自然保護(hù)區(qū)和國有林區(qū)野豬在貴州省道真縣境內(nèi)死亡的流行病學(xué)調(diào)查

皮 泉，劉亞娟，李 濤，張人俊，陳能橋

（1.貴州省動物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550008；2.安順市動物疫病預(yù)防控制中心，貴州安順 561000；3.遵義市動物疫病預(yù)防控制監(jiān)測站，貴州遵義 563000）

野豬作為豬病病原微生物傳播的重要生物媒介，在各類重大動物疫情散播中承擔(dān)了重要角色[1-3]。道真縣屬遵義市下轄的自治縣，位于貴州省最北部、云貴高原向四川盆地過渡的斜坡地帶，境內(nèi)有多個國有林區(qū)、自然保護(hù)區(qū)以及梅江河和芙蓉江，氣候條件適宜，森林資源豐富，生態(tài)環(huán)境保護(hù)較好，常年有野豬活動。2020 年2 月20 日，貴州省道真縣生態(tài)護(hù)林員在大磏鎮(zhèn)三元村發(fā)現(xiàn)2 具野豬尸體，但因尸體高度腐敗，已無法采樣進(jìn)行實驗室檢測。為鑒別死亡原因，及時控制野豬將疫病傳播到周邊養(yǎng)豬戶的風(fēng)險，該縣立即組織相關(guān)工作人員在全縣進(jìn)行排查。截至2020 年3 月4 日，在道真縣大磏鎮(zhèn)三元村、大磏社區(qū)、土城壩村，洛龍鎮(zhèn)鷹咀村、龍橋村、三院村、洛龍村和三橋鎮(zhèn)鳳山村等3 個鎮(zhèn)8個村（社區(qū)）10個村民組共排查發(fā)現(xiàn)23具野豬尸體。

1 調(diào)查方法

采用現(xiàn)場調(diào)查的方式，了解野豬尸體及發(fā)現(xiàn)點情況，并采集野豬尸體組織樣品，采用熒光RTPCR/PCR 方法進(jìn)行豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環(huán)病、非洲豬瘟等疫病的實驗室檢測。通過走訪農(nóng)戶、生態(tài)護(hù)林員、村級疫病防治員以及死亡野豬處理人員，了解野豬尸體發(fā)現(xiàn)點周邊村寨的生豬生產(chǎn)養(yǎng)殖情況、衛(wèi)生管理狀況和發(fā)病情況等。

1.1 病例定義

2020 年2 月20 日至3 月4 日，遵義市道真縣境內(nèi)發(fā)現(xiàn)的所有死亡野豬。

1.2 實驗室檢測

采集死亡野豬的組織樣本，采用豬瘟病毒熒光RT-PCR 檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒熒光RT-PCR 檢測試劑盒、豬圓環(huán)病毒熒光PCR檢測試劑盒、非洲豬瘟病毒熒光PCR 檢測試劑盒和口蹄疫病毒核酸檢測試劑盒，分別按照使用說明進(jìn)行病原學(xué)檢測。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)偏差橢圓分析

基于GIS 的方向分布（標(biāo)準(zhǔn)差橢圓）工具，分析本次道真縣境內(nèi)野豬死亡的空間分布特征：集中、定向和分散趨勢。橢圓的長軸和短軸分別代表死亡野豬分布的方向性和分散性，橢圓的大小設(shè)定為涵蓋68%的死亡野豬點，以研究出現(xiàn)死亡野豬區(qū)域的大小以及導(dǎo)致野豬死亡病因呈現(xiàn)的定向趨勢[4]。

1.4 每天死亡數(shù)估算

為預(yù)測本次野豬死亡事件的嚴(yán)重程度，為后期的防控排查提供數(shù)據(jù)支撐，使用伽馬分布模擬泊松過程，估算每天出現(xiàn)野豬死亡的平均數(shù)（λ），其中x為排查出的死亡野豬數(shù)，t為出現(xiàn)死亡野豬的時間段。

