血清GP-2、hs-CRP、HMGB1聯(lián)合檢測(cè)在重癥胰腺炎早期診斷中的價(jià)值

周瑩 朱傳衛(wèi) 張良 孫小虎

急性胰腺炎是臨床上常見(jiàn)的一種高發(fā)急腹癥，約80%患者病情較輕，主要表現(xiàn)為胰腺水腫，預(yù)后良好，另10%～20%病情嚴(yán)重患者，常繼發(fā)腹膜炎、休克、感染等，病死率較高屬于重癥急性胰腺炎[1]。近年來(lái)，隨著醫(yī)療技術(shù)進(jìn)步，重癥急性胰腺炎的病死率有所降低，但由于其早期診斷缺乏靈敏、準(zhǔn)確方法，預(yù)后仍較差[2]。因此，提高重癥急性胰腺炎早期診斷效率具有非常重要的臨床意義。已證實(shí)急性胰腺炎患者血清糖蛋白2(glycoprotein，GP-2)、超敏C-反應(yīng)蛋白(hypersensitive c-reactive protein，hs-CRP)和高遷移率族蛋白B1(high mobility family protein B1，HMGB1)水平異常，與病情嚴(yán)重程度有關(guān)，在重癥急性胰腺炎診斷中具有一定的價(jià)值[3,4]。但三者聯(lián)合檢測(cè)是否能夠提高重癥急性胰腺炎的早期診斷效率尚不清楚，本研究分析重癥急性胰腺炎患者血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平，探討其聯(lián)合檢測(cè)在重癥急性胰腺炎早期診斷中的價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年3月至2019年6月在本院診治的99例急性胰腺炎患者作為研究對(duì)象，其中重癥胰腺炎50例(重癥組)，輕癥胰腺炎49例(輕癥組)。重癥組男31例，女19例；年齡55～76歲，平均年齡(64.53±9.86)歲；輕癥組男29例，女20例；年齡53～80歲，平均年齡(63.91±8.89)歲。另選同時(shí)期體檢各項(xiàng)生命體征均正常的45例健康者作為對(duì)照組，其中男27例，女18例；年齡50～80歲，平均年齡(65.04±10.13)歲。3組性別比、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者均符合《急性胰腺炎診治指南(2014)》中診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；(2)重癥組急性生理與慢性健康評(píng)分(APACHE-Ⅱ)≥8分；(3)受試者及其家屬對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)急性腸梗阻、急性闌尾炎、消化道潰瘍穿孔、急性膽囊炎和膽石癥等急腹癥；(2)合并有糖尿病、高血壓等；(3)合并心、肝、腎等系統(tǒng)疾病；(4)長(zhǎng)期服用糖皮質(zhì)激素、利尿劑等；(5)患有肝硬化、慢性胰腺炎和惡性腫瘤；(6)患有血液系統(tǒng)疾病或自身免疫性疾病。本研究經(jīng)宣城市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.3 方法 采集患者入院第2天空腹時(shí)肘靜脈血5 ml，健康者體檢當(dāng)日采集肘靜脈血5 ml，采集血樣均在3 h內(nèi)，離心，分離血清保存。

1.3.1 指標(biāo)檢測(cè):取上述血清，采用DNM-9602酶標(biāo)儀(北京普朗有限公司)檢測(cè)血清糖蛋白2(glycoprotein 2，GP2)水平；酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)高遷移率族蛋白B1(high mobility family protein B1，HMGB1)，人HMGB1 ELISA試劑盒來(lái)自于日本Shino Test公司；采用FS-112飛測(cè)Ⅱ(免疫熒光檢測(cè)儀，廣州萬(wàn)孚生物技術(shù)股份有限公司)檢測(cè)血清超敏C反應(yīng)蛋白(hypersensitive c-reactive protein，hs-CRP)水平。

