山東省首起野生天鵝H5N8 高致病性禽流感疫情的緊急調(diào)查及處置

劉硯涵，呂桂霞，蔣康富，崔 帥，王安東，高明堂，劉芳美，黨安坤，陳 峰，蘭鄒然

（1.山東省動物疫病預(yù)防與控制中心，山東濟南 250100；2.東營市現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，山東東營 257000；3.山東黃河三角洲國家級自然保護區(qū)管理委員會，山東東營 257091；4.墾利區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，山東東營 257500）

1996 年我國首次從廣東省的鵝中分離出H5N1 亞型高致病性禽流感病毒株（A/goose/Guangdong/1/1996），此后H5 亞型高致病性禽流感病毒就表現(xiàn)出十分復(fù)雜的流行趨勢，對我國家禽養(yǎng)殖業(yè)及公眾健康帶來十分嚴(yán)重的經(jīng)濟損失和影響[1]。H5N8 亞型高致病性禽流感最開始從2014年初，在亞洲和歐洲一些國家的野鳥和家禽中被檢測到，緊接著在北美的野鳥和家禽中也相繼檢測到該病毒[2]。我國首次檢測到H5N8 亞型高致病性禽流感病毒（A/duck/Jiangsu/k1203/2010）是在2010年從江蘇省鴨中分離到的[3]。2016 年以來，歐洲、中東以及非洲等地暴發(fā)了多起H5N8 亞型禽流感疫情，嚴(yán)重影響到遷徙至我國的野鳥。截止到2020年底，我國已在野鳥和家禽中多次檢測到H5N8 亞型高致病性禽流感病毒[4-5]。

2021 年1 月 13 日，山東省東營市現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展中心（以下簡稱“市畜牧中心”）接到報告，位于東營市的黃河三角洲自然保護區(qū)大汶流管理站1 月12 日在冰面上發(fā)現(xiàn)12 只死亡野生天鵝。市畜牧中心隨即安排獸醫(yī)技術(shù)人員對送檢的2 只死亡天鵝進行了剖檢診斷，并無菌采集死亡天鵝的喉頭、氣管及肺臟樣品送市畜牧中心實驗室檢測；1 月14日經(jīng)熒光RT-PCR 檢測為通用型禽流感病毒核酸強陽性，診斷為高致病性禽流感可疑病例；現(xiàn)場調(diào)查專家組采集相關(guān)樣品及2 只死亡天鵝送山東省動物疫病預(yù)防與控制中心（以下簡稱“省疫控中心”）復(fù)檢；1 日15 日，省疫控中心確定為H5N8 亞型高致病性禽流感疑似病例；1 月19 日，經(jīng)哈爾濱獸醫(yī)研究所國家禽流感參考實驗室進行病毒分離鑒定，確診為H5N8 亞型高致病性禽流感疫情；1 月19 日，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公布了該起野生天鵝H5N8 亞型高致病性禽流感疫情。山東省畜牧獸醫(yī)局在接到東營市的疫情報告后，立即安排省級專家組前往疫點進行緊急流行病學(xué)調(diào)查，分析疫情可能的來源并指導(dǎo)疫情處置工作。

1 病例定義

1.1 臨床可疑病例

2021 年1 月12 日以來，出現(xiàn)扭脖子等神經(jīng)癥狀或突然死亡等臨床癥狀的病例。

1.2 疑似病例

經(jīng)省疫控中心檢測為H5N8 亞型禽流感病毒核酸強陽性的可疑病例。

1.3 確診病例

經(jīng)國家禽流感參考實驗室確診為H5N8 亞型高致病性禽流感的疑似病例。

2 調(diào)查方式

2.1 現(xiàn)場勘查

采用現(xiàn)場勘查的方式，對該自然保護區(qū)地理位置、棲息野禽種類及數(shù)量、飼養(yǎng)管理模式、免疫情況以及保護區(qū)內(nèi)人員流動情況等進行核查；通過與政府部門及疫病控制機構(gòu)的獸醫(yī)專業(yè)人員座談，了解疫點3 km 范圍內(nèi)畜禽養(yǎng)殖場戶以及周邊畜禽交易市場、候鳥或野鳥活動等相關(guān)情況。

2.2 臨床觀察及剖檢

現(xiàn)場觀察管理站內(nèi)救助的野生疣鼻天鵝的臨床表現(xiàn)，并對死亡天鵝進行剖檢，觀察其病理變化。

2.3 樣品采集

2021 年1 月12 日，采集保護區(qū)內(nèi)3 只死亡天鵝的氣管、肺臟和肝臟等組織樣品以及咽喉/泄殖腔雙拭子樣品共計12 份，包括2 只死亡天鵝，送至省疫控中心。

2.4 實驗室檢測

所有采集的死亡天鵝組織及拭子樣品，首先經(jīng)市畜牧中心實驗室采用熒光RT-PCR 方法進行通用型禽流感病毒核酸檢測，陽性樣品再送省疫控中心實驗室復(fù)檢，同時送哈爾濱獸醫(yī)研究所國家禽流感參考實驗室確診。發(fā)病期間采集的血清樣品，送省疫控心實驗室進行抗體檢測。