2 結(jié)果與分析

2.1 空間分布

經(jīng)排查，在道真縣發(fā)現(xiàn)野豬尸體的區(qū)域集中在北部的大磏鎮(zhèn)、三橋鎮(zhèn)和洛龍鎮(zhèn)3 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)。大磏鎮(zhèn)和三橋鎮(zhèn)緊鄰重慶市南川區(qū)，西北部地處國有林區(qū)，周圍山大林密；洛龍鎮(zhèn)緊鄰重慶市武隆區(qū)，東北部地處國家級大沙河自然保護(hù)區(qū)和國有林區(qū)。23 具野豬尸體均分布在距自然保護(hù)區(qū)或林區(qū)邊界500～2 000 m 的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)地附近山林中（圖1）。其中：大磏鎮(zhèn)3 個村（社區(qū)）共排查出野豬尸體16 具，占總發(fā)現(xiàn)數(shù)的69.6%；洛龍鎮(zhèn)4 個村共排查出野豬尸體6 具，占總發(fā)現(xiàn)數(shù)的26.1%；三橋鎮(zhèn)1 個村排查出野豬尸體1 具，占總發(fā)現(xiàn)數(shù)的4.3%。在大磏鎮(zhèn)三元村（面積38 km2）和大磏社區(qū)（面積52 km2）發(fā)現(xiàn)的15 具野豬尸體所處的3 個村民組相鄰，有較為明顯的聚集性，其他8 具野豬尸體在不同的村組零星分布。從發(fā)現(xiàn)地點環(huán)境看，東南方向向陽山坡發(fā)現(xiàn)野豬尸體較多，靠近重慶市西北方向的背陽山坡僅發(fā)現(xiàn)3 具野豬尸體。

圖1 道真縣發(fā)現(xiàn)死亡野豬分布

標(biāo)準(zhǔn)偏差橢圓分析結(jié)果（圖2）顯示，發(fā)現(xiàn)死亡野豬的空間分布特征具有明顯的方向性，長軸長度（YS）/短軸長度（XS）=4.3，總體上呈現(xiàn)西南-東北向分布，中心點在大磏鎮(zhèn)和三橋鎮(zhèn)交界一帶。

圖2 死亡野豬分布標(biāo)準(zhǔn)差橢圓分析結(jié)果

2.2 時間分布

生態(tài)護(hù)林員2 月20 日在大磏鎮(zhèn)三元村首先發(fā)現(xiàn)2 具野豬尸體。隨后道真縣組織開展全縣集中排查，每天陸續(xù)在不同村組排查出死亡野豬。截至3 月4 日，在大磏鎮(zhèn)三元村、大磏社區(qū)、土城壩村，洛龍鎮(zhèn)三院村、龍橋村、洛龍村、鷹咀村和三橋鎮(zhèn)鳳山村共10個村民組排查發(fā)現(xiàn)23具野豬尸體（圖3）。當(dāng)?shù)赜薪?jīng)驗的林業(yè)部門人員和農(nóng)戶根據(jù)野豬尸體腐爛程度估計，野豬死亡時間為20～60 d。

圖3 道真縣排查發(fā)現(xiàn)死亡野豬時間分布

2.3 群間分布

發(fā)現(xiàn)的23 具野豬尸體中，16 具體質(zhì)量為20～25 kg，7 具為40～60 kg，較小體質(zhì)量野豬死亡數(shù)約占70%。

2.4 實驗室檢測

因發(fā)現(xiàn)時大部分野豬尸體腐敗程度較高，已無法鑒別組織病變等情況，故采集部分樣品進(jìn)行實驗室檢測。2 月26 日，采集大磏鎮(zhèn)三元村石仁組死亡野豬肝脾組織1 份，但因高度腐敗，無法檢測。2 月28 日，采集洛龍鎮(zhèn)鷹咀村磚房組死亡野豬內(nèi)臟組織1 份，結(jié)果檢出豬圓環(huán)病毒陽性，而豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征、非洲豬瘟均為陰性。

