王慧姣, 李 峰, 張文蕾, 馬帥兵, 王領(lǐng)賀, 趙偉芳, 白潤(rùn)成, 王玉璽, 王 欣, 盧榮華*
(1.河南師范大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院, 河南新鄉(xiāng)453007; 2. 三門(mén)峽市陜州區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局, 河南三門(mén)峽472100)
隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展和海洋資源的衰退, 魚(yú)粉作為優(yōu)質(zhì)的動(dòng)物性蛋白源已不能充分滿(mǎn)足蛋白質(zhì)飼料持續(xù)增長(zhǎng)的需求[1]。昆蟲(chóng)體內(nèi)的粗蛋白質(zhì)含量高、纖維少、易消化,微量元素豐富,必需氨基酸含量接近于魚(yú)粉[1,2]。 其中黑水虻幼蟲(chóng)是一種營(yíng)腐生型的昆蟲(chóng),能利用有機(jī)廢物,合成自身的蛋白質(zhì),常作為重要的蛋白質(zhì)來(lái)源[3,4]。 研究顯示,飼喂鮮雞糞的黑水虻幼蟲(chóng)其蛋白質(zhì)含量為42.46%, 脂肪含量為27.82%,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高[5]。 黑水虻可以降解豆粕、棉籽粕和菜籽粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子[6],能提供大量的不飽和脂肪酸其養(yǎng)殖周期短、飼養(yǎng)簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)效益高,糞便轉(zhuǎn)化率也較高, 能夠降解糞便, 減少臭味和蚊蠅滋生[7],這對(duì)于可持續(xù)發(fā)展和保護(hù)環(huán)境具有重大意義,所以黑水虻也被稱(chēng)為“環(huán)保昆蟲(chóng)”。 我國(guó)每年的中藥殘?jiān)a(chǎn)量很大,利用黑水虻處理中藥殘?jiān)?,不僅可以帶來(lái)可觀的經(jīng)濟(jì)效益,還可降低藥渣對(duì)環(huán)境的污染。目前黑水虻對(duì)不同有機(jī)廢物的利用和轉(zhuǎn)化效果的研究已引起不少科學(xué)工作者的重視, 但比較黑水虻對(duì)不同有機(jī)廢物利用效果的研究還很匱乏, 所以本試驗(yàn)通過(guò)飼喂中草藥渣和花生餅, 分析黑水虻幼蟲(chóng)鮮重比和料重比、最佳投喂量、快速生長(zhǎng)期和機(jī)體營(yíng)養(yǎng)成分的差異,為節(jié)約資源、保護(hù)環(huán)境、大規(guī)模養(yǎng)殖黑水虻及作為飼料蛋白來(lái)源提供了理論依據(jù)。
黑水虻幼蟲(chóng)是由西北農(nóng)林科技大學(xué)安康水產(chǎn)試驗(yàn)站饋贈(zèng), 幼蟲(chóng)飼養(yǎng)在25℃的溫棚內(nèi), 待蟲(chóng)體稍發(fā)黑、行動(dòng)緩慢不再進(jìn)食(預(yù)蛹期)時(shí)將幼蟲(chóng)挑出,轉(zhuǎn)移到紗帳內(nèi),使其處于黑暗環(huán)境中等待羽化,羽化為成蟲(chóng)后噴灑蜂蜜水為其補(bǔ)充能量, 并使用發(fā)酵腐敗物質(zhì)誘導(dǎo)其產(chǎn)卵。 待有卵產(chǎn)出且數(shù)量穩(wěn)定時(shí)每日定時(shí)進(jìn)行收集,并稱(chēng)量分組。 將分組后的蟲(chóng)卵放置在罩有紗網(wǎng)的長(zhǎng)方形塑料盒上, 塑料盒中預(yù)放500 g孵化基質(zhì)。 待其孵化出肉眼可見(jiàn)的幼蟲(chóng)時(shí),將其分離用于試驗(yàn)備用。 花生餅購(gòu)自河南師范大學(xué)附近的菜市場(chǎng),中草藥渣由河南師范大學(xué)校醫(yī)院提供。
1.2.1 試驗(yàn)分組
選取同一天收集的黑水虻的蟲(chóng)卵, 隨機(jī)將其分為30份,每份0.5 g放在罩有紗網(wǎng)的長(zhǎng)方形塑料盒上,盒中放置濕度適中的麩皮作為幼蟲(chóng)的開(kāi)口飼料。 待幼蟲(chóng)3日齡時(shí),轉(zhuǎn)移至養(yǎng)殖盒內(nèi),分別投喂中草藥渣和花生餅兩種有機(jī)廢物,每種有機(jī)物分別設(shè)置5個(gè)不同梯度的投喂組,每個(gè)投喂組均設(shè)置3個(gè)平行。 孵化出的幼蟲(chóng)達(dá)到三日齡后轉(zhuǎn)移至25℃左右溫棚中,每天記錄投喂花生餅或中草藥渣的重量以及幼蟲(chóng)的攝食情況,大批量出現(xiàn)預(yù)蛹期幼蟲(chóng)后,停止喂食24 h,把幼蟲(chóng)從基質(zhì)中分離并稱(chēng)重。
