ERCC1基因C8092A多態(tài)性與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)研究

呂鵬飛，周 靜，朱瑞楠，蒙 沖，李曉珍，黃海溶，肖 莎

我國肺癌死亡率較高，嚴重危害人群健康。單核苷酸多態(tài)性 (single nucleotide polymorphism, SNP) 能使基因表達產(chǎn)物發(fā)生變化，出現(xiàn)遺傳特征的差異。核苷酸切除修復途徑 (nucleotide excision repair, NER) 主要修復DNA加合物引起的損傷。ERCC1是DNA修復酶，對DNA損傷進行識別和剪切。目前研究較多的是ERCC1 C8092A和C118T SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)。李劉麗研究發(fā)現(xiàn)ERCC1 C8092A多態(tài)與肺癌遺傳易感性相關，AA基因型比CC基因型患肺癌的風險增高；按吸煙分層后，AA基因型比CC基因型患肺癌的風險仍增高。本研究擬選擇264例肺癌患者和264例非肺癌患者作為研究對象，提取研究對象血液樣品DNA，檢測ERCC1 C8092A位點SNP，比較其與肺癌遺傳易感性的關系，為肺癌的預防提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病例資料

2017年1月1日—2017年10月30日，來自海南醫(yī)學院附屬醫(yī)院和海南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院肺癌患者264例作為病例組，非肺癌患者264例作為對照組。按照年齡、性別、飲酒情況、吸煙情況進行頻數(shù)匹配，病例組和對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義，具有可比性。

1.2 流行病學調(diào)查

獲得患者知情同意書后，對患者進行問卷調(diào)查，獲得基本人口信息(姓名、性別、年齡、籍貫、民族等)、吸煙情況(規(guī)定既往吸煙超過半年、平均吸煙>1支/d為吸煙者)、飲酒情況(規(guī)定既往飲酒超過半年,平均飲酒>50 ml/d為飲酒者)以及家族腫瘤史等信息。

1.3 DNA提取及其多態(tài)性分析

采集患者2～3 ml的外周靜脈血于枸櫞酸鈉抗凝的真空采血管中，在4 ℃的冰箱保存。提取DNA的方法按照TaKaRa全血DNA試劑盒操作步驟進行，采用質(zhì)譜法分析ERCC1 C8092A位點SNP，委托上海生工生物工程股份有限公司檢測。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 21.0軟件進行數(shù)據(jù)分析。對照組進行Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗。組間比較采用χ檢驗，多因素Logistic回歸分析計算比值比 (odds ratio,

OR

)、95% 的置信區(qū)間 (confidence interval,

CI

)，以

P

<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 研究對象基本情況

病例組和對照組的基本情況(年齡、性別、飲酒情況、吸煙情況)分布差異均無統(tǒng)計學意義 (χ=3.282,

P

=0.194)，兩組具有可比性。528例研究對象中，病例組年齡19～90(60.90±12.44)歲，男性185例 (70.10%)，女性79例 (29.90%)，吸煙者149例 (56.40%)，飲酒者67例 (25.40%)；對照組年齡20～92(61.75±14.92)歲，男性184例 (69.70%)，女性80例 (30.30%)，吸煙者139例 (52.65%)，飲酒者61例 (23.10%)。

2.2 對照組的Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗

ERCC1基因C8092A位點SNP分布的觀察數(shù)和預期數(shù)之間差異無統(tǒng)計學意義(

P

>0.05)，符合 Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，對照組樣本具有群體代表性，見表1。

2.3 ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌易感性的關聯(lián)

ERCC1基因C8092A位點有3種基因型：野生型 (CC)、雜合型 (CA)、突變純合型 (AA)。病例組與對照組基因分布差異有統(tǒng)計學意義(χ=34.125,

P

<0.001)。與攜帶CC基因型個體相比，攜帶CA基因型個體肺癌發(fā)病風險顯著降低，其

OR

值為0.380。校正混雜因素，年齡、性別、吸煙、飲酒后，ERCC1基因C8092A位點SNPs與肺癌的易感性仍表現(xiàn)相關，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險降低。與CC基因型比較，AA基因型患肺癌的風險無顯著變化(表2)。

表1 對照組的ERCC1基因C8092A位點SNP Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗

2.4 年齡分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

對年齡進行分層分析發(fā)現(xiàn)，在≥61歲年齡組中，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險降低。校正性別、吸煙情況、飲酒情況后，CA基因型患肺癌的風險仍降低(表3)。

