低劑量螺旋CT聯(lián)合7種肺癌自身抗體檢測對早期肺癌的篩查價(jià)值

孫良璋，李建忠，張丹杰，馬躍峰，李少民，張晉

西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院胸外科，西安 710004

衛(wèi)生部全國腫瘤防治辦公室統(tǒng)計(jì)資料顯示，中國肺癌的發(fā)病率按每年26.9%的速度增長。隨著國家不斷加大對霧霾防治及控?zé)煷胧┑牧Χ龋h(huán)境及吸煙所致的肺癌已得到有效控制，但肺癌仍舊是中國發(fā)病率及病死率最高的惡性腫瘤，病死率占全部惡性腫瘤致死原因的1/4。研究資料顯示，對肺癌患者進(jìn)行早期診斷及早期治療，可以有效延長肺癌患者的生存期，提高患者的生存質(zhì)量。目前，低劑量螺旋CT是臨床應(yīng)用最為廣泛的檢查方法，但該檢查方法的診斷假陽性率較高，且有輻射暴露的風(fēng)險(xiǎn)，未被多數(shù)國家認(rèn)可。檢測血液或組織中的小分子RNA，對早期腫瘤的診斷靈敏度也較低，臨床意義有限。同時(shí)，臨床又一直缺乏特異度高且使用廣泛的肺癌腫瘤標(biāo)志物，因此，需盡快尋找一種可用于臨床的肺癌早期篩查方法。本研究探討低劑量螺旋CT聯(lián)合7種肺癌自身抗體檢測對早期肺癌的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3月至2018年11月在西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院胸外科行低劑量螺旋CT聯(lián)合7種肺癌自身抗體檢測的患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：吸煙指數(shù)≥200；未戒煙或已戒煙時(shí)間≤10年；病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤；合并嚴(yán)重肺部疾病或器官功能衰竭，無法耐受手術(shù)；精神疾?。患韧谓M織切除手術(shù)史。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入108患者，其中女74例（平均年齡59.3歲），男34例（平均年齡57.2歲），其中經(jīng)全身體檢未發(fā)現(xiàn)體內(nèi)惡性腫瘤證據(jù)，并在隨后1年內(nèi)定期來院體檢，低劑量螺旋CT均未發(fā)現(xiàn)肺部病灶的患者38例（作為對照組）；低劑量螺旋CT提示肺部結(jié)節(jié)，并最終入院行手術(shù)切除獲得病理結(jié)果的患者70例。70例獲得病理結(jié)果的患者中，確診為肺癌40例（其中腺癌16例，鱗狀細(xì)胞癌22例，小細(xì)胞癌2例）、肺部良性結(jié)節(jié)30例，分別作為肺癌組和良性病變組。40例肺癌組患者的肺部結(jié)節(jié)實(shí)性成分直徑 8～20 mm，術(shù)中均進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn) N、N站淋巴結(jié)清掃，依據(jù)術(shù)后病理結(jié)果，其中17例淋巴結(jié)為陰性，TNM分期為Ⅰ期，為早期肺癌。

1.2 低劑量螺旋CT 檢查方法

采用西門子16排螺旋CT機(jī)，患者仰臥位，頭先進(jìn)。低劑量掃描參數(shù)為預(yù)設(shè)90 kV，30 mA，螺距1.0，重建層厚與間隔為5 mm。掃描范圍為胸廓入口至肺底，肺窗寬1200 Hu，縱隔窗寬400 Hu，均由2名放射科醫(yī)師完成閱片及診斷。

1.3 7種肺癌自身抗體檢測方法及判定標(biāo)準(zhǔn)

抽取108例患者治療前空腹外周靜脈血5 ml，離心分離血清后，采用酶聯(lián)免疫法檢測血清抑癌基因p53、蛋白基因產(chǎn)物 9.5（protein gene product 9.5，PGP9.5）、SOX區(qū)域Y相關(guān)HMG蛋白家族成員2（SRY-box containing gene 2，SOX2）、G 抗 原 7（GAGE7）、RNA解旋酶自身抗體4-5（RNA helicase autoantibodies，GBU4-5）、黑色素瘤抗原A1（melanoma antigen A1，MAGEA1）、腫瘤相關(guān)基因（cancer associated gene，CAGE）。正常參考值范圍：p53＜13.09 U/ml、PGP9.5＜11.1 U/ml、SOX2＜10.26 U/ml、GAGE7＜ 14.36U/ml、GBU4-5＜6.99U/ml、MAGEA1＜11.92 U/ml、CAGE＜7.23 U/ml。檢測結(jié)果超出參考范圍判定為陽性，任意一項(xiàng)檢測結(jié)果為陽性即將7種肺癌自身抗體檢測結(jié)果判定為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 肺癌自身抗體水平的比較

肺癌組、良性病變組患者和對照組受試者p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5、MAGEA1和CAGE水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

F

=4.51、1.09、2.48、5.12、2.89、1.73、2.09，

P

＜0.05）；兩兩比較結(jié)果顯示，肺癌組和良性病變組患者上述7種肺癌自身抗體水平均高于對照組受試者，且肺癌組患者7種肺癌自身抗體水平均高于良性病變組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

