探討4種檢驗(yàn)方法在丙肝診斷中的應(yīng)用效果[包括丙肝抗體、丙肝病毒(HCV)RNA、白蛋白(ALB)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)]

王曉川 馬 麗 王秀麗 羅 灝 王曉靜

(中國(guó)人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第九八九醫(yī)院檢驗(yàn)科 洛陽(yáng) 471031)

丙肝是由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎，可通過(guò)血液、母嬰、性傳播，世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，全球約1.8億人感染了HCV，并以每年3.5萬(wàn)例的速度增長(zhǎng)，現(xiàn)已是全球流行性疾病[1]。但丙肝發(fā)病較為隱蔽，感染后無(wú)明顯癥狀，發(fā)現(xiàn)診斷較為困難，若不能及時(shí)治療導(dǎo)致病情的發(fā)展轉(zhuǎn)為慢性丙肝，并且有部分患者還會(huì)發(fā)展為肝癌、肝硬化，肝硬化一旦出現(xiàn)失代償情況，其死亡率將急劇上升，嚴(yán)重危害患者的健康與生命，因此早發(fā)現(xiàn)早診斷早治療對(duì)丙肝患者意義重大。目前臨床主要通過(guò)丙肝抗體、丙肝病毒(HCV)RNA、白蛋白(ALB)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)4種檢驗(yàn)方法進(jìn)行丙肝診斷，HCV-RNA是診斷丙肝較為的理想方法，其他方法也各有優(yōu)勢(shì)，均在臨床上取得了較好的效果，但現(xiàn)對(duì)4種診斷方式的對(duì)比研究報(bào)道較少。基于此，本研究對(duì)4種檢驗(yàn)方法在丙肝診斷中的應(yīng)用效果進(jìn)行探討，旨在根據(jù)患者情況選擇診斷方式提供科學(xué)依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月～2019年12月我院收治的丙肝患者2260例對(duì)照實(shí)驗(yàn)，診斷標(biāo)準(zhǔn)采用中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)的《丙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》(2014) 中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，大部分無(wú)明顯癥狀，部分表現(xiàn)有乏力、惡心、食欲不振等，同時(shí)經(jīng)生化學(xué)檢查有異常，診斷為丙肝[2]。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合診斷標(biāo)準(zhǔn)患者丙肝患者；(2)臨床資料完整；(3)患者與家屬簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)伴隨其他肝功能異常病史的患者；(2)在檢測(cè)前服用過(guò)肝代謝藥物的患者；(3)伴隨精神類疾病，依從性較差的患者。本次研究所納入病例經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)?；颊吣挲g12～85歲，平均年齡(51.12±8.67)歲；男1 200例，女1 060例。

1.2 儀器與試劑

儀器：美國(guó)ABI StepOnePlus實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀；美國(guó)Beckman Coulter AU5400全自動(dòng)生化分析儀；ADDCARE ELISA400安圖生化酶免分析儀。檢測(cè)試劑由湖南圣湘生物科技股份有限公司、廈門英科新創(chuàng)科技有限公司、北京豪邁生物工程股份有限公司提供。

1.2 方法

抽取所有患者外周空腹靜脈血5ml用于檢測(cè)，丙肝抗體采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)、丙肝病毒(HCV)RNA采用熒光定量PCR法檢測(cè)、白蛋白(ALB)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)均采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，所有操作按試劑說(shuō)明書嚴(yán)格進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

記錄檢測(cè)患者丙肝抗體與丙肝病毒(HCV)RNA檢測(cè)中陰性與陽(yáng)性例數(shù)，HCV-RNA含量<500 IU/mL時(shí)判斷為陰性；記錄不同HCV-RNA檢測(cè)組別ALB水平與ALT的異常率和水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 丙肝抗體與丙肝病毒(HCV)RNA檢測(cè)陰陽(yáng)性率比較

HCV-RNA檢測(cè)陽(yáng)性率顯著高于丙肝抗體檢測(cè)陽(yáng)性率(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 丙肝抗體與丙肝病毒(HCV)RNA檢測(cè)陰陽(yáng)性率比較[n(%)]

2.2 不同HCV-RNA檢測(cè)水平的ALB水平

隨著HCV-RNA檢測(cè)水平升高，ALB水平有不顯著的降低,見(jiàn)表2。

表2 不同HCV-RNA檢測(cè)水平的ALB水平

2.3 不同HCV-RNA檢測(cè)水平的ALT水平

HCV-RNA陽(yáng)性中有504例ALT異常，隨著HCV-RNA檢測(cè)水平上升ALT值也有明顯上升(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同HCV-RNA檢測(cè)水平的ALT水平

