四川省屏山縣提升屠宰企業(yè)非洲豬瘟檢測能力的實(shí)踐與思考

柯玉潔，王 賓，李 成，牟 莉，吳玉疆

（1.屏山縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川屏山 645350；2.宜賓市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川宜賓 644000）

非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）感染動(dòng)物后可導(dǎo)致高發(fā)病率、死亡率，為此我國將非洲豬瘟（African swine fever，ASF）列為一類動(dòng)物疫病[1]。快速準(zhǔn)確診斷ASF，防止病毒擴(kuò)散，對其防控至關(guān)重要[2]。屠宰環(huán)節(jié)是生豬產(chǎn)銷的重要環(huán)節(jié)，屠宰企業(yè)ASF 自檢能力直接影響著能否有效阻斷ASFV 在屠宰環(huán)節(jié)的傳播。2019年，四川省屏山縣5 家屠宰企業(yè)初步建立了ASFV檢測實(shí)驗(yàn)室。經(jīng)過1 年的實(shí)踐與優(yōu)化，通過提升實(shí)驗(yàn)室硬件設(shè)施建設(shè)水平、優(yōu)化檢測人員隊(duì)伍、加強(qiáng)檢測人員培訓(xùn)等措施，檢測能力顯著提升。本文對2019—2020 年縣內(nèi)5 家屠宰企業(yè)實(shí)驗(yàn)室基本情況開展調(diào)查與分析，并對提升屠宰企業(yè)ASFV 檢測能力進(jìn)行了若干思考，以期為其他地區(qū)屠宰企業(yè)提高ASF 檢測能力提供參考。

1 問卷和現(xiàn)場調(diào)查

1.1 2019 年初建實(shí)驗(yàn)室硬件情況

屏山縣共有5 家屠宰企業(yè)（企業(yè)名稱A—E），其中持A 證1 家、持B 證4 家，均于2019 年初步建立了ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室。除企業(yè)A 外，其他4家企業(yè)檢測實(shí)驗(yàn)室均不是獨(dú)立房間，未完全設(shè)置物理隔斷，且C、D、E 企業(yè)檢測實(shí)驗(yàn)室均與屠宰車間相連。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)面積為10～20 m2，平均為14 m2；5 個(gè)實(shí)驗(yàn)室均配置了等溫?zé)晒舛縋CR 儀、離心機(jī)、冰箱冰柜、儲物柜和垃圾桶，但高壓蒸汽滅菌鍋、移動(dòng)紫外燈等消毒設(shè)備和振蕩器、水浴鍋等其他設(shè)備均未配置（表1）。

1.2 2019 年初建實(shí)驗(yàn)室檢測人員情況

5 家屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室共配置5 名檢測人員，以非專業(yè)人員為主，占比60.0%；檢測人員以兼職為主，占比60.0%；學(xué)歷以大專以下為主，占比80.0%；年齡結(jié)構(gòu)偏中老年化，40 歲以上占比60.0%（表2）。

2 2019 年檢測能力比對情況

2019 年開展1 次現(xiàn)場比對試驗(yàn)，設(shè)置5 個(gè)盲樣，樣品在比對前通過ASFV 熒光定量PCR 檢測試劑盒（購自青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心，批號040221901）進(jìn)行驗(yàn)證，確認(rèn)比對樣品的真實(shí)性。比對所使用的PCR 儀、試劑和耗材均由各屠宰企業(yè)自備[3]。結(jié)果顯示：陰性平均檢出率為60.0%，陽性平均檢出率為66.7%，陰陽對照平均檢出率為90.0%，比對平均符合率為48.0%（表3）。結(jié)果表明，全縣屠宰企業(yè)檢測穩(wěn)定性差，檢測效果較為一般。

表1 2019 年屏山縣屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室硬件情況

表2 2019 年屏山縣屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室人員情況 單位：個(gè)

3 屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室檢測能力提升實(shí)踐

3.1 措施

3.1.1 改造實(shí)驗(yàn)室硬件 一是領(lǐng)導(dǎo)重視?？h分管領(lǐng)導(dǎo)多次現(xiàn)場督查屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室工作，并督促企業(yè)進(jìn)行硬件整改；二是指導(dǎo)遷址改建?？h動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心到場指導(dǎo)屠宰企業(yè)實(shí)驗(yàn)室重新選址，屠宰企業(yè)配合指導(dǎo)意見，根據(jù)自身實(shí)際情況，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室遷址改造；三是指導(dǎo)增購設(shè)備?？h動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心和縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所每月到場監(jiān)督，針對各屠宰企業(yè)實(shí)際情況，指導(dǎo)增購相應(yīng)設(shè)備。

