老年乳腺癌患者80 例彩超血流分布特點及其與分子生物學 指標的相關(guān)性

張 燕，李三榮，童樹紅

（武漢市紅十字會醫(yī)院甲乳外科，武漢 430000）

根據(jù)有關(guān)文獻報道，乳腺癌具有極高的發(fā)病率，約占惡性腫瘤的10%左右，在老年女性中尤為突出，成為女性中最常見的惡性腫瘤之一，每年全球患病達130萬人，約50 萬人因乳腺癌而死亡。因此對乳腺癌進行早期診斷及防治十分關(guān)鍵［1］。隨著超聲檢查檢查技術(shù)的發(fā)展與成熟，尤其是高頻彩色多普勒超聲逐漸應(yīng)用于乳腺的影像學檢查中，具有安全、快捷、準確率高等優(yōu)點［2］。乳腺彩超可以一定程度上表現(xiàn)出其分析血流分布和分子生物學等指標特點，尤其是ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 等五項免疫化指標的表達與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等過程密切相關(guān)，ER、PR 作為特定功能的蛋白，其中ER 作為由激素結(jié)合蛋白分子所構(gòu)成的二聚體，PR 是雌激素作用最終產(chǎn)物，能夠反映出腫瘤細胞的增殖、分化以及惡性程度［3-4］。突變型P53 作為顯性癌基因，可引起細胞的轉(zhuǎn)化和癌變，CerbB-2 作為人表皮生長因子受體-2，包括Ki67 可以反應(yīng)出癌細胞的增殖程度，各指標臨床中常用于評估和指導乳腺癌患者的病情發(fā)展［5］。本研究通過對老年乳腺癌患者行彩超分析其血流分布特單，并將其與表現(xiàn)出的分子生物學各指標進行對比分析出其相關(guān)性，從而為老年乳腺癌的臨床診療提供更多的理論參考?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選定我院在2014 年7 月～2019 年7月收治的80 例確診為乳腺癌的老年女性患者作為研究對象，年齡54～95 歲，平均年齡為（72.88±3.76）歲。納入標準：患者術(shù)前均經(jīng)彩超檢查診斷并經(jīng)術(shù)后病理確診為乳腺癌患者；均屬于原發(fā)性乳腺癌患者，未經(jīng)過放療、化療等抗腫瘤治療；研究經(jīng)本院倫理委員會同意，患者及其家屬對本研究知情同意，且簽署相關(guān)文書。排除標準：①無法遵循醫(yī)囑完成相關(guān)檢查及治療的患者；②具有心肝腎功能嚴重不全及心腦血管疾??；③患者存在嚴重精神病史，對治療依從性低。

1.2 方法 所有患者均于術(shù)前行彩超檢查，儀器采用飛利浦IU22 彩超儀。檢查時所有華智能和取平臥位，雙臂上舉，暴露乳房及雙側(cè)腋窩，設(shè)置探頭頻率8～12MHz，首先采用探頭掃描從乳腺邊緣至乳頭，檢查各個切面，而后檢查乳房中心區(qū)，直至檢查出乳腺腫塊現(xiàn)象，觀察并記錄腫塊的大小、形態(tài)、邊緣、內(nèi)部回聲、淋巴結(jié)腫脹情況以及微鈣化、腫塊周邊血流情況等特征。同時觀察患者血管內(nèi)血流分布特點包括腫瘤血流分布類型、峰值流速、阻力指數(shù)及搏動指數(shù)等情況。

根據(jù)乳腺腫塊血流分布特點與腫塊之間的相互關(guān)系，血流分布類型包括三種，一是周邊型，是指血流位于腫塊的邊緣約0.5cm 處；二是穿入型，是指血流呈現(xiàn)自腫塊的外部向中心放射性；三是內(nèi)部型，是指血流位于腫塊中心，且腫塊邊緣無血流想象（邊緣出現(xiàn)血流時也仍歸于內(nèi)部型）。

根據(jù)乳腺癌腫瘤的血流豐富程度按 Adler［6］分級可分為四級，其中0～Ⅰ級為缺乏血供，Ⅱ～Ⅲ級定義為富血供。

術(shù)后采用免疫組化SP 法檢測ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 的表達情況，取患者病理組織切片，厚度約4um，經(jīng)標本固定、石蠟包埋、二氨基聯(lián)苯胺（DAB）染色、加入相應(yīng)抗劑，觀察并診斷ER、PR、CerbB-2 的陽性率及陰性率。ER、PR、CerbB-2 陽性判斷標準依照張保寧《惡性腫瘤標準化、規(guī)范化診治叢書-乳腺癌分冊》［7］為指導，染色出現(xiàn)細胞核內(nèi)是黃色顆粒的為陽性細胞，陽性細胞數(shù)≤10%為-，10%＜陽性細胞數(shù)≤25%為+，25%＜陽性細胞數(shù)≤75%為++，陽性細胞數(shù)＞75%為+++。

