羅維朋比色法和分光光度法對大豆油 成品色澤監(jiān)控時(shí)的應(yīng)用分析

◎ 苗磊鵬，郭 靜，盧美娟

（中儲糧油脂（新鄭）有限公司，河南 新鄭 451100）

純凈的油脂在液態(tài)時(shí)是無色的，固態(tài)時(shí)呈現(xiàn)白色，但常見的各種油料制得的油脂均帶有一定的色澤，它主要來自油料所含的油溶性色素，包括葉綠素、類胡蘿卜素、棉酚等，是油脂中各種色素的綜合體現(xiàn)[1-2]大豆油的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)雖然將色澤修改為非定量測定的描述性感官測定項(xiàng)目[3]，但其仍然是油脂生產(chǎn)監(jiān)控的重要質(zhì)量指標(biāo)之一。同時(shí)，色澤也是消費(fèi)者選購食用油時(shí)的外觀依據(jù)，所以，加工企業(yè)需要在控制生產(chǎn)的情況下，優(yōu)化油脂脫色工藝，以此達(dá)到成品油色澤國家標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)消費(fèi)者滿意認(rèn)可的產(chǎn)品。因此，色澤的準(zhǔn)確定量檢測在油脂的日常生產(chǎn)監(jiān)控就顯得非常重要。油脂色澤測定的國標(biāo)方法為羅維朋比色法，而近年來的大量的文獻(xiàn)資料表明，分光光度法在測定油脂色澤時(shí)不僅與羅維朋的測定結(jié)果有很好的相關(guān)性，而且在結(jié)果的連續(xù)性和重現(xiàn)性上有很大的優(yōu)勢，能準(zhǔn)確反映油脂色澤的真實(shí)情況[4-7]。本文就羅維朋比色法與分光光度法在測定一級大豆油油色澤的應(yīng)用中進(jìn)行對比分析，以期為大豆油的生產(chǎn)實(shí)踐提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

顏色深淺不一的一級大豆油樣；無水乙醚或石油醚，分析純；正己烷，分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

Model F型羅維朋比色計(jì)（英國羅維朋，配133.4 mm 比色槽）、TU-1810 型紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限公司，配1 cm 比色皿）。

1.3 羅維朋比色法

1.3.1 方法依據(jù)

嚴(yán)格按照GB/T 22460—2008 規(guī)定的步驟進(jìn)行，采用羅維朋比色法測定，在同一光源下，由透過已知光程的液態(tài)油脂樣品的光的顏色與透過標(biāo)準(zhǔn)玻璃色片的光的顏色進(jìn)行匹配，靠人眼直接觀察比對測定。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)測定

在光線柔和的同一實(shí)驗(yàn)室，溫度、濕度相同的環(huán)境條件下，3 名化驗(yàn)員分別對6 個色澤不一的一級大豆油樣品用同一臺羅維朋比色計(jì)進(jìn)行色澤獨(dú)立測定，記錄相應(yīng)結(jié)果；剩余樣品由其中一位檢驗(yàn)員使用同一臺羅維朋比色計(jì)測定。

1.4 紫外可見分光光度計(jì)法

1.4.1 檢測依據(jù)

色澤不同的油品在400 ～800 nm（可見光區(qū)）吸光度不同。油品在430 ～480 nm 范圍內(nèi)有較大吸收的峰呈現(xiàn)紅黃色[7-8]，在620 ～680 nm 范圍內(nèi)有較大吸收的峰呈現(xiàn)青綠色[4]，所以可以使用分光光度計(jì)測定油脂吸光度表示紅黃值、青綠值的大小。

1.4.2 操作步驟

（1）設(shè)置參數(shù)。光度方式：Abs；掃描波長范圍：400 ～800 nm；掃描速度：快速，間隔1 nm；顯示范 圍：最大1.000，最小0.000。

（2）基線校正。用無水乙醚或石油醚對比色皿進(jìn)行清洗，確保比色皿干凈，不可粘有其他物質(zhì)。向1 cm 玻璃比色皿加入正己烷，高度約為比色皿高度的2/3 處，然后將比色皿放入樣品槽中。單擊“基線”，以正己烷為參比進(jìn)行基線校正。

（3）將油樣倒入干燥、潔凈的1 cm 玻璃比色皿 中，高度約為比色皿高度的2/3 處。比色皿內(nèi)待測油樣應(yīng)無氣泡、絮狀物等雜質(zhì)，開始掃描。

（4）掃描完成后，校正波長。

（5）導(dǎo)出數(shù)據(jù)，選擇620 ～680 nm、430 ～480 nm 的吸光數(shù)據(jù)進(jìn)行積分求和，結(jié)果即為所需紅黃值、青綠值。

2 結(jié)果與分析

2.1 羅維朋比色計(jì)法測定一級大豆油色澤的人員比對

本文選擇了具有良好的操作經(jīng)驗(yàn)和顏色辨識能力的檢驗(yàn)員A、B、C 三人，按文中1.3.2 的規(guī)定進(jìn)行測試并記錄，結(jié)果見表1。