2.5 每天死亡數(shù)估算

2020 年2 月20 日至3 月4 日，14 d 內(nèi)共排查發(fā)現(xiàn)23 具野豬尸體。根據(jù)野豬尸體腐爛程度推斷，2 月20 日首次在大磏鎮(zhèn)三元村發(fā)現(xiàn)的野豬尸體推測死亡時間接近60 d，3 月4 日最后在洛龍鎮(zhèn)洛龍村發(fā)現(xiàn)的野豬尸體推測死亡時間約為25 d。經(jīng)估算，23 頭野豬死亡時間為2019 年12 月20 日至2020 年2 月9 日。由于野豬生存能力很強(qiáng)，以往除村民撲殺的野豬外，當(dāng)?shù)睾苌侔l(fā)現(xiàn)死亡野豬。道真縣52 d 內(nèi)出現(xiàn)23 頭死亡野豬，這已超出了該縣野豬的自然死亡數(shù)。在@RISK 中，使用伽瑪分布Gamma模擬道真縣每天可能出現(xiàn)的死亡野豬數(shù)，x=23，t=52，迭代5 000 次，進(jìn)行100 次模擬。結(jié)果顯示，道真縣平均每天可能出現(xiàn)的死亡野豬數(shù)λ為0.44 頭（95%CI，0.28～0.64，圖4）；在95%的迭代中，道真縣每天可能出現(xiàn)的死亡野豬數(shù)≤0.60 頭（圖5）。

圖4 道真縣每天可能出現(xiàn)的死亡野豬數(shù)概率密度

圖5 道真縣每天可能出現(xiàn)的死亡野豬數(shù)單調(diào)增加頻率

2.6 防控排查

共對723 戶野豬尸體發(fā)現(xiàn)點附近的村（社區(qū)）生豬養(yǎng)殖戶展開排查，發(fā)現(xiàn)其存欄的2 265 頭生豬未有異常發(fā)病和死亡現(xiàn)象（表1）。

表1 發(fā)現(xiàn)野豬尸體的村（社區(qū)）生豬排查統(tǒng)計

3 討論

3.1 死亡原因

3.1.1 疫病原因 我國西南山區(qū)為野豬的自然分布區(qū)之一[3]。野豬大多集群活動，每群一般為4～10 頭，領(lǐng)地活動范圍一般為10 km2。此次發(fā)現(xiàn)的死亡野豬中，大多數(shù)為體質(zhì)量較輕的野豬，月齡較小，免疫力較弱，因此疫病可能是導(dǎo)致其死亡的重要因素之一。通過分析本次調(diào)查的死亡野豬空間分布特征，發(fā)現(xiàn)15 具野豬尸體集中出現(xiàn)在大磏鎮(zhèn)及其周邊一帶，靠近中心點位置。而大磏鎮(zhèn)境內(nèi)有S207 省道和G69 銀百高速穿境而過，車輛流動較大，若有不符合動物防疫要求以及未經(jīng)清洗、消毒的運(yùn)輸車輛經(jīng)過，攜帶病原傳入當(dāng)?shù)氐娘L(fēng)險較高。本次調(diào)查雖然在采集的野豬組織樣本中只檢測出圓環(huán)病病毒，但也不能排除感染非洲豬瘟病毒等其他病原導(dǎo)致其死亡的可能。比如，貴州省境內(nèi)的野豬病料中曾檢測出豬瘟病毒陽性[5]和豬繁殖與呼吸綜合征病毒陽性[2]。當(dāng)然此次野豬死亡基本可以排除由周邊家畜疫病引起的可能。

3.1.2 中毒、天氣等其他原因 當(dāng)?shù)卮迕癯Ｄ暧性诙菊T捕野豬食用的習(xí)慣，在部分發(fā)現(xiàn)野豬尸體的山地附近，現(xiàn)場有套索和野豬掙扎翻滾的痕跡，因此不排除部分流竄至此的野豬因當(dāng)?shù)卮迕裣绿紫滤帪E捕致死的可能（1 月下旬至2 月中旬期間受全國新冠肺炎疫情影響，當(dāng)?shù)厝藛T不允許外出，且村民對野豬帶毒也存恐懼，故不敢外出收獲誘捕的野豬）。根據(jù)氣象局發(fā)布的數(shù)據(jù)，道真縣2019 年12月18—28 日期間氣溫驟降10 ℃左右，因此也不排除由于寒冷刺激導(dǎo)致部分野豬死亡的可能。