3.1.2 優(yōu)化檢測人員隊(duì)伍 一是大力宣傳?？h動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心及時(shí)向屠宰企業(yè)傳達(dá)ASFV 檢測相關(guān)文件精神，并要求每家屠宰企業(yè)配備1 名全職檢測人員；二是落實(shí)主體責(zé)任。要求屠宰企業(yè)通過社會招聘方式，配備實(shí)驗(yàn)檢測人員。

3.1.3 加強(qiáng)檢測人員培訓(xùn) 一是集中培訓(xùn)?？h動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心召集實(shí)驗(yàn)檢測人員和駐場官方獸醫(yī)，針對PCR 原理、試驗(yàn)設(shè)備使用、試驗(yàn)操作流程和生物安全防護(hù)等內(nèi)容開展集中理論培訓(xùn)，并現(xiàn)場解答試驗(yàn)操作中易出現(xiàn)的問題；二是到場指導(dǎo)?？h動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心技術(shù)人員每季度到屠宰企業(yè)開展1 對1 現(xiàn)場實(shí)際操作培訓(xùn)，對檢測過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行針對性指導(dǎo)；三是試驗(yàn)比對。每年組織1～2 次檢測能力比對，并在比對結(jié)束后，針對出現(xiàn)的問題及時(shí)現(xiàn)場分析并逐一提供解決措施。

3.2 成效

3.2.1 硬件改造情況 經(jīng)過1 年多的實(shí)驗(yàn)室硬件升級改造，5 家屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室均遷址改建，其中A 屠宰企業(yè)實(shí)驗(yàn)室從原后門門衛(wèi)室旁改建到凍庫后單獨(dú)搭建的房間，并將原桌臺和柜子換成了標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室桌臺柜；B 屠宰企業(yè)實(shí)驗(yàn)室從原大門口改建到屠宰場1 樓辦公室；C 屠宰企業(yè)實(shí)驗(yàn)室從屠宰車間旁改建到1 樓辦公室；D 屠宰企業(yè)實(shí)驗(yàn)室從屠宰車間旁改建到2 樓辦公室；E 屠宰企業(yè)實(shí)驗(yàn)室從屠宰車間旁改建到1 樓辦公室。實(shí)驗(yàn)室均有獨(dú)立且進(jìn)行了簡單分區(qū)的檢測室，平均面積增加至22 m2。5 家企業(yè)均增購了相應(yīng)設(shè)施設(shè)備（表4）：一是垃圾桶均增設(shè)至2 個(gè)，用于區(qū)分生物廢棄物垃圾和普通垃圾；二是均增設(shè)了消毒設(shè)施，購買了消毒噴壺，并按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)的《非洲豬瘟疫情應(yīng)急實(shí)施方案（2020 年版）》（農(nóng)牧發(fā)〔2020〕10 號）附件《非洲豬瘟消毒規(guī)范》中內(nèi)容，使用含氯消毒液噴灑地面，酒精擦拭實(shí)驗(yàn)桌臺和設(shè)備進(jìn)行消毒；三是均增設(shè)了設(shè)備，其中A 屠宰企業(yè)增設(shè)PCR 儀、紫外燈、高壓滅菌鍋、振蕩器和水浴鍋各1 臺，現(xiàn)已基本符合《四川省生豬屠宰企業(yè)非洲豬瘟檢測實(shí)驗(yàn)室建設(shè)及生物安全技術(shù)要求》；B 屠宰企業(yè)增設(shè)紫外燈和高壓滅菌鍋各1 臺；C 屠宰企業(yè)增設(shè)PCR儀、紫外燈和高壓滅菌鍋各1 臺；D 屠宰企業(yè)增設(shè)紫外燈1 臺、煮沸消毒專用電磁鍋爐1 套；E 屠宰企業(yè)增設(shè)煮沸消毒專用電磁鍋爐1 套。

表3 2019 年屏山縣屠宰企業(yè)ASFV 檢測現(xiàn)場比對結(jié)果

表4 2020 年屏山縣屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室硬件改造情況

3.2.2 檢測人員優(yōu)化情況 經(jīng)過1 年來的人員優(yōu)化調(diào)整，檢測人員增至8 個(gè)，其中專業(yè)人員5 個(gè)，占比由40.0%提升至62.5%，專業(yè)化占比增加；每家屠宰企業(yè)均配置了1 名以上全職檢測人員，全職人員共6 人，占比由40.0%提升至75.0%，逐漸以全職為主；大專及以上學(xué)歷占比從20.0%提升至37.5%，年齡40 歲以下的7 人，占比由40.0%提升至87.5%，年齡結(jié)構(gòu)已向年輕化轉(zhuǎn)變。具體見表5。

