二甲酸鉀對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能和腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響

周寰宇，江宇航，張關(guān)令，徐美余，蔡賽波，張棋麟*，林連兵*

(1.昆明理工大學(xué) 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650500；2.云南省高校飼用抗生素替代技術(shù)工程研究中心，云南 昆明 650500)

抗生素在飼料中長(zhǎng)期不規(guī)范使用，導(dǎo)致畜禽體內(nèi)出現(xiàn)細(xì)菌耐藥性等問(wèn)題，給環(huán)境和人類(lèi)健康帶來(lái)嚴(yán)重威脅。2006年歐盟已經(jīng)全面禁止抗生素在飼料中的應(yīng)用，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部近期在《獸用抗菌藥使用減量化行動(dòng)試點(diǎn)工作方案(2018-2021年)》中也明確指出，將于2020年7月1日起，全面退出抗生素在飼料端的使用，使開(kāi)發(fā)新型高效的抗菌制劑迫在眉睫。二甲酸鉀(potassium diformate，KDF)是一種有機(jī)酸鹽，分子結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，具有完全的生物降解性，作為一種酸化劑，能夠通過(guò)抑制耐酸性細(xì)菌生長(zhǎng)，起到促進(jìn)生長(zhǎng)性能的作用[1]。二甲酸鉀是歐盟于2001年批準(zhǔn)的第一個(gè)用于替代抗生素促生長(zhǎng)的綠色添加劑，且于2005年被我國(guó)正式批準(zhǔn)使用于飼料中[2]。此外，二甲酸鉀作用宿主的高度專(zhuān)一性使其在殺滅病原菌的同時(shí)，對(duì)正常菌群不會(huì)產(chǎn)生較大干擾。因此，二甲酸鉀在抗生素替代添加劑方面具有良好的應(yīng)用潛力。腸道菌群在宿主的健康與疾病中扮演了重要的角色，被稱(chēng)為宿主的第二基因組。目前，隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，檢測(cè)腸道菌群應(yīng)用于各類(lèi)疾病的研究已成為研究熱點(diǎn)，越來(lái)越多的研究證明，腸道菌群的紊亂是部分疾病的誘因[3]。例如，通過(guò)對(duì)腹瀉仔豬與健康仔豬腸道菌群進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)腹瀉仔豬的腸道菌群物種豐度相較于健康仔豬發(fā)生了顯著變化，導(dǎo)致了功能發(fā)生紊亂[4]。特別是目前抗生素濫用現(xiàn)象的愈發(fā)嚴(yán)重，動(dòng)物產(chǎn)生疾病時(shí)會(huì)大量服用抗生素藥物，這不僅嚴(yán)重破壞了動(dòng)物的腸道菌群平衡，還致使諸多耐藥性細(xì)菌產(chǎn)生。研究表明，有機(jī)酸和益生菌等潛在的替抗產(chǎn)品對(duì)于動(dòng)物的生長(zhǎng)、改善腸道菌群，構(gòu)建腸道菌群健康等方面具有良好的促進(jìn)功能[5]。然而，迄今為止，人們對(duì)二甲酸鉀如何影響白羽肉雞腸道菌群的認(rèn)識(shí)仍較為有限。白羽肉雞養(yǎng)殖自1979年就已開(kāi)始啟動(dòng)，因其生長(zhǎng)速度快、肌肉蛋白質(zhì)含量高等特點(diǎn)，在我國(guó)肉雞類(lèi)供應(yīng)中占有重要地位。近年來(lái)，在“飼料禁抗”的背景下，肉雞產(chǎn)業(yè)因疾病造成經(jīng)濟(jì)損失的風(fēng)險(xiǎn)在加大，替代抗生素的添加劑越來(lái)越重要[6]。因此，本研究選擇白羽肉雞作為動(dòng)物模型，通過(guò)在飼糧中添加替代抗生素產(chǎn)品二甲酸鉀與抗生素產(chǎn)品金霉素制劑進(jìn)行比較，評(píng)估二甲酸鉀與金霉素對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能和腸道菌群的影響，從而證實(shí)二甲酸鉀的安全性及替代抗生素應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖的應(yīng)用潛力。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料 3日齡健康白羽肉雞苗、無(wú)添加肉雞基礎(chǔ)日糧(見(jiàn)表1)[7]，均由昆明三正生物科技(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)提供。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.1.2 主要試劑 飼用金霉素、二甲酸鉀制劑，均由昆明三正生物科技(集團(tuán))有限公司生產(chǎn)提供，TIANamp Stool DNA Kit(天根生物技術(shù)公司，中國(guó))試劑盒，AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒。