3.2 傳播風(fēng)險

雖然通過排查當(dāng)?shù)氐纳i養(yǎng)殖戶暫未發(fā)現(xiàn)異常情況，但考慮到道真縣當(dāng)?shù)刈匀画h(huán)境、居民生活習(xí)慣、野豬活動等因素，因此認(rèn)為存在患病、死亡野豬在當(dāng)?shù)貍鞑ヒ卟〉目赡苄?。野豬常侵入農(nóng)田盜食和毀壞作物，在沒有河流等天然屏障，林地與田間沒有阻隔設(shè)施情況下，患病野豬覓食移動可能將疫病傳入林區(qū)周邊農(nóng)戶；當(dāng)?shù)卮迕裾T捕野豬，私宰交易，食用野味的現(xiàn)象依然存在，一旦發(fā)生野豬疫情，就有通過人員、肉制品、運(yùn)輸工具等多環(huán)節(jié)、渠道攜帶病原進(jìn)入村寨、市場和餐飲行業(yè)的可能；野豬死亡后若不能被及時發(fā)現(xiàn)，其他野生動物接觸尸體后四處活動可能造成疫病間接傳播；道真縣境內(nèi)四大河流的支流眾多，河長大于5 km 的河流有45 條，且土壤面積占全縣土地總面積93.84%[6]，野生動物接觸尸體后到山溪河流處飲水，以及春季多雨且表土解凍，土質(zhì)松動，尸水易滲漏并通過地表進(jìn)入地下水系，污染水源，傳播疫??；同時尸體腐臭引發(fā)眾多的蚊蠅、蛆蟲，部分豬病病毒可感染蜱并存在于血液中[3]，部分蚊蟲可機(jī)械攜帶病原[7]，造成蟲媒間接傳播（生物性傳播和機(jī)械性傳播）病原。

3.3 控制措施

繼續(xù)組織專人定期（1 次/10 d）在林區(qū)進(jìn)行排查，尤其加強(qiáng)公路沿線一帶的林區(qū)排查，及時發(fā)現(xiàn)死亡野豬尸體并進(jìn)行無害化處理，在車流量較大的跨省公路兩側(cè)增加車輛消毒點，同時在山區(qū)林地與農(nóng)田生產(chǎn)區(qū)之間增設(shè)人工隔離柵欄，柵欄及四周定期用火堿消毒，同時加大力度管制當(dāng)?shù)貫E殺亂捕野生動物行為。

4 局限性

本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)的死亡野豬尸體大多腐敗程度較高，無法進(jìn)行病理組織觀察，只采集了1 份組織樣品進(jìn)行實驗室病原檢測，導(dǎo)致無法確定野豬死亡的真正病因，也無法確定野豬是否由地村民下藥下套誘捕死亡或天氣變化等其他因素引起的死亡。本次調(diào)查為避免漏掉由患病因素導(dǎo)致死亡的被誘捕野豬，故將所有排查發(fā)現(xiàn)的死亡野豬全部納入本次調(diào)查范圍，這可能對平均每天出現(xiàn)的野豬死亡數(shù)估計值產(chǎn)生影響。

5 結(jié)論

調(diào)查發(fā)現(xiàn)：在貴州省道真縣境內(nèi)的國家級大沙河自然保護(hù)區(qū)和國有林區(qū)發(fā)現(xiàn)的23 具野豬尸體中，體質(zhì)量較小野豬居多；發(fā)現(xiàn)地點有較為明顯的聚集性，主要集中在大磏鎮(zhèn)和三橋鎮(zhèn)交界一帶。分析推測，野豬死亡原因很有可能是由境內(nèi)公路來往的生豬運(yùn)輸車輛及廢棄物傳入疫病導(dǎo)致的，但也不能排除人為下藥中毒、天氣變化等其他因素的可能性。建議加強(qiáng)公路沿線一帶的林區(qū)排查，加大跨省公路車輛消毒力度，盡力降低野豬死亡事件帶來的潛在風(fēng)險。