3 討論

丙肝是常見(jiàn)的感染科疾病，其致病根本原因是HCV感染，而長(zhǎng)期服用有肝毒性藥物、勞累或抽煙等會(huì)直接促進(jìn)病情發(fā)展，大部分患者發(fā)病后并無(wú)明顯癥狀，部分患者會(huì)伴隨著惡心，食欲下降、疲勞、腹脹，但也無(wú)特征性，易被忽視，導(dǎo)致診斷困難，治療不及時(shí)[3]，HCV病毒無(wú)法控制。HCV病毒在患者體內(nèi)會(huì)不斷侵害肝臟，在外界因素的刺激下病情不斷發(fā)展會(huì)導(dǎo)致患者淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、肝細(xì)胞壞死，嚴(yán)重者甚至成為肝硬化，直接威脅患者的生命安全，因此及早診斷丙肝意義重大?，F(xiàn)臨床丙肝診斷仍然主要依賴實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)，但不同的實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方式各有優(yōu)缺點(diǎn)，需要對(duì)不同檢驗(yàn)方式的研究，根據(jù)檢驗(yàn)方式的優(yōu)勢(shì)與患者情況，選擇最佳檢測(cè)方式，保證診斷的高效性、準(zhǔn)確性與及時(shí)性。

目前通過(guò)熒光定量PCR法進(jìn)行HCV-RNA檢測(cè)是檢測(cè)準(zhǔn)確率較高的實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方式，在感染HCV后的2周內(nèi)就能檢測(cè)到HCV-RNA，可直接可靠的反映HCV復(fù)制的活躍程度，但其影響因素較多，對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件和設(shè)備要求較高，普及性不高；丙肝抗體檢測(cè)通過(guò)檢測(cè)HCV抗體也反映HCV的情況，只需要進(jìn)行ELISA 法檢測(cè)，無(wú)需特殊設(shè)備，簡(jiǎn)單，快速，可以保證診斷的及時(shí)性，但抗體的血清學(xué)轉(zhuǎn)換可能延遲到暴露后3～6個(gè)月發(fā)生，所以丙肝抗體檢測(cè)難于診斷出早期丙肝。本次研究顯示HCV-RNA檢測(cè)陽(yáng)性率顯著高于丙肝抗體檢測(cè)陽(yáng)性率(P<0.05)，與Dixit Updesh[4]等研究結(jié)果一致，丙肝抗體檢查診斷丙肝的敏感性相對(duì)較低，對(duì)其進(jìn)行原因分析可能是抗體的形成與病程有關(guān)，易出現(xiàn)假陰性，一般抗體在感染HCV后的2～6月內(nèi)才能檢出抗體，而HCV-RNA在感染后1周后即可檢測(cè)到，因此丙肝抗體檢測(cè)陽(yáng)性率偏低。丙肝患者一般都伴隨著不同程度的肝細(xì)胞損傷，損傷后肝細(xì)胞中的物質(zhì)極易滲入到血清，使血清中的ALT濃度增高，尤其在病情發(fā)展為肝硬化與肝癌并處于活動(dòng)期時(shí)增高最為明顯。ALB屬于球蛋白，由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成，肝細(xì)胞損傷會(huì)使肝臟的合成功能與代謝功能降低，進(jìn)而導(dǎo)致肝臟合成物中的ALB降低[5]。因此ALB檢測(cè)與ALT檢測(cè)可直接反應(yīng)肝臟功能損傷情況，而病毒活躍程度與肝功能損傷關(guān)系密切，進(jìn)而通過(guò)ALB檢測(cè)與ALT檢測(cè)可有效輔助丙肝診斷。本次研究顯示HCV-RNA陽(yáng)性中有504例ALT異常，隨著HCV-RNA檢測(cè)水平上升ALT值也有明顯上升，這也與近年來(lái)一些研究相符合[6]。同時(shí)顯示隨著HCV-RNA檢測(cè)水平升高，ALB水平有不顯著的降低，對(duì)其進(jìn)行可能是血清HCV-RNA含量高，但肝臟組織損傷程度不大，所以當(dāng)HCV-RNA陽(yáng)性時(shí)ALB水平也較為正常無(wú)明顯變動(dòng)。

綜上所述，丙肝抗體、HCV-RNA、白蛋白(ALB)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)4種檢驗(yàn)方法均可用于丙肝診斷，HCV-RNA是診斷中最重要的數(shù)據(jù)，聯(lián)合丙肝抗體、HCV-RNA、白蛋白(ALB)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的檢驗(yàn)效果更佳，具有較高的臨床價(jià)值。