原花青素口腔崩解片的研制

陳艷艷，于馥銘，于鳳波，曹 宇

(牡丹江醫(yī)學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157011)

原花青素是目前應(yīng)用最為廣泛的天然抗氧化成份之一，其具備多方面的藥理活性，包括抗腫瘤活性[1-2]、抗氧化、降脂作用、防治心血管疾病、抗炎等，是功能性食品與化妝品的常用添加成份。近年來，作為活性成分，在國內(nèi)外被廣泛應(yīng)用于食品、藥品和化妝品等領(lǐng)域。目前市售原花青素口服制劑主要為膠囊制劑，為提高消費者服用順應(yīng)性，增強(qiáng)商品的市場競爭力，本課題擬開發(fā)新型、服用更為便捷的，消費者易于接受的原花青素口腔崩解制劑。

1 實驗方法

1.1 實驗試劑與儀器直壓乳糖(L1517，上海品成醫(yī)藥科技有限公司)；葡萄籽原花青素(YS170515，西安普萊特生物工程有限公司)；低取代羥丙基纖維素(L-HPC，泰安瑞泰纖維素有限公司)；交聯(lián)聚乙烯比咯烷酮(PVPP，美國ISP公司)；芒果香精(QS3416 0601 0989，毫州市保華藥業(yè)有限公司)；草莓香精(QS3416 0601 0989，毫州市保華藥業(yè)有限公司)；甜菊粉(2I43L-CP，東京化成工業(yè)株式會社)；硬脂酸鎂(HG 3439-99，天津博迪化工股份有限公司)。CARY-100型紫外分光光度計(美國瓦里安中國有限公司)；硬度儀(YD-20KZ，天大天發(fā)科技有限公司)；脆碎度儀(CS-2，天津市國銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司)；壓片機(jī)(GZPL-620，北京國藥龍立有限公司)。

1.2 原花青素分析方法的建立

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱取葡萄籽原花青素標(biāo)準(zhǔn)品，用95%乙醇配成5 mg/mL的儲備液，分別精密吸取4.0 mL、5.0 mL、7.0 mL、8.0 mL、9.0 mL、11.0 mL，置于25 mL容量瓶中，加95%乙醇準(zhǔn)確稀釋定容。以95%乙醇為空白，在287 nm處測吸光度，測定吸光值A(chǔ)，并與相應(yīng)濃度C進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

1.2.2 回收率實驗 分別精密稱取原花青素原料藥24 mg、30 mg、36 mg及相應(yīng)處方量的輔料，于100 mL容量瓶中用95%溶解稀釋定容，搖勻過濾，取5.0 mL續(xù)濾液至10.0 mL容量瓶中，用95%乙醇溶解稀釋定容，各測定3次，報告已知加入量的回收率(%)。

1.2.3 精密度實驗 將上述測定回收率的溶液在一天內(nèi)和一周內(nèi)分別測定5次，獲得日內(nèi)精密度和日間精密度。

1.2.4 穩(wěn)定性試驗 將原花青素溶液裝于密封的容量瓶中密封保存，4 ℃放置，分別于0 h、24 h、36 h用CARY-100型紫外分光光度計測定其溶液吸光度的值，用以檢測其溶液穩(wěn)定性。

1.3 原花青素口腔崩解片的處方和工藝確定采用單因素考察結(jié)合正交實驗方法，以粉末直接壓片作為制備工藝，以口感和崩解時間為考察指標(biāo)，對原花青素口腔崩解片的處方及制備工藝進(jìn)行考察。

1.3.1 單因素考察 以流動性、壓縮度、口感等作為考察指標(biāo)，對填充劑、崩解劑、矯味劑(甜菊粉與香精)用量進(jìn)行初步考察與確定。

1.3.2 正交實驗確定處方 根據(jù)以上單因素考察結(jié)果，選擇直壓乳糖和L-HPC的比例、PVPP的用量、壓片硬度、甜菊粉的用量4個參數(shù)為因素，以體外方法測得的崩解時間(t)與口感為評價指標(biāo)，設(shè)計3水平4因素L9(34)正交實驗(表1)。

表1 3水平4因素L9(34)正交實驗表

1.4 質(zhì)量檢查根據(jù)《中國藥典2015版》附錄相關(guān)檢測要求與標(biāo)準(zhǔn)，對所制備的原花青素口腔崩解片制劑外觀、崩解時限[8](體外測定法，口腔內(nèi)測定法)、片重差異、硬度和脆碎度以及含量進(jìn)行測定。

2 結(jié)果

2.1 質(zhì)量檢測結(jié)果

2.1.1 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 結(jié)果顯示，原花青素濃度在80～220 μg/mL之間具有良好的線性關(guān)系，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)曲線為A=0.004C-0.112，r2=0.998[(A：吸光度值；C：濃度(μg/mL)]，見圖1。

圖1 原花青素標(biāo)準(zhǔn)曲線表

2.1.2 回收率結(jié)果 回收率測定實驗結(jié)果如表2所示，RSD值均小于2%，說明方法回收率符合標(biāo)準(zhǔn)。

表2 原花青素紫外分光光度儀回收率測定結(jié)果

2.1.3 精密度實驗結(jié)果 精密度測定結(jié)果如表3所示，日內(nèi)和日間精密度的RSD值均小于2%，該方法精密度符合標(biāo)準(zhǔn)。

