燈盞細辛注射液聯(lián)合胞二磷膽堿對老年急性缺血性腦卒中患者腦血循環(huán)的影響

趙亞軍，王桂俠

(1.陜西省第二人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科；2.陜西省第二人民醫(yī)院心血管介入科，陜西 西安 710005)

缺血性腦卒中為腦局部缺血性疾病，是因各種原因導致腦部血管梗死出現(xiàn)血液供應障礙的一種疾病，表現(xiàn)為腦缺血狀態(tài)，同時腦神經(jīng)功能也因缺血而嚴重受損，因此，急性缺血性腦卒中治療應盡快調(diào)整腦血流動力學，改善缺血區(qū)域腦血循環(huán)[1]。TLR4/核因子-κB(NF-κB)信號通路在缺血性腦卒中發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，Song Y，等[2]學者指出，TLR4/核因子-κB(NF-κB)信號通路損傷血管內(nèi)皮為致使血流量下降主要原因。胞二磷膽堿在治療腦血管疾病中具有較大優(yōu)勢，可有效保護細胞膜功能，減輕血腦屏障損傷，改善微循環(huán)等[3]；燈盞細辛注射液(Erigeronbreviscapineinjection)是由一種燈盞花中提煉精制而成的中藥制劑，具有活血化瘀、通絡止痛之功效，可抑制血小板聚集，降低血黏度，促進腦血管擴張[4]。但單純胞二磷膽堿或燈盞細辛注射液治療急性缺血性腦卒中效果有限。本研究首次聯(lián)合采用燈盞細辛注射液、胞二磷膽堿治療急性缺血性腦卒中，分析其對患者腦血循環(huán)及TLR4/NF-κB信號通路的影響，旨在為臨床治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2017年8月至2019年7月陜西省第二人民醫(yī)院150例老年急性缺血性腦卒中患者作為研究對象，納入標準：①均符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》中相關診斷標準[5]，并經(jīng)顱腦CT、MRI等影像學檢查確診；②首次發(fā)病，發(fā)病時間<72 h；③患者及家屬知情并簽署知情承諾書。排除標準：①存在顱內(nèi)出血或大面積腦梗死者；②近期接受重大手術治療者；③正在接受抗凝治療者；④伴有嚴重肝腎功能障礙者；⑤合并惡性腫瘤者；⑥伴有嚴重凝血功能障礙者；⑦過敏體質或對本研究所用藥物成分具有使用禁忌證者。簡單隨機化分為三組，各50例。對比三組年齡、性別、發(fā)病時間、梗死體積、病灶單發(fā)/多發(fā)、合并癥等資料無明顯差異(P>0.05，見表1)。本研究經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 三組均根據(jù)《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》制定常規(guī)治療方案，包括穩(wěn)定生命體征、控制血壓血糖、吸氧、糾正水電解質平衡等基礎治療，同時根據(jù)患者病情程度予以抗血小板聚集、營養(yǎng)腦細胞、降低血黏度、改善腦循環(huán)等藥物治療；于此基礎上，對照A組予以胞二磷膽堿(吉林百年漢克制藥有限公司，國藥準字H22026208)治療，750 mg胞二磷膽堿注射液+100 mL生理鹽水，靜脈滴注，1次/d。對照B組予以燈盞細辛注射液(云南生物谷燈盞花藥業(yè)有限公司，國藥準字Z53021569)治療，30 mL燈盞細辛注射液+250 mL生理鹽水，靜脈滴注，1次/d，連續(xù)治療14 d；觀察組予以胞二磷膽堿聯(lián)合燈盞細辛注射液治療，方法同對照A、B組。

1.2.2 檢測方法 血清SOD、MDA水平：空腹狀態(tài)下抽取5 mL肘靜脈血，高速離心處理(3000 r/min，10 min)，分離血清、血漿，采用化學比色法測定血清超氧化物歧化酶(SOD)，硫代巴比妥酸比色法測定丙二醛(MDA)，嚴格按照試劑盒(北京百奧萊博科技有限公司)操作說明書進行；TLR4蛋白和NF-κB蛋白：抽取8 mL肘靜脈血，置于肝素抗凝管中，以Ficoll液體分層法將血液分離提純后取其單個核細胞(PBMCs)，培養(yǎng)液洗滌2次，經(jīng)重懸后收集PBMCs，加入細胞裂解液裂解，離心收集上層清液取得總蛋白，BCA法測定并配平蛋白濃度，半干法電泳轉移至PVDF膜上，以10%脫脂牛奶封閉液室溫下封閉2 h，依次加入TBS/T稀釋至適當濃度的一抗、封閉液稀釋的二抗 ，TBS/T洗膜，化學法發(fā)光顯色，定影。采用QuantityOne軟件測定蛋白條帶IOD值，β-actin作為參照組，以目的蛋白與β-actin光密度比值表示目的蛋白相對表達水平。