2.5 數(shù)據(jù)分析

使用Excel 軟件，對調(diào)查收集的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

3 調(diào)查結(jié)果

3.1 疫點概況

3.1.1 地理位置 山東黃河三角洲國家級自然保護區(qū)大汶流管理站位于東營市墾利區(qū)黃河口鎮(zhèn)東北，與周邊村莊的距離超過10 km。疫情發(fā)生后，經(jīng)黃河三角洲自然保護區(qū)疫點管控和處置評估專家組評估后，決定將山東黃河三角洲自然保護區(qū)大汶流管理站繁育舍作為疫點（N119.157 42°、E37.742 76°）。疫點地理位置見圖1。

圖1 疫點地理位置

3.1.2 飼養(yǎng)情況 越冬鳥類調(diào)查結(jié)果顯示：自然保護區(qū)內(nèi)生活鳥類36 種共82 351 只，其中大天鵝437 只、小天鵝25 只、疣鼻天鵝303 只；大汶流管理站濕地恢復(fù)區(qū)鳥類21 種共12 573 只，其中大天鵝268 只、小天鵝20 只、疣鼻天鵝178 只；疣鼻天鵝死亡區(qū)域鳥類6 種共459 只，其中疣鼻天鵝50 只。2021 年1 月5 日共有765 只天鵝遷徙到黃河三角洲國家級自然保護區(qū)大汶流管理站，并分散成零散小群聚集生活，以食水草為生，自然生長。繁育舍內(nèi)飼養(yǎng)著國家一級和二級保護鳥類，包括8只丹頂鶴、6 只疣鼻天鵝和235 只大雁。

3.1.3 免疫情況 繁育舍內(nèi)飼養(yǎng)或救助的鳥類都會在每年春秋兩季各免疫1 次重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1 Re-11 株+Re-12 株，H7N9 H7-Re2 株）。

3.1.4 調(diào)運情況 自然保護區(qū)內(nèi)的珍稀禽類均為遷徙越冬至此，未發(fā)生購入或出售現(xiàn)象。保護區(qū)內(nèi)未飼養(yǎng)家禽。

3.2 疫情經(jīng)過

3.2.1 發(fā)病過程 2021 年1 月12 日下午，山東黃河三角洲自然保護區(qū)大汶流管理站工作人員在日常巡邏時發(fā)現(xiàn)冰面上出現(xiàn)死亡天鵝，并隨即報告管理站負(fù)責(zé)人。經(jīng)統(tǒng)計，現(xiàn)場共發(fā)現(xiàn)12 只死亡疣鼻天鵝。1 月14 日，市畜牧中心專家組通過現(xiàn)場勘查，又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)19 只死亡疣鼻天鵝。專家組要求立即對繁育舍內(nèi)飼養(yǎng)的野生珍禽全部緊急免疫接種禽流感疫苗，實行封閉管理，對病死天鵝全部進行無害化處理，對污染場所進行徹底消毒。1 月16 日，撲殺與發(fā)病天鵝密切接觸的4 只天鵝并進行無害化處理。截至1 月19 日農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布疫情時，共有35只疣鼻天鵝死亡。死亡病例數(shù)時間分布見圖2。

圖2 疫情中死亡病例數(shù)時間分布

3.2.2 臨床表現(xiàn) 此次疫情的疣鼻天鵝多為突然死亡，死亡天鵝外觀未呈現(xiàn)明顯臨床癥狀，個別未死亡天鵝出現(xiàn)扭脖子的神經(jīng)癥狀。

3.2.3 剖檢癥狀 救助站剖檢3只死亡疣鼻天鵝，發(fā)現(xiàn)其喉頭、氣管、心臟、肺臟、肝臟均無明顯變化，其中1 只天鵝腺胃有輕微出血點；省疫控中心剖檢2 只死亡天鵝，發(fā)現(xiàn)腺胃有出血點，氣管環(huán)有輕微出血點，胰腺有明顯肉樣壞死，其他器官未見明顯變化。

3.3 實驗室診斷及疫情發(fā)布

3.3.1 疑似病例診斷 2021 年1 月13—14 日，市畜牧中心綜合死亡天鵝剖檢結(jié)果和實驗室樣品熒光RT-PCR 檢測通用型禽流感病毒核酸強陽性結(jié)果，判定為高致病性禽流感可疑病例。1 月15 日省疫控中心復(fù)檢為 H5N8 亞型高致病性禽流感病毒核酸陽性，判定為高致病性禽流感疑似疫情。