表3 原花青素日內(nèi)和日間精密度測定結(jié)果

2.1.4 穩(wěn)定性實驗結(jié)果 穩(wěn)定性實驗結(jié)果如表4所示，原花青素溶液于4 ℃條件下放置36 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

表4 原花青素穩(wěn)定性實驗結(jié)果

2.2 口腔崩解片的處方和工藝確定結(jié)果

2.2.1 單因素考察結(jié)果 填充劑考察結(jié)果顯示，直壓乳糖的休止角小，流動性好。淀粉處方壓力大，粘合性差，易裂片，不容易成型。淀粉的沙礫感強(qiáng)，口感欠佳，故選用填充劑為直壓乳糖。對三種崩解劑PVPP+L-HPC(2:1)、L-HPC、PVPP考察結(jié)果顯示，崩解劑選用PVPP/L-HPC(2:1)，崩解時間最短，且對口感無影響。香精考察結(jié)果顯示，草莓香精的香味可以掩蓋原花青素的澀味。芒果香精香味比較輕，不能掩蓋原花青素的苦澀口感，故選用草莓香精。

2.2.2 正交實驗確定處方結(jié)果 根據(jù)正交實驗結(jié)果(表5)，最終確定原花青素口腔崩解片的處方為：原花青素口腔崩解制劑片重500 mg，含藥32 mg；填充劑：直壓乳糖，占片劑總重60%。崩解劑組合為：PVPP/L-HPC(2:1)，占片劑總重20%，甜菊粉占3%，香精5%，硬脂酸鎂5%，采用粉末直接壓片，控制片劑硬度在30 N左右。

表5 基本處方篩選的正交實驗設(shè)計及結(jié)果

2.3 質(zhì)量檢查結(jié)果

2.3.1 外觀 對原花青素口腔崩解片外觀進(jìn)行檢測，片劑外觀光滑，色澤均勻，有適宜的硬度和耐磨性，符合藥典規(guī)定的要求。

2.3.2 崩解實驗 檢測結(jié)果如表6所示，所制的原花青素口崩片口感優(yōu)良，并在口中能迅速崩解。

表6 原花青素口崩片口感及崩解時限評價

2.3.3 片重差異 按照藥典要求，對原花青素口腔崩解片的片重差異進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示，取20片原花青素口崩片測得，片重為(500.07±0.12)mg，片重差異均小于5.0%，符合藥典規(guī)定[3]。

2.3.4 硬度和脆碎度 結(jié)果如表7所示，片劑硬度RSD小于2%，原花青素口腔崩解片的硬度符合檢測標(biāo)準(zhǔn)。脆碎度<1%，脆碎度復(fù)合要求。

表7 原花青素口崩片片重差異檢查

2.3.5 含量測定 結(jié)果如表8所示，三批原花青素口崩片的平均標(biāo)示量百分含量在101.76%～102.42%之間，符合規(guī)定80%～120%的標(biāo)準(zhǔn)。

表8 原花青素口腔崩解片含量測定

3 討論

原花青素是純天然的抗氧化劑，低聚原花青素的抗氧化性能是維生素E的50倍、維生素C的200倍，且吸收迅速，口服20 min即可達(dá)到最高血液濃度，代謝半衰期有7 h之久。在人體內(nèi)，原花青素通過參與磷酸、花生四烯酸的代謝和蛋白質(zhì)磷酸化來達(dá)到保護(hù)脂質(zhì)不被過氧化損傷的作用[4]。近幾年，國內(nèi)外已開發(fā)出多種原花青素產(chǎn)品，如劍南春生物制品的應(yīng)用原花青素制成可預(yù)防近視，抗疲勞的軟膠囊制劑；美國開發(fā)的含有低聚原花青素的化妝品，利用原花青素中的多羥基結(jié)構(gòu)清除自由基，抑制皮膚氧化損傷[5]；法國Bonnaure公司開發(fā)的以原花青素低聚體或單體為活性成分(≥1%)的治療牙周疾病的制劑[6]；法國Sanofi公司研制的用于血管保護(hù)和抗炎[7]的原花青素-大豆卵磷脂復(fù)合物等。

目前，國內(nèi)原花青素類保健品主要以膠囊劑為主，雖然可以掩蓋原花青素苦澀味道，但劑型比較單一?？谇槐澜馄且环N在無水或少量水的情況下，放置在口腔中，遇唾液迅速崩解，溶于唾液，借助自身吞咽能力，進(jìn)入胃腸而發(fā)揮功能的一種劑型?？梢欢ǔ潭壬蠝p少藥物的首過效應(yīng)，服用方便，且適用于吞咽有困難的患者(嬰幼兒、老人)，提高患者的順應(yīng)性，從而有利于疾病的治療。本文采用粉末直接壓片法制備的原花青素口腔崩解片，制備過程簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)，所制備的產(chǎn)品口感適宜，服用方便，既提高了消費者的接受程度，又為原花青素市場產(chǎn)品的開發(fā)提供了新的劑型選擇。