1.2.2 測(cè)量中草藥渣和花生餅的最佳投喂量
記錄每天黑水虻幼蟲(chóng)的攝食情況, 稱(chēng)量幼蟲(chóng)的體重并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)算料重比(料重比=投喂量/幼蟲(chóng)鮮重),從而分析出兩種有機(jī)質(zhì)的最佳投喂量。
1.2.3 繪制黑水虻幼蟲(chóng)生長(zhǎng)曲線(xiàn)
選取備用黑水虻幼蟲(chóng)進(jìn)行孵化,待其生長(zhǎng)到3日齡后轉(zhuǎn)移至25℃溫棚中, 根據(jù)最佳投喂量分別投喂花生餅和中草藥渣。每個(gè)投喂組均設(shè)置三個(gè)平行,每個(gè)平行組的黑水虻幼蟲(chóng)數(shù)量不少于200只。 試驗(yàn)開(kāi)始后,每2 d隨機(jī)抽取30只幼蟲(chóng)進(jìn)行稱(chēng)量,重復(fù)抽取三次取平均值。 飼喂過(guò)程中出現(xiàn)預(yù)蛹期幼蟲(chóng)時(shí)即可停止稱(chēng)重,并記錄時(shí)間,進(jìn)而確定幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)周期并繪制出黑水虻幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)曲線(xiàn)。
1.2.4 幼蟲(chóng)營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)
各個(gè)試驗(yàn)組中挑選1 kg干凈的新鮮幼蟲(chóng), 一部分在105℃下常壓干燥,采用恒重法測(cè)定水分,其余部分全部烘干(注意要受熱均勻),放置于4℃冰箱中備用。 粗灰分用550℃灼燒法測(cè)定,粗脂肪用索氏抽提法測(cè)定,粗蛋白質(zhì)采用凱氏定氮法測(cè)定,氨基酸和脂肪酸的組成與含量分別用全自動(dòng)氨基酸分析儀和氣相色譜儀測(cè)定。
文中數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0進(jìn)行單因素方差分析。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示,當(dāng)P<0.05時(shí),認(rèn)為數(shù)據(jù)有顯著性差異。
如表1所示,每0.5 g黑水虻幼蟲(chóng)投喂中草藥渣量從1.65 kg增加到3.05 kg的過(guò)程中, 鮮蟲(chóng)的增重逐漸增加,尤其當(dāng)投喂量從2.00 kg增加到2.35 kg時(shí),鮮蟲(chóng)的增重有顯著性差異(P <0.05)。在中草藥渣投喂量由1.65 kg增加到2.35 kg時(shí),料重比逐漸減??;但當(dāng)繼續(xù)增加投喂量至2.70 kg和3.05 kg時(shí), 料重比先增大后又減小。其中投喂量小于2.35 kg時(shí),顯示飼料利用率低;投喂量大于2.35 kg時(shí),鮮蟲(chóng)增重和料重比都沒(méi)有顯著性差異 (P>0.05), 考慮增重效果和飼料效率,故最佳投喂量應(yīng)控制在2.35~3.05 kg。
如表2所示,每0.5 g黑水虻幼蟲(chóng)中投喂花生餅量從1.44 kg增加到2.69 kg時(shí),鮮蟲(chóng)增重逐漸增加,但料重比的趨勢(shì)正好相反; 當(dāng)投喂量從2.69 kg增加到3.94 kg時(shí),料重比逐漸增大,增重量由大到小。 其中投喂量小于2.69 kg時(shí),鮮蟲(chóng)增重較小,料重比較大;當(dāng)投喂量為2.69 ~3.31 kg時(shí), 鮮蟲(chóng)增重和料重比都增大,但料重比沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。 當(dāng)投喂量超過(guò)3.31 kg時(shí),幼蟲(chóng)增重開(kāi)始減少,料重比較大;故根據(jù)以上的分析結(jié)果,最佳投喂量應(yīng)控制在2.69 ~3.31 kg。
表1 中草藥渣投喂量對(duì)幼蟲(chóng)增重及料重比的影響(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
如圖1所示,用中草藥渣、花生餅飼喂的黑水虻的生長(zhǎng)情況存在不同。 中草藥渣飼喂的黑水虻,幼蟲(chóng)期為26 d,而花生餅組的為18 d,相差8 d;幼蟲(chóng)快速生長(zhǎng)期和預(yù)蛹期體重也有較大差異, 中草藥渣組和花 生 餅 組 分 別 為 第10 ~20 d、4 ~16 d;0.17 g/只、0.21 g/只。