1.3 評價指標 （1）病理檢查結(jié)果分型按照WHO 分型，分為浸潤性癌和原位癌。

（2）觀察所有患者的彩超圖像血流分布的特點，包括血流分布類型，血流豐富分級以及其他超聲檢查結(jié)果。

（3）觀察并記錄ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 陽性及陰性表達情況，并分析超聲檢查特征與之相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學處理 選擇SPSS 24.0 進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，計量資料采用均數(shù)±標準差來表示，比較采用t 檢驗；計數(shù)資料采用［n（%）］進行表示，比較采用χ2檢驗，比較相關(guān)性分析采用Spearman 相關(guān)法，檢驗水準a=0.0500，當P＜0.05 時，差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 病理結(jié)果分析 80 患者經(jīng)術(shù)后病理檢查確診具有103 個乳腺腫塊，腫塊直徑0.5cm～6.5cm，其中浸潤性癌73 例（91.25%），包括浸潤型導管癌58 例，小葉癌8例，其他癌7 例；原位型癌7 例（8.75%），包括導管原位癌5 例和小葉原位癌2 例。

2.2 超聲檢查結(jié)果分析 80 例老年乳腺癌患者其中腫塊大小、腫瘤形態(tài)及邊界、有無毛刺特征、后方衰退、微小鈣化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及血供情況等具體表達情況見表1。

表1 乳腺癌患者超聲檢查結(jié)果分析

2.3 血流分布特點分析 經(jīng)超聲檢查其中100 例乳腺癌患者血流分布類型包括周邊型血流18 例（22.50%），穿入型血流35 例（43.75%），內(nèi)部型血流25 例（31.25%），無血流2 例（2.50%）。根據(jù)血流豐富程度其中0 級2 例（2.50%），Ⅰ級19 例（23.75%），Ⅱ級26 例（32.50%），Ⅲ級33 例（41.25%），根據(jù)具有血流信號的患者檢測動脈頻譜，收縮期峰值流速（PSV）：17.12±2.78cm/s，舒張末期流速（EDV）：5.76±1.67crn/s，阻力指數(shù)（RI）：0.81±0.07。

2.4 分子生物學分析 80 例患者中 ER 陽性42 例（52.50%），陰性38 例（47.50%）；PR 陽性43 例（53.75%），陰性37 例（46.25%）；P53 陽性45 例（56.25%），陰性35例（43.75%）；CerbB-2 陽性37 例（46.25%），陰性43 例（53.75%）；Ki67 陽性66 例（82.50%），陰性14 例（17.50%）。

2.5 超聲表現(xiàn)與分子生物學相關(guān)性分析 不同腫塊大小（患者腫塊＜2cm 組與腫塊≥2cm 組）之間ER、PR、P53、CerbB-2 陽性率比較差異均無顯著性差異（P＞0.05），但患者腫塊＜2cm 組與腫塊≥2cm 組Ki67陽性率（34.85% vs 65.15%）相比，差異具有統(tǒng)計學意義（χ2=12.1212，P=0.0005）；腫瘤形態(tài)規(guī)則組與不規(guī)則組之間ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 陽性率相比，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；有毛刺征組與無毛刺征組之間就PR、P53、CerbB-2 陽性率比較差異均無顯著性差異（P＞0.05），ER 陽性率相比差異具有統(tǒng)計學意義（χ2=4.7619，P=0.0291）；出現(xiàn)微小鈣化組與無微小鈣化組、腫瘤邊界高回音暈組與清晰組之間就ER、PR 陽性率相比具有明顯差異（P＜0.05），P53、CerbB-2、Ki67 陽性率相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；出現(xiàn)后方衰退組與無后方衰退組ER、Ki67 陽性率相比具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），PR、P53、CerbB-2 陽性率相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移組與無淋巴轉(zhuǎn)移組P53、CerbB-2、Ki67 陽性率相比具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），ER、PR 陽性率相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