3.3.2 確診病例診斷 1 月19 日，經(jīng)哈爾濱獸醫(yī)研究所國家禽流感參考實驗室確診，確定為 H5N8亞型高致病性禽流感。分離毒株的HA 核苷酸和氨基酸序列與山西天鵝分離病毒株的同源性分別為99.60%和99.80%，與Re-11 株的同源性分別為91.80%和94.00%。網(wǎng)上序列比對結(jié)果顯示，已公布的序列和2017 年埃及分離毒株序列同源性為97.83%。NA 核苷酸序列與山西省天鵝分離病毒的同源性為99.50%，氨基酸同源性為99.40%，和日本飼養(yǎng)鵝群中分離的H5N8 亞型禽流感病毒（domesitic Goose/OMSK/1521-1/2020）核苷酸同源性為99.06%。

3.3.3 疫情發(fā)布 2021 年1 月19 日，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部官網(wǎng)向社會公布了該起疫情[6]。

4 疫源分析

每年春季和秋季，大批候鳥會進行有規(guī)律的遷徙，固定地往返于繁殖區(qū)和越冬區(qū)。而候鳥由于沒法注射禽流感疫苗，體內(nèi)未能建立起免疫保護屏障，因此經(jīng)常感染流感病毒。2016 年以來，印度、巴基斯坦、韓國、俄羅斯等國家均暴發(fā)多起家禽及野生鳥類的高致病性禽流感疫情。由于這些國家均位于全球候鳥遷徙路線上，而候鳥的遷徙路線一般相對固定，因此推測該起疫情由于遷徙野鳥帶毒傳入的可能性最大。H5N8 亞型禽流感病毒可以很好地適應(yīng)某些野生水禽，然后伴隨著這些候鳥的全球遷徙跨洲傳播[7]。研究[8]表明，H5N8 亞型禽流感疫情通常出現(xiàn)在每年的11 月至次年2 月，這與野生鳥類的遷徙時間一致，說明H5N8 亞型禽流感病毒在世界范圍內(nèi)的傳播與野生鳥類遷徙密切相關(guān)。此外，疫情暴發(fā)期間，黃河三角洲國家級自然保護區(qū)正處于冬季觀光淡季，氣候寒冷，游客稀少，因此由人員帶入的可能性極低。同時，由于疫點、疫區(qū)和受威脅區(qū)周邊3 km 范圍內(nèi)沒有任何家禽養(yǎng)殖場戶，也沒有活禽交易市場，因此也不存在家禽感染風(fēng)險，疫情擴散風(fēng)險極低。

5 疫情處置

劃定大汶流管理站野生鳥類繁育舍（又名救助站）為疫點（E119.157 42°、N37.742 76°），以野生鳥類救助站為中心，周圍3 km 范圍為疫區(qū)（北至N37.776 72°、南至N37.708 80°，西至E119.123 46°、東至E119.191 38°）；以疫區(qū)邊緣向外延伸5 km 為受威脅區(qū)（北至N37.833 56°、南至N37.651 96°，西至E119.066 62°、東至E119.248 22°）。

1 月16 日，繁育舍內(nèi)圈養(yǎng)的249 只珍禽全部緊急免疫高致病性禽流感疫苗。1 月18 日，疫點內(nèi)（繁育舍）采集的31 份病原學(xué)樣品均為通用型禽流感病毒核酸陰性，6 份血清學(xué)樣品的H5 亞型抗體合格率為83.33%，超過國家要求水平。1 月19 日下午，東營市墾利區(qū)人民政府按照《高致病性禽流感疫情應(yīng)急實施方案》（2020 年版），啟動Ⅳ級疫情響應(yīng)，頒布封鎖令。規(guī)定疫情封鎖期間，疫點、疫區(qū)里的觀鳥通道禁止任何人員、車輛等的進出；設(shè)置多處消毒點和警示標(biāo)識，對進出人員、車輛、物品等嚴(yán)格進行消毒，禁止載畜載禽等易感動物的車輛進出；在疫區(qū)、受威脅區(qū)內(nèi)禁止交易禽類及相關(guān)產(chǎn)品；繼續(xù)加強疫點的管制和消毒工作，嚴(yán)防疫點內(nèi)珍禽流出；加強對疫區(qū)和受威脅區(qū)內(nèi)野生禽類的巡查，發(fā)現(xiàn)異常情況立即按照國家規(guī)定進行上報及處置；依法做好疫區(qū)內(nèi)封鎖、隔離、管控等安全措施和社會治安工作，依法維護景區(qū)內(nèi)的管理制度及秩序。

6 結(jié)語

此次疫情是山東省內(nèi)暴發(fā)的首起野生疣鼻天鵝H5N8 亞型高致病性禽流感疫情。疫情出現(xiàn)后，當(dāng)?shù)卣跋嚓P(guān)機構(gòu)迅速果斷采取封鎖、消毒、撲殺、緊急免疫等應(yīng)急處置措施，以及科學(xué)合理的排查和評估，使疫情得到有效控制，未出現(xiàn)波及性擴散。結(jié)合現(xiàn)場勘察和風(fēng)險評估結(jié)果，推測這次疫情由帶毒的遷徙野鳥傳入引起的可能性較大。該起疫情警示，在野鳥遷徙季節(jié)，要切實加強野鳥的禽流感監(jiān)測和強制免疫工作。