3.2.3 檢測能力提升情況 自屠宰企業(yè)開展ASFV 檢測以來，縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心組織屠宰企業(yè)和駐場官方獸醫(yī)開展檢測技術(shù)集中培訓(xùn)4 次，到場指導(dǎo)25 次。2020 年再次進(jìn)行了檢測能力現(xiàn)場比對試驗(yàn)。結(jié)果（表6）顯示：陰性檢出率、陽性檢出率、陰陽對照檢出率和比對符合率均為100%，比對結(jié)果平均符合率由48.0%提升至100%，檢測效果提升明顯。

4 有關(guān)思考

4.1 做好督查、督導(dǎo)和督促，不斷提升實(shí)驗(yàn)室硬件水平

一是各級領(lǐng)導(dǎo)不定期到屠宰企業(yè)督查發(fā)現(xiàn)和解決問題，不斷強(qiáng)化屠宰企業(yè)對實(shí)驗(yàn)室硬件改造的重視程度；二是縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心根據(jù)各屠宰企業(yè)實(shí)際情況，對檢測實(shí)驗(yàn)室位置進(jìn)行選址指導(dǎo)，一次性完成整改，減少企業(yè)成本；三是對硬件改造進(jìn)度慢的屠宰企業(yè)，通過到場監(jiān)督、下達(dá)《責(zé)令整改通知書》和責(zé)令停產(chǎn)等多形式進(jìn)行督促整改。

表5 2020 年屏山縣屠宰企業(yè)ASFV 檢測實(shí)驗(yàn)室人員分布情況 單位：個(gè)

表6 2020 年屏山縣屠宰企業(yè)ASFV 檢測現(xiàn)場比對結(jié)果統(tǒng)計(jì)

4.2 多形式優(yōu)化檢測人員隊(duì)伍，確保檢測到位

一是宣傳指導(dǎo)要到位。通過網(wǎng)絡(luò)和到場指導(dǎo)的方式，將屠宰企業(yè)開展ASFV 自檢的相關(guān)文件要求宣傳到位；二是多舉措保障檢測人員數(shù)量。對于有經(jīng)濟(jì)實(shí)力的屠宰企業(yè)，可通過社會招聘的方式引進(jìn)新檢測人員。對于經(jīng)濟(jì)實(shí)力差的屠宰企業(yè)，可探索通過邀請親友，經(jīng)崗前培訓(xùn)合格后聘用，以穩(wěn)定人員節(jié)約成本。

4.3 加強(qiáng)檢測人員培訓(xùn)、檢測比對和實(shí)驗(yàn)室管理指導(dǎo)

一是定期培訓(xùn)。到場培訓(xùn)能針對性地發(fā)現(xiàn)問題，如E 屠宰企業(yè)將陽性對照試劑加到陰性對照管中，并在加入后試圖將加錯(cuò)的試劑吸出來，未重新配置陰性對照，導(dǎo)致陰性對照檢測出陽性結(jié)果而失??；B 屠宰企業(yè)將檢測試劑盒長時(shí)間室溫放置，導(dǎo)致檢測試劑酶活力下降，影響試驗(yàn)結(jié)果；A 屠宰企業(yè)PCR 儀未做好內(nèi)外部去污等保養(yǎng)，儀器內(nèi)部被陽性對照污染，導(dǎo)致試驗(yàn)出現(xiàn)假陽性結(jié)果。通過分析、及時(shí)解決問題，并結(jié)合集中理論培訓(xùn)，收到了較好效果。二是開展現(xiàn)場檢測比對試驗(yàn)。2020年檢測比對允許屠宰企業(yè)立即復(fù)檢1 次，以排除心理因素等導(dǎo)致的失誤，更接近于實(shí)際水平。三是定期抽檢?？h動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心定期檢查屠宰企業(yè)的樣品保存情況，并對環(huán)境樣品及試驗(yàn)樣品進(jìn)行抽樣檢測。四是加強(qiáng)監(jiān)管。在每月檢查中要求屠宰企業(yè)完善實(shí)驗(yàn)室管理和生物安全制度，做好試驗(yàn)檢測記錄、消毒記錄等相關(guān)資料，定期檢查試驗(yàn)試劑及儀器設(shè)備，要求發(fā)現(xiàn)設(shè)備損壞及時(shí)維修，檢查試劑盒是否過期并及時(shí)處理，定期清理檢測樣品和試驗(yàn)廢棄物，做好實(shí)驗(yàn)室生物廢棄物處理工作。