(xì)胞數(shù)列，皮層薄壁細(xì)胞排列較為緊密，韌皮部較寬，薄壁細(xì)胞排列松散，有較多裂隙存在，形成層明顯，髓部寬大，中空（如圖3所示）。

4.3.2 莖橫切面 表皮由數(shù)列長方形表層細(xì)胞組成，皮層薄壁細(xì)胞排列緊密，皮層處有明顯石細(xì)胞帶，皮層纖維散在;韌皮部較窄，木質(zhì)部較寬，木纖維散在;髓部薄壁細(xì)胞較大，富含髓纖維，中央多中空，此外皮層薄壁細(xì)胞中含有草酸鈣針晶（如圖4所示）。

4.3.3 葉橫切面 野胡麻葉表面具有腺毛，其橫切面表皮下方為柵欄組織，海綿組織細(xì)胞壁薄，排列疏松，在葉橫切面中占較大比例，為異面葉，葉肉組織中維管束導(dǎo)管清晰可見（如圖5所示）。

4.3.4 根粉末特征 粉末棕色，石細(xì)胞具有形狀兩種，一種呈長方形，孔腔明顯，壁厚;另一種呈扁圓形，壁厚。網(wǎng)紋導(dǎo)管多見，有少量螺紋導(dǎo)管。木栓細(xì)胞多呈長方形，另有許多含針晶的薄壁細(xì)胞，長梭形纖維多見（如圖6所示）。

4.3.5 莖粉末圖 粉末呈淺綠色，纖維呈束排列，其中含有細(xì)小柱晶，不等式氣孔多見，表皮細(xì)胞呈長方形，排列規(guī)則緊密，螺紋導(dǎo)管較多，非腺毛長而彎曲，壁光滑，較厚（如圖7所示）。

4.3.6 果實(shí)粉末特征圖 粉末呈棕褐色，果皮細(xì)胞碎片多見，其果皮細(xì)胞壁呈連珠狀增厚（如圖8所示）。

4.4 薄層檢識(shí) 由圖可知，野胡麻中含有多種化合物，且其環(huán)烯醚萜苷類成分且其含量較高，6號(hào)含量最低，其中，供試品1號(hào)，2號(hào)和4號(hào)含量較高，此外，還含有其余三種含量較高的化學(xué)成分，且2號(hào)和4號(hào)供試品最上方化學(xué)成分的熒光顏色為紅色，可能為同一種化學(xué)成分（如圖9所示）。

5 討論

經(jīng)課題組研究發(fā)現(xiàn)，野胡麻在不同生長環(huán)境中植株生長情況不同，在風(fēng)沙天氣較多的南疆植株高度較低，更貼近于地面，莖基部更為粗壯堅(jiān)韌，而在北疆的植株高度較高，莖纖細(xì)，易折斷。從根顯微特征來看：野胡麻根橫切面木栓層木栓細(xì)胞數(shù)列，皮層薄壁細(xì)胞排列較為緊密，韌皮部較寬，薄壁細(xì)胞排列松散，有較多裂隙存在，形成層明顯，髓部寬大，中空，可能是由于植株常年處于較為干旱的環(huán)境中，其粉末中富含纖維和石細(xì)胞，且具有兩種不同形態(tài)。石細(xì)胞作為植物機(jī)械組織中特征性細(xì)胞之一，對(duì)植物具有鞏固和支持作用。筆者在采挖野胡麻藥材過程中發(fā)現(xiàn)，該植物根系發(fā)達(dá)，長度遠(yuǎn)超地上部分植株高度，約5m左右，大部分扎根于干旱缺水的土壤環(huán)境中，根的柔韌性較強(qiáng)不易折斷，上述野胡麻根特征的與其組織中富含不同形態(tài)石細(xì)胞以及纖維有密切關(guān)系;木質(zhì)部，網(wǎng)紋導(dǎo)管多見，部分薄壁細(xì)含針晶。從莖顯微特征來看：莖的皮層中也出現(xiàn)了石細(xì)胞環(huán)帶，這一現(xiàn)象與根部相似，但石細(xì)胞分布區(qū)域的廣泛性與數(shù)量不及根部;然而，從組織不同部位的觀察中發(fā)現(xiàn)，莖中皮層、木質(zhì)部、髓部均分布有纖維，部分呈纖維中含有細(xì)小株晶，這一現(xiàn)象體現(xiàn)反應(yīng)了野胡麻地上部分莖斷面呈現(xiàn)明顯纖維性、柔韌性較強(qiáng)，與之對(duì)應(yīng)的根部牢固性較強(qiáng)的特征項(xiàng)對(duì)應(yīng)。從葉顯微特征來看：葉為異面葉，具雙子葉植物特征。從果實(shí)粉末特征來看：果實(shí)的粉末中可見果皮細(xì)胞壁連珠狀增厚，均可作為鑒別野胡麻的依據(jù)。野胡麻的薄層色譜之前并無文獻(xiàn)記錄，本實(shí)驗(yàn)通過多次實(shí)驗(yàn)尋找到了一個(gè)分離較為理想的展開劑條件，以乙酸乙酯—無水乙醇—水=3—4—0.5為展開劑，可使其化學(xué)成分得到較好的分離，通過多次實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地野胡麻的化學(xué)成分基本類似，但仍有部分差距，例如第2批次與第4批次的化學(xué)成分與其它批次相比較有較大差距，從其熒光顏色可推斷第2、4批次的化學(xué)成分雖在極性上與其它批次相似，但其成分明顯不同，其它批次化學(xué)成分雖類似，但其含量上仍存在較大差異，第6批次其含量最低。

相較于已發(fā)表的文獻(xiàn)，本研究對(duì)于野胡麻的花做了縱剖，其花的特征可作為鑒別野胡麻的重要依據(jù)，其次，本研究也對(duì)野胡麻的根、莖、果實(shí)、葉的特征做了較為詳盡的補(bǔ)充，對(duì)未有記錄的薄層色譜做了初步的探索。本實(shí)驗(yàn)仍有不足之處，對(duì)于粉末中所觀察到的細(xì)胞或組織大小，應(yīng)測(cè)其大小，薄層色譜分離還可以更加清晰，可以嘗試分離出更多的成分的條件，對(duì)于分離出的未知化合物可以做質(zhì)譜確定其結(jié)構(gòu)。

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（收稿日期：2020-08-22 編輯：程鵬飛）