1.3.2 疾病嚴(yán)重程度評(píng)估:①APACHE-Ⅱ評(píng)分[6]：該評(píng)分包括急性生理評(píng)分、慢性健康評(píng)分和年齡評(píng)分3部分，理論最高值71分，分值越高說(shuō)明病情越嚴(yán)重。②Balthazar CT評(píng)分(CTSI)[7]：該評(píng)分包括CT評(píng)分5級(jí)：A級(jí)胰腺正常記0分，B級(jí)胰腺實(shí)質(zhì)改變(局部或彌漫的胰腺腺體增大)記1分，C級(jí)胰腺實(shí)質(zhì)改變及周?chē)装Y、滲出記2分，D級(jí)胰腺周?chē)鷿B出明顯、胰腺內(nèi)外出現(xiàn)單個(gè)液體積聚記3分，E級(jí)胰腺內(nèi)外大量積液、出現(xiàn)胰腺膿腫、壞死記4分；③壞死評(píng)分4項(xiàng)：胰腺無(wú)壞死記0分，30%以下胰腺壞死記2分，30%～50%胰腺壞死記4分，50%以上胰腺壞死記6分。評(píng)分范圍0～10分，評(píng)分越高說(shuō)明病情越嚴(yán)重。

2 結(jié)果

2.1 3組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平 重癥組和輕癥組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，重癥組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于輕癥組(P<0.05)，3組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3組血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平比較

2.2 急性胰腺炎患者APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分 重癥組APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分均高于輕癥組，2組APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 急性胰腺炎不同分組患者APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分比較 分,

2.3 急性胰腺炎患者血清指標(biāo)與病情評(píng)分的關(guān)系 急性胰腺炎患者血清GP-2與APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分分別呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.709、0.758，P=0.001、0.000)，血清hs-CRP與APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分分別呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.654、0.692，P=0.009、0.005)，血清HMGB1與APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分分別呈顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.791、0.819，P=0.000、0.000)。見(jiàn)表3。

表3 急性胰腺炎患者血清指標(biāo)與病情評(píng)分的相關(guān)性分析

2.4 血清GP-2、hs-CRP和HMGB1單獨(dú)及聯(lián)合診斷重癥胰腺炎的效能 血清GP-2單獨(dú)診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.739，敏感性為64.81%，特異性為76.17%；血清hs-CRP單獨(dú)診斷重癥胰腺炎的ROCAUC為0.699，敏感性為56.92%，特異性為79.59%；血清HMGB1單獨(dú)診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.796，敏感性為66.67%，特異性為79.76%；血清GP-2、hs-CRP和HMGB1聯(lián)合診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.866，敏感性為76.47%，特異性為85.71%。聯(lián)合診斷的效能最高。見(jiàn)圖1，表4。

圖1 血清GP-2、hs-CRP和HMGB1單獨(dú)及聯(lián)合診斷重癥胰腺炎的ROC曲線

表4 血清GP-2、hs-CRP和HMGB1單獨(dú)及聯(lián)合診斷重癥胰腺炎的效能

3 討論

GP-2是胰腺酶原顆粒膜的主要成分之一，通過(guò)糖基-磷脂酰肌醇(GPI)在膜上固定，人類(lèi)GP-2存在兩種亞型：GP-2a和GP-2t，胰腺正常分泌時(shí)，GP-2釋放進(jìn)入胰導(dǎo)管，當(dāng)胰腺發(fā)生急性炎癥時(shí)，局部結(jié)構(gòu)被破壞，GP-2釋放進(jìn)入血液導(dǎo)致血清GP-2水平升高[8]。Roggenbuck等[9]研究表明，急性胰腺炎患者血清GP2a和GP-2t水平均顯著升高，重癥患者顯著高于輕癥患者，提示GP2a對(duì)急性胰腺炎具有較高的診斷準(zhǔn)確性。本研究結(jié)果，重癥組和輕癥組患者血清GP-2水平顯著高于對(duì)照組，重癥組血清GP-2水平顯著高于輕癥組，說(shuō)明急性胰腺炎患者血清GP-2水平明顯升高，且在重癥患者中升高更加明顯。APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分是目前常見(jiàn)的用于急性胰腺炎病情嚴(yán)重程度評(píng)估的評(píng)分系統(tǒng)，對(duì)早期評(píng)估患者病情嚴(yán)重程度具有較高的準(zhǔn)確性[10]。本研究對(duì)患者進(jìn)行APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分，結(jié)果重癥組APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分均顯著高于輕癥組，相關(guān)性分析顯示，血清GP-2與APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分分別呈顯著正相關(guān)關(guān)系，說(shuō)明血清GP-2與胰腺炎患者病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，病情越嚴(yán)重血清GP-2水平越高，與以往研究結(jié)果一致。進(jìn)一度ROC曲線分析顯示，血清GP-2a單獨(dú)診斷重癥胰腺炎的ROC AUC為0.739，敏感性為64.81%，特異性為76.17%，其診斷特異性較好但敏感性較差。