表1 羅維朋比色法測定不同一級大豆油樣色澤的人員比對結(jié)果表

通過表1 可知，利用羅維朋比色計(jì)測定一級大豆油色澤時(shí)，不同操作人員對同一油樣，測定結(jié)果有偏差。對于普通的一級大豆油，黃色誤差值為1 個單位，紅色誤差值為0.1 個單位；而對于發(fā)青發(fā)烏的巴西大豆油測定差異較大，黃色誤差值為2 個單位，紅色誤差值為0.2 個單位。

此方法優(yōu)點(diǎn)是設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，容易普及，但缺點(diǎn)是操作者必須具有熟練的技巧才能獲得較準(zhǔn)確的測定結(jié)果，對相同樣品，不同操作者因視覺判斷各異而會得到不一致的結(jié)果，標(biāo)準(zhǔn)玻璃色片的顏色會隨著使用時(shí)間的延長而逐漸“失準(zhǔn)”，羅維朋比色計(jì)只能進(jìn)行間斷性作業(yè)，長時(shí)間作業(yè)會出現(xiàn)視覺疲勞，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，對于原料油成熟性差，色澤發(fā)青、發(fā)烏、發(fā)蒙的一級豆油采用羅維朋檢測色澤，不同人員檢測結(jié)果偏差較大，并且羅維朋比色法對于油脂的色澤也無法用數(shù)值表示，油品罐裝后，外觀差，影響消費(fèi)者選購和企業(yè)銷售。

2.2 紫外可見分光光度計(jì)法測定結(jié)果

由表2 可知，利用紫外分光光度計(jì)測定一級大豆油色澤時(shí)，無論是色澤透亮油脂還是色澤發(fā)青、發(fā)烏、發(fā)蒙油脂，不同操作人員對同一油樣，測定結(jié)果偏差很小，重復(fù)性、再現(xiàn)性較高。

表2 紫外分光度法測定不同一級大豆油樣色澤的人員比對結(jié)果表

2.3 不同測定方法對一級大豆油色澤測定的紅黃值對比分析

在日常生產(chǎn)監(jiān)測中，本文選取紫外分光光度計(jì)測定色澤紅黃值在1.6～3.5的樣品進(jìn)行羅維朋色澤測定，測定結(jié)果見表3。為直觀分析結(jié)果，將表3 中的數(shù)據(jù)做比對分析圖，見圖1。

表3 不同測定方法對一級大豆油色澤測定的紅黃值表

圖1 兩種檢測方法紅黃值對比圖

由表3 和圖1 可知，羅維朋色澤為（Y 6.0，R 0.6）、（Y 7.0，R 0.7）、（Y 8.0，R 0.8）和（Y 9.0，R 0.9）的油脂，通過紫外分光光度計(jì)測定油脂色澤能夠?qū)ι珴傻拿枋龈?xì)量化，通過具體數(shù)值的差異預(yù)判油脂色澤變化趨勢，可以指導(dǎo)生產(chǎn)，對油品質(zhì)量控制更有效。紫外分光光度計(jì)測定能夠?qū)τ椭珴汕嗑G值量化，油樣經(jīng)羅維朋比色法檢測紅黃值相同，但反應(yīng)在青綠值上存在差異，且油品感官色澤差異也較大，具體見表4 對羅維朋比色法檢測紅黃值相同的6 個一級大豆油進(jìn)行紫外分光光度計(jì)測定。

表4 不同測定方法對一級大豆油色澤測定的紅黃值表

從表4 可以看到6 個油樣羅維朋比色法測定油樣色澤均為Y 8.0，R 0.8，青綠值依次是0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 和1.6，實(shí)際生產(chǎn)過程中青綠值較高的3 個樣品（青綠值大于1.0）罐裝后，油樣發(fā)青、發(fā)烏，透明度差，外觀極差，客戶很難接受，影響產(chǎn)品銷售。

3 結(jié)論

通過羅維朋比色法與分光光度法測定油脂色澤分析可知，羅維朋比色法對色澤透亮的油脂能夠快速準(zhǔn)確的判定，但對于色澤發(fā)青、發(fā)烏的樣品，測定結(jié)果無法反應(yīng)油脂的真實(shí)情況；對于大量油脂樣品色澤判定，需要耗費(fèi)大量時(shí)間，并且易造成檢驗(yàn)人員視覺誤差，影響結(jié)果判定。為了優(yōu)化產(chǎn)品質(zhì)量把控，對此類情況采用分光光度法測定特征波長下吸光度值來表示油脂的色澤，其準(zhǔn)確性和重復(fù)性都較高。企業(yè)在生產(chǎn)過程中根據(jù)油品的感官色澤情況，制定相應(yīng)的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，油品色澤檢測采用羅維朋比色法與分光光度法相結(jié)合的方式，可以更加有效地指導(dǎo)生產(chǎn)，避免產(chǎn)品色澤發(fā)青發(fā)烏的情況產(chǎn)生，提升產(chǎn)品質(zhì)量和客戶的認(rèn)可度，提升企業(yè)品牌的美譽(yù)度。