P

＜0.05）。（表1）

表1 3組受試者7種肺癌自身抗體水平的比較（U/ml，±s）

2.2 7種肺癌自身抗體單獨(dú)或聯(lián)合檢測對肺癌的診斷價(jià)值

病理學(xué)檢查結(jié)果顯示，早期肺癌17例，7種肺癌自身抗體檢測診斷早期肺癌14例，其陽性檢出率為82.4%。7種肺癌自身抗體聯(lián)合檢測診斷肺癌的靈敏度最高，為80.0%，檢測良性病變的靈敏度次之，為46.7%，但單一抗體的檢測靈敏度較低。7種肺癌自身抗體聯(lián)合檢測共檢出48例陽性，其中肺癌組陽性檢出率最高，為66.7%（32/48），其次為良性病變組和對照組，分別為29.2%（14/48）和4.2%（2/48）。（表2、表3）

表2 3組受試者7種肺癌自身抗體單獨(dú)或聯(lián)合檢測的陽性表達(dá)情況[n（%）]

表3 低劑量螺旋CT和7種肺癌自身抗體單獨(dú)或聯(lián)合檢測診斷肺癌的結(jié)果與病理學(xué)診斷結(jié)果的對照

3 討論

隨著國家在霧霾防治及控?zé)煷胧┓矫娴牧Χ燃哟?，環(huán)境及吸煙所致的肺癌已得到有效控制，但肺癌作為中國發(fā)病率及病死率均居第一位的惡性腫瘤，其具有較差的預(yù)后及較低的生存期，使人們越來越關(guān)注早期診斷及早期治療的方法。近年來，低劑量螺旋CT對早期肺小結(jié)節(jié)的篩查，得到了臨床的基本認(rèn)可，2011年美國國家肺癌篩查試驗(yàn)（National Lung Screening Trial，NLST）結(jié)果顯示，低劑量螺旋CT可發(fā)現(xiàn)85%的Ⅰ期肺癌，提高20%患者的生存率，但因假陽性率較高，且反復(fù)輻射暴露有一定的致癌風(fēng)險(xiǎn)，使其無法作為早期篩查手段得到進(jìn)一步應(yīng)用。臨床廣泛使用的癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、糖類抗原125（carbohydrate antigen 125，CA125）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原（squamous cell carcinoma-associated antigen，SCC）、細(xì)胞角質(zhì)蛋白19片段抗原21-1（cyto-keratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1）等血清肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物在預(yù)測腫瘤患者預(yù)后方面具有指導(dǎo)意義，但在早期篩查時(shí)，其靈敏度和特異度無法達(dá)到臨床需求。因此，亟需找到一種聯(lián)合檢測方法以達(dá)到早診斷、早治療肺癌的目的。

研究表明，腫瘤發(fā)病早期，機(jī)體的免疫系統(tǒng)可識別腫瘤細(xì)胞內(nèi)表達(dá)異常的蛋白，機(jī)體的免疫系統(tǒng)可以監(jiān)測到低水平表達(dá)腫瘤抗原的存在，進(jìn)而引發(fā)免疫反應(yīng)，并由免疫生物信號放大系統(tǒng)產(chǎn)生量抗體。肺癌自身抗體可以于臨床癥狀出現(xiàn)的2～5年前被檢測到，而自身抗體腫瘤標(biāo)志物在腫瘤早期就可以達(dá)成較高濃度，便于腫瘤早期高靈敏檢測發(fā)現(xiàn)。同時(shí)由于抗原-抗體反應(yīng)的高特異性和高敏感性，即使在血清中有大量白蛋白和其他蛋白的干擾下，也可以在極低的濃度下被準(zhǔn)確檢測到。并且腫瘤相關(guān)自身抗體一旦產(chǎn)生，由于其穩(wěn)定和長半衰期的特性，而且由于免疫系統(tǒng)的記憶功能，可以在血液中穩(wěn)定存在較長時(shí)間。而血清中抗體比抗原更穩(wěn)定，因此對樣本的處理和保存要求相對較低，檢測結(jié)果也更加穩(wěn)定，這就為本研究提供了理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

7種肺癌自身抗體與年齡、性別等人群特征無關(guān)，具有在普遍人群中進(jìn)行篩查的良好基礎(chǔ)。本研究結(jié)果顯示，肺癌組和良性病變組患者7種肺癌自身抗體水平均高于對照組受試者，且肺癌組患者7種肺癌自身抗體水平均高于良性病變組患者，且其檢測的靈敏度較高，為80.0%；7種肺癌自身抗體聯(lián)合共檢出48例，其中肺癌組陽性檢出率最高，為66.7%，與國外的大樣本研究結(jié)果相符。術(shù)后病理確診的17例早期肺癌患者中，14例檢測結(jié)果為陽性，檢出陽性率較高，但因樣本量較小，仍需進(jìn)一步大樣本量的研究進(jìn)行驗(yàn)證。本研究結(jié)果顯示，7種肺癌自身抗體中，單一抗體的陽性檢出率并不高，均未超過30%，但各項(xiàng)聯(lián)合檢測結(jié)果的靈敏度和特異度均明顯升高，表明臨床對待7種自身抗體檢測結(jié)果要聯(lián)合看待。

本研究結(jié)果表明，低劑量螺旋CT聯(lián)合7種肺癌自身抗體檢測不僅能夠有效彌補(bǔ)劑量螺旋CT診斷肺小結(jié)節(jié)假陽性率較高的缺點(diǎn)，還可有效降低低劑量螺旋CT的輻射暴露風(fēng)險(xiǎn)，具有較高的靈敏度，對臨床的指導(dǎo)意義較大，可能成為臨床肺癌早期診斷、早期治療的重要手段。后續(xù)仍需對7種肺癌自身抗體檢測與肺癌患者的臨床特征進(jìn)行更加深入的研究分析，旨在為臨床早期肺癌的治療提供進(jìn)一步的指導(dǎo)方案。