血流情況0～Ⅰ級缺乏血流組與Ⅱ～Ⅲ級血流豐富組ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 陽性率相比具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。經(jīng)Spearman 相關(guān)性分析可知，腫塊血流分級與P53、Ki67 陽性呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.264、r=0.198，P＜0.05），具體見表2。

3 討論

臨床中采用彩色多普勒超聲檢查能夠通過彈性影像檢查乳腺癌患者，準確的觀察了解病灶的惡性程度，影像顯示乳腺腫瘤附近血管的異常。根據(jù)黃?。?］等人研究結(jié)果顯示乳腺癌腫塊附近血流分型主要表現(xiàn)為典型的血流穿入型，占比43.75%，本研究結(jié)果與之相一致，采取超聲檢查結(jié)果患者乳腺血流分型中穿入型血流35 例（43.75%），Ⅱ～Ⅲ級血流豐富占比73.75%，且浸潤性癌約占91.25%，這提示乳腺癌變導致血管出現(xiàn)異常，作用機制在于惡性腫瘤能夠促進各種輔助腫瘤成長的血管因子成長，從而使得腫瘤周邊血管數(shù)量驟增，改變各毛細血管分布走向，使血供相對豐富，血管粗細不一，走形迂曲，紊亂復(fù)雜。

表2 超聲表現(xiàn)與分子生物學相關(guān)性分析

根據(jù)田麗元［9］等有關(guān)研究顯示，超聲檢查乳腺癌的血流分布特點與分子生物學各指標包括ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 之間具有一定的聯(lián)系。乳腺是ER、PR 的靶器官，當乳腺組織出現(xiàn)癌變上皮細胞增生時，ER、PR能夠用于提示和反應(yīng)出腫瘤細胞的惡性程度，根據(jù)有關(guān)研究提示ER、PR 的陽性表達能夠反映出內(nèi)分泌治療及預(yù)后狀況。CerbB-2 作為一種原癌基因，能夠在細胞的生長、增殖及分化中發(fā)揮作用，能夠反映出乳腺細胞的惡性程度。Ki67 作為一種核抗原，也標志著細胞增殖變化狀況，進而反映出乳腺血流豐富程度［10-11］。

本研究結(jié)果顯示不同腫塊大小（患者腫塊≥2cm 組與腫塊＜2cm 組）之間與Ki67 陽性率（65.15%vs 34.85%）具有明顯相關(guān)性，這一結(jié)果與姚廷敬［12］等研究結(jié)果相一致。這提示肯定了Ki67 是反映細胞增殖標志基因之一，乳腺腫塊越大，Ki67 陽性表達率越高。腫瘤形態(tài)、毛刺征、邊界及后方衰退狀況可以用以反應(yīng)出腫瘤的壞死狀況［13-14］。本研究結(jié)果顯示不規(guī)則組ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 陽性率高于規(guī)則組，有毛刺征ER 陽性率高于無毛刺征組，出現(xiàn)后方衰退組高于ER、Ki67 陽性率無后方衰退組，腫瘤形態(tài)、毛刺征、邊界及后方衰退狀況表達不同的各組均在ER 陽性表達上具有顯著性差異。微小鈣化多認為是癌組織發(fā)生壞死后鈣鹽沉積形成，微鈣化的出現(xiàn)與腫瘤邊界高回音暈組ER、PR 陽性表達具有相關(guān)性。超聲顯像淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者P53、CerbB-2、Ki67 陽性率明顯較高，顯示其分泌治療反應(yīng)差，腫瘤惡性程度相對較高。

由于腫瘤血管的生成促進腫瘤出現(xiàn)生長、浸潤以及轉(zhuǎn)移，因此在乳腺癌腫瘤激發(fā)的新生血管生成中，會導致其腫瘤形態(tài)及血流分布發(fā)生改變［15-16］。本研究結(jié)果表示血流情況0～Ⅰ級缺乏血流組與Ⅱ～Ⅲ級血流豐富組ER、PR、P53、CerbB-2、Ki67 陽性率相比具有統(tǒng)計學意義。且經(jīng)Spearman 相關(guān)性分析可知，腫塊血流分級與P53、Ki67 陽性呈正相關(guān)關(guān)系。這提示乳腺癌血流信號豐富表示腫瘤惡性程度高，從而具有較快的生長速度快，極易容易轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)［17］。

采用超聲檢測可以可反映腫瘤的生物學行為，結(jié)合血流分布特點，分析與其分子生物學指標相關(guān)性，有助于對乳腺癌的個體化治療和預(yù)后評估。