1.3 觀察指標

①臨床療效，參考《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》中神經(jīng)功能缺損程度(NIHSS)評分標準判斷患者療效，基本控制：NIHSS評分下降>90%；顯著進步：NIHSS評分下降46%～90%；進步：NIHSS評分下降18%～45%；無效：NIHSS評分降低≤17或增加?？傆行?(基本控制+顯著進步+進步)/50×100%。②治療前、療程結束后神經(jīng)功能及日常生活活動能力，以美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分評估神經(jīng)功能，分值越低，神經(jīng)功能恢復越良好[6]；Barthel指數(shù)評估日常生活活動能力，分值越高，日常生活活動能力越強[7]。③治療前、療程結束后血流動力學指標，以GEVolusonE8型彩色多普勒超聲診斷儀經(jīng)雙側顳窗檢測雙側大腦中動脈血流情況，記錄血流速度(Vm)、阻力指數(shù)(RI)、血管搏動指數(shù)(PI)。④治療前、療程結束后血液流變學指標，采用北京普利生IBY-B6A血液黏度儀測定血液流變學指標，包括血漿黏度、全血黏度、紅細胞聚集率。⑤治療前、療程結束后血清MDA、SOD水平。⑥治療前、療程結束后TLR4/NF-κB信號通路相關蛋白表達水平。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 臨床療效

觀察組臨床療效高于對照A、B組(P<0.05)，對照A、B組臨床療效相比，無明顯差異(P>0.05，見表2)。

2.2 NIHSS評分、Barthel指數(shù)

三組治療前NIHSS評分、Barthel指數(shù)相比，無明顯差異(P>0.05)；觀察組療程結束后NIHSS評分低于對照A、B組，Barthel指數(shù)高于對照A、B組(P<0.05)，對照A、B組相比，無明顯差異(P>0.05，見表3)。

表3 三組NIHSS評分、Barthel指數(shù)對比分)

2.3 腦血流動力學

三組治療前腦血流動力學指標相比，無明顯差異(P>0.05)；療程結束后，觀察組Vm水平高于對照A、B組，PI、RI低于對照A、B組(P<0.05)，對照A、B組相比，無明顯差異(P>0.05，見表4)。

表4 三組腦血流動力學對比

2.4 血液流變學指標

三組治療前血漿黏度、全血黏度、血小板聚集率相比，無明顯差異(P>0.05)；觀察組療程結束后血漿黏度、全血黏度、血小板聚集率較對照A、B組低(P<0.05)，對照A、B組相比，無明顯差異(P>0.05，見表5)。

2.5 氧化應激

三組治療前血清MDA、SOD水平相比，無明顯差異(P>0.05)；療程結束后，觀察組血清MDA水平低于對照A、B組，SOD水平高于對照A、B組(P<0.05)，對照A組血清MDA水平高于對照B組，SOD水平低于對照B組(P<0.05，見表6)。

2.6 TLR4/NF-κB信號通路相關蛋白

三組治療前TLR4、NF-κB蛋白表達相比，無明顯差異(P>0.05)；療程結束后，觀察組TLR4、NF-κB蛋白表達低于對照A、B組(P<0.05)，對照A組TLR4、NF-κB蛋白表達高于對照B組(P<0.05，見表7)。

表5 三組血液流變學指標對比

表6 三組血清SOD、MDA水平對比

表7 三組血液核細胞TLR4/NF-κB信號通路相關蛋白對比

3 討論

急性缺血性腦卒中為老年群體常見疾病，具有高發(fā)病率、高致殘率及高病死率，且近年來，隨著我國人口老齡化趨勢發(fā)展，該病發(fā)生率明顯增加，嚴重威脅國民身心健康[8]。目前，臨床治療急性缺血性腦卒中關鍵在于恢復梗死區(qū)域血流，改善神經(jīng)功能，減輕腦損傷[9]。