HMGB1是HMG家族中含量最多的一種核結(jié)合蛋白，遍布機(jī)體脾臟、肺、淋巴、胸腺等組織，由215個(gè)氨基酸組成，含有A-box和B-box 2個(gè)結(jié)合域，是多種疾病的生物標(biāo)志物和藥物靶點(diǎn)[11]。正常生理?xiàng)l件下，HMGB1主要存在于細(xì)胞核和細(xì)胞膜，發(fā)揮促進(jìn)核小體互動(dòng)，基因轉(zhuǎn)錄、促進(jìn)細(xì)胞遷移、軸突生長(zhǎng)等作用[12]。而病理狀態(tài)下，機(jī)體受刺激后HMGB1由免疫細(xì)胞分泌到細(xì)胞外，另外受損或壞死細(xì)胞細(xì)胞核中HMGB1也被釋放到細(xì)胞外，參與免疫、炎癥、浸潤(rùn)等病理過(guò)程[13]。研究表明，急性胰腺炎中炎性反應(yīng)是通過(guò)胰腺酶原和核因子kB的細(xì)胞內(nèi)活化引起的，其炎性反應(yīng)可擴(kuò)大至全身炎癥高反應(yīng)綜合征(SIRS)和器官功能障礙[14]。近年來(lái)越來(lái)越多的研究表明，HMGB1參與并促進(jìn)急性胰腺炎從局部炎癥到發(fā)生SIRS的過(guò)程，并對(duì)患者預(yù)后產(chǎn)生不良影響[15]。本研究結(jié)果，重癥組和輕癥組血清hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于對(duì)照組，重癥組血清hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于輕癥組，說(shuō)明重癥急性胰腺炎患者血清hs-CRP和HMGB1水平明顯升高更加明顯，相關(guān)性分析顯示，血清hs-CRP、HMGB1與APACHE-Ⅱ評(píng)分和CTSI評(píng)分分別呈顯著正相關(guān)關(guān)系，說(shuō)明血清血清hs-CRP、HMGB1與急性胰腺炎患者病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

韓曉禹等[16]研究報(bào)道，血清CRP診斷急性胰腺炎的靈敏度為64.2%，特異度為86.5%。張亭等[17]研究報(bào)道，血清hs-CRP診斷重癥急性胰腺炎后期感染性胰腺壞死的敏感度為85.2%，特異度為82.6%，提示早期檢測(cè)血清hs-CRP對(duì)重癥急性胰腺炎后期感染性胰腺壞死具有較好的診斷價(jià)值，周小娜等[18]也有類(lèi)似報(bào)道。本研究ROC曲線分析顯示，血清hs-CRP診斷重癥胰腺炎的敏感性為56.92%，特異性為79.59%，略低于前人研究，可能是因?yàn)闄z測(cè)技術(shù)水平差異及病例較少。重癥急性胰腺炎血清HMGB1水平與患者腸黏膜屏障損害、腎功能損害、內(nèi)皮細(xì)胞活化等并發(fā)癥密切相關(guān)[19]。嚴(yán)蘋(píng)等[20]研究報(bào)道，HMGB1診斷重癥急性胰腺炎的特異性達(dá)93.1%。本研究ROC曲線分析顯示，血清HMGB1診斷重癥胰腺炎的66.67%，特異性為79.76%，均高于GP-2和hs-CRP單獨(dú)檢測(cè)。本研究為進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，三者聯(lián)合診斷重癥急性胰腺炎的敏感性為76.47%，特異性為85.71%，其診斷敏感性和特異性均升高。

綜上所述，重癥急性胰腺炎患者血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平均顯著高于輕癥患者，聯(lián)合檢測(cè)血清GP-2、hs-CRP和HMGB1水平能夠彌補(bǔ)單項(xiàng)檢測(cè)敏感性低的缺陷，提高診斷準(zhǔn)確性，對(duì)病情作為準(zhǔn)確判斷，有助于早期干預(yù)治療，降低患者病死率，改善預(yù)后。本研究不足之處在于樣本量較少，結(jié)果可能存在一定偏倚和局限，下一步將繼續(xù)擴(kuò)大樣本深入探究。