圖1 中草藥渣和花生餅飼的喂黑水虻幼蟲(chóng)生長(zhǎng)曲線(xiàn)
如圖2所示,分析用中草藥渣、花生餅兩種有機(jī)廢物飼喂的黑水虻幼蟲(chóng)的營(yíng)養(yǎng)成分可知, 其粗蛋白和粗脂肪含量分別為33.28%、50.76%;22.61%、30.03%, 花生餅蟲(chóng)的粗蛋白和粗脂肪含量高于中草藥渣組,可能是因?yàn)榛ㄉ灡旧頎I(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,黑水虻幼蟲(chóng)本身對(duì)花生餅的利用轉(zhuǎn)化能力更好; 中草藥渣蟲(chóng)的灰分含量明顯高于花生餅組, 分別為16.83%、6.80%。
圖2 中草藥渣和花生餅飼喂黑水虻幼蟲(chóng)常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析
由表3可知,中草藥渣、花生餅這兩種有機(jī)廢物飼養(yǎng)的黑水虻幼蟲(chóng)體內(nèi)的氨基酸總量分別為28.59%、41.89%,其中花生餅蟲(chóng)的氨基酸總量明顯高于藥渣蟲(chóng); 兩種幼蟲(chóng)干粉中必需氨基酸含量分別為11.78%、18.92%。
由表4可知,由中草藥渣、花生餅喂養(yǎng)的黑水虻幼蟲(chóng)其脂肪酸種類(lèi)存在差異, 花生餅蟲(chóng)組比中草藥渣蟲(chóng)組少了辛酸、十五碳一烯酸、十七烷酸、硬脂酸、亞麻酸和花生一烯酸這幾種脂肪酸;且由中草藥渣、花生餅喂養(yǎng)的黑水虻幼蟲(chóng), 其不飽和脂肪酸與必需脂肪酸分別占總脂肪酸的33.72%、44.89%;21.99%、39.17%; 喂養(yǎng)花生餅的黑水虻幼蟲(chóng)亞油酸含量為39.17%,高于中草藥渣蟲(chóng)的(21.62%),其次為月桂酸,含量為38.25%,和中草藥渣蟲(chóng)的相當(dāng)(39.10%);由此可見(jiàn),喂養(yǎng)不同的基質(zhì)成分(中草藥渣和花生餅),會(huì)影響蟲(chóng)體中脂肪酸的含量變化。
表3 黑水虻幼蟲(chóng)粉的氨基酸含量(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
表4中草藥渣蟲(chóng)和花生餅蟲(chóng)的脂肪酸組成及含量(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)
在本試驗(yàn)中, 每0.5 g黑水虻幼蟲(chóng)投喂中草藥渣和花生餅的最佳投喂量分別為:2.35~3.05 kg、2.69 ~3.31 kg,其中中草藥渣組的最佳投喂量與劉瑜彬等[8]研究結(jié)果(每1 g幼蟲(chóng)最佳投喂量為10~13 kg)有所差異,造成差異的原因可能是黑水虻消化能力弱,以及中草藥渣成分、含水量不同等造成的;按照最佳投喂量進(jìn)行飼喂可以使黑水虻獲得足夠營(yíng)養(yǎng), 并使有機(jī)廢物得到最大利用。
本試驗(yàn)中飼喂中草藥渣和花生餅的黑水虻的幼蟲(chóng) 期 和 快 速 生 長(zhǎng) 期 分 別 為26 d、18 d;10~20 d、4~16 d;與劉瑜彬等[8]的研究結(jié)果(中藥渣養(yǎng)殖的黑水虻快速生長(zhǎng)期為第4~15 d)有些差異,造成差異的原因可能是中草藥渣成分和含水量不同,但幼蟲(chóng)的發(fā)育參考周期相似[9],為19 d~29 d左右。飼喂花生餅的黑水虻幼蟲(chóng)的干粉,其粗蛋白和粗脂肪含量都比較高,且粗蛋白含量高達(dá)50.76%,高于李峰等[10]測(cè)定的豆腐渣蟲(chóng)的粗蛋白(42.85%)含量,可能與花生餅本身的高蛋白含量(43.15%)有關(guān)[11];藥渣蟲(chóng)的粗蛋白含量為33.28%,與劉瑜彬等[8]藥渣蟲(chóng)的粗蛋白(35.1%)含量近似。中草藥渣蟲(chóng)脂肪酸的種類(lèi)較多且含量豐富,尤以月桂酸、棕櫚酸、油酸、亞油酸為主,且出現(xiàn)了十五碳一烯酸和十七烷酸。 蔡鑫華[12]利用黑水虻處理雞糞后同樣檢測(cè)出奇數(shù)脂肪酸, 脂肪酸種類(lèi)的增加使黑水虻幼蟲(chóng)的功能更強(qiáng)大,應(yīng)用范圍更廣。
綜合以上研究結(jié)果表明, 黑水虻幼蟲(chóng)能將中草藥渣和花生餅這兩種有機(jī)物轉(zhuǎn)化成自身的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)且效果較好, 中草藥渣組黑水虻的脂肪酸種類(lèi)更為豐富,花生餅蟲(chóng)蛋白含量高達(dá)50.76%。