現(xiàn)階段，急性缺血性腦卒中治療方式多種多樣，本研究對急性缺血性腦卒中患者予以燈盞細辛注射液聯(lián)合胞二磷膽堿治療，結果顯示觀察組療程結束后NIHSS評分、血漿黏度、全血黏度、血小板聚集率、PI、RI低于對照A、B組，Barthel指數(shù)、Vm高于對照A、B組，且臨床療效優(yōu)于對照A、B組(P<0.05)，提示燈盞細辛注射液聯(lián)合胞二磷膽堿治療急性缺血性腦卒中，可改善患者血流動力學及血液流變學，促進神經(jīng)功能恢復，提高日常生活活動能力恢復，效果較為顯著。氧化應激機制為急性缺血性腦卒中重要發(fā)病機制，卒中發(fā)生后，機體內(nèi)活性氧族的產(chǎn)生與抗氧化防御體系間平衡被打破，致使組織處于氧化損傷狀態(tài)，其中MDA為活性氧族氧化細胞膜上不飽和脂肪酸反應的最終產(chǎn)物，而SOD為體內(nèi)重要抗氧化酶，二者水平變化反映機體氧化應激水平。本研究中觀察組療程結束后血清MDA水平低于對照A、B組，SOD水平高于對照A、B組，故燈盞細辛注射液聯(lián)合胞二磷膽堿可明顯減輕急性缺血性腦卒中患者氧化應激反應，進一步證實了二者聯(lián)合治療效果。原因在于：①缺血性腦卒中又名腦梗死，屬中醫(yī)學“血瘀”、“血行不暢”范疇，瘀血阻滯貫穿整個病理過程，燈盞細辛注射液具有活血化瘀功效，且現(xiàn)代藥理學證實，燈盞細辛注射液可通過抑制血小板活性，抵抗血小板聚集，有效改善機體血液流變學，發(fā)揮抗凝及抗血栓作用；抑制炎性因子表達及鈣離子超載，保護缺血部位神經(jīng)細胞，從而減輕腦缺血再灌注損傷；其主要成分野黃芩苷作為一種強氧化劑，可抗氧化，清除氧自由基，抵抗脂質過氧化造成的神經(jīng)細胞代謝紊亂及細胞結構變化；抑制調(diào)節(jié)Na+、k+-ATP酶活性，預防腦水腫，改善腦血流供應[10-11]；②胞二磷膽堿可提高線粒體ATP酶活性，抑制磷脂酶A2活性，上調(diào)多巴胺與去加腎上腺素水平，從而提高細胞膜穩(wěn)定性，減少自由基釋放，抑制腦缺血后過氧化物生成，從而發(fā)揮抗氧化作用[12-13]；③燈盞細辛注射液、胞二磷膽堿作用機制不同，聯(lián)合應用，協(xié)同補充，可最大程度提高療效。

TLR4作為一種重要的炎性受體類型，可介導機體炎性損傷，啟動細胞內(nèi)信號轉導，并通過NF-κB等途徑激活炎性細胞，對黏性因子與炎性因子產(chǎn)生作用，促發(fā)體內(nèi)炎性反應。相關研究表明，細胞因子啟動包含2個NF-κB結合位點，調(diào)節(jié)各種物質轉錄過程，當缺血性腦卒中時，機體轉錄因子被激活，NF-κB蛋白表達過量，致使腦組織內(nèi)發(fā)生異常變化，導致動脈血管內(nèi)皮受損，最終發(fā)展為腦血管閉塞，致使腦組織血流灌注下降，缺氧缺血程度加重等。顧紅梅，等[14]學者證實，急性缺血性腦卒中患者大腦前動脈、中動脈血流峰值與TLR4/NF-κB信號通路狀態(tài)存在一定相關性。本研究中，觀察組療程結束后TLR4、NF-κB蛋白表達低于對照A、B組，提示燈盞細辛注射液聯(lián)合胞二磷膽堿治療急性缺血性腦卒中，可顯著調(diào)節(jié)患者TLR4/NF-κB信號通路?？紤]原因可能是由于胞二磷膽堿、燈盞細辛注射液均具有抗炎作用，尤其是燈盞細辛注射液主要成分野黃芩苷具有抗炎作用，可抑制炎性因子及炎性相關信號通路表達[15]。

綜上所述，燈盞細辛注射液聯(lián)合胞二磷膽堿治療老年急性缺血性腦卒中，可顯著改善患者血流動力學、血液流變學，抑制氧化應激反應，調(diào)節(jié)TLR4/NF-κB信號通路，促進神經(jīng)功能恢復，提高日常生活活動能力，效果較為顯著，值得臨床推廣與應用。但本研究樣本量較小，還需臨床多中心、多渠道取樣，作進一步證實。