2.5 性別分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

對性別進行分層分析發(fā)現(xiàn)，在男性中，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險降低，在女性中，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險降低。校正年齡、吸煙情況、飲酒情況后，CA基因型患肺癌的風險仍降低(表4)。

2.6 吸煙分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

對吸煙情況進行分層分析顯示，在吸煙組中，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險降低。在不吸煙組中，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險也降低。校正性別、年齡、飲酒情況后，CA基因型患肺癌的風險仍降低(表5)。

表2 ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌易感性的關系[n=264,n(%)]

表3 根據(jù)年齡分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

表4 根據(jù)性別分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

表5 根據(jù)吸煙分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

表6 根據(jù)飲酒分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

2.7 根據(jù)飲酒分層后ERCC1基因C8092A位點SNP與肺癌遺傳易感性的關聯(lián)

對飲酒情況進行分層分析發(fā)現(xiàn)，在飲酒組中，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險降低。在不飲酒組中，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險降低。校正性別、年齡、吸煙情況后，CA基因型患肺癌的風險仍降低(表6)。

3 討論

肺癌是全世界癌癥相關死亡的主要原因之一。肺癌的危險因素包括吸煙、被動吸煙、非腫瘤性肺部疾病、腫瘤家族史、大氣污染、室內(nèi)油煙、免疫性疾病、飲食因素、社會精神因素、體質(zhì)指數(shù)和HIV病毒感染與職業(yè)性暴露等。

郭燕 等研究結果顯示128例鱗癌患者中ERCC1陽性率64.1%，240例腺癌患者中ERCC1陽性者陽性率為50%，兩組間差異有統(tǒng)計學意義 (

P

<0.05)。Lv et al研究表明ERCC1基因多態(tài)性可能影響ERCC1 mRNA表達或穩(wěn)定及蛋白質(zhì)功能，可使NER功能受影響，增加基因組的不穩(wěn)定性，引起腫瘤或其他疾病發(fā)生惡性轉化。戴俊程 等選取1 010例肺癌患者和1 011例正常對照，采用基于通路的候選基因選點策略，從NER相關的8個核心基因中篩選出40個標簽SNPs進行檢測和分析，結果顯示6個SNPs (ERCC1 2個, DDB2 2個, ERCC4/XPF 1個, XPC 1個) 與肺癌的易感性相關。調(diào)整年齡、性別、吸煙史和腫腫瘤家族史后，仍有3個SNPs (ERCC1 rs3212948, DDB2 rs830083, ERCC4 rs3136038) 與肺癌易感性存在關聯(lián)。該研究結果顯示攜帶ERCC1 C8092A位點CA基因型個體的肺癌遺傳易感性降低 (CA

vs

CC，

OR

=0.380, 95%

CI

: 0.267～0.541,

P

<0.001)；校正混雜因素年齡、性別、吸煙、飲酒后CA基因型患肺癌的風險降低 (校正

OR

=0.380, 95%

CI

: 0.262～0.538,

P

<0.001)。張增利研究發(fā)現(xiàn)攜帶ERCC1野生純合基因型 (C/C) 且不吸煙者作為參照,每年吸煙>25包且攜帶野生純合基因型 (C/C) 或雜合基因型 (C/T) 者患肺癌的風險均會提高 (

OR

=2.62, 95%

CI

: 1.54～4.44;

OR

=2.41, 95%

CI

: 1.36～4.26,

P

<0.01)。說明ERCC1 C118T位點基因多態(tài)與吸煙聯(lián)合作用會增加患肺癌的風險。而本研究未將CC基因型中不吸煙者作為參照，按吸煙分層后發(fā)現(xiàn)ERCC1 C8092A位點CA基因型個體患肺癌風險較低。逯曉波 等研究發(fā)現(xiàn)ERCC1 C8092A位點基因多態(tài)性與肺癌易感性有關，其AA基因型攜帶者比CC基因型攜帶者患肺癌的風險高，尤其在男性中更為顯著(

OR

=2.718, 95%

CI

: 1.066～6.931,

P

>0.05)。而本研究結果為無論男女，與CC基因型比較，CA基因型患肺癌的風險均降低。分析其原因可能為該研究對象為東北人群，而本研究對象為海南人群，不同地域人群基因型遺傳易感性存在差異，因此需要通過進一步擴大樣本量和人群分布范圍，同時也應考慮環(huán)境因素、腫瘤病理分期、多基因作用等多種混雜因素，以得到更可靠的結論。

綜上，ERCC1 C8092A位點CA基因型個體患肺癌風險顯著低于其他基因型，可為我國肺癌的防治工作提供科學的理論依據(jù)。