1.1.3 主要儀器與設(shè)備 全自動(dòng)高壓蒸汽滅菌器(LDZF-75KB-II，上海申安)；超凈工作臺(tái)(FCH，沈陽(yáng)龍騰電子有限公司)；電子天平(AS-102002A，天津)；超純水器(JIDI-UP basic，MilliPore)；離心機(jī)(LX-100，麒麟醫(yī)用)；超低溫冰箱(BC-203HCN，日本三洋電器股份有限公司)；真空采血管、飼料混勻器、鑷子、手術(shù)剪等。

1.2 方法

1.2.1 飼料配制與分組 供試添加劑分成6個(gè)組方，組方①：無(wú)添加肉雞基礎(chǔ)日糧(組名為CHE)；組方②：基礎(chǔ)日糧中按50 mg/mL添加飼用金霉素制劑(組名為CKB)；組方③：基礎(chǔ)日糧中按0.1%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))添加二甲酸鉀制劑(組名為KDF6)；組方④：基礎(chǔ)日糧中按0.3%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))添加二甲酸鉀制劑(組名為KDF7)；組方⑤：基礎(chǔ)日糧中按0.5%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))添加二甲酸鉀制劑(組名為KDF8)；組方⑥：基礎(chǔ)日糧中按0.7%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))添加二甲酸鉀制劑(組名為KDF9)，試劑濃度均為昆明三正生物科技(集團(tuán))有限公司產(chǎn)品指導(dǎo)濃度；所有日糧均按等氮等能原則配置，飼喂日糧分為0～14 d和15～28 d兩個(gè)批次，營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)滿(mǎn)足NRC(1998)。以上飼料組方制劑配制好后保存在陰涼干燥處備用。將378只3日齡健康白羽肉雞，隨機(jī)分為6個(gè)組，每組63只，分組詳情如表2所示，每組共設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)21只白羽肉雞。其中CHE為空白對(duì)照組，其余為處理組。試驗(yàn)周期為28 d，以《GB/T 19664-2005》為飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，分籠飼養(yǎng)，常規(guī)免疫，自由采食和飲水。

1.2.2 生長(zhǎng)性能測(cè)試 試驗(yàn)期間每日記錄采食量，分別于第1、7、14、21、28天早上8:00空腹稱(chēng)重，計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。ADFI(g/d)=總耗料量/試驗(yàn)天數(shù)，ADG(g/d)=總增重/試驗(yàn)天數(shù)，F(xiàn)/G=ADFI/ADG，其中每個(gè)分組選取5只健康白羽肉雞進(jìn)行稱(chēng)重，每只獨(dú)立重復(fù)3次稱(chēng)重，并以促進(jìn)生長(zhǎng)最佳濃度作為后續(xù)試驗(yàn)濃度。

1.2.3 腸道菌群測(cè)序及分析 試驗(yàn)第28天時(shí)，取空白對(duì)照和金霉素制劑以及促生長(zhǎng)最佳二甲酸鉀組，每組取5只健康白羽肉雞，稱(chēng)肉雞活重，用乙醚麻醉法處死并解剖。將雞盲腸無(wú)菌結(jié)扎后保存于-20 ℃冰箱，用于腸道微生物多樣性檢測(cè)。根據(jù)最優(yōu)試驗(yàn)結(jié)果評(píng)估，選取CHE、CKB、FDK7共3組進(jìn)行腸道微生物多樣性測(cè)序分析，每組測(cè)3個(gè)生物學(xué)重復(fù)樣品。總DNA的抽提使用TIANamp Stool DNA Kit試劑盒，嚴(yán)格按照其說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。提取得到的總DNA，以通用引物338F(5′-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′)和806R(5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′)擴(kuò)增各樣品總DNA上的16S rRNA基因的V3～V4區(qū)序列。PCR反應(yīng)體系及條件參照文獻(xiàn)[8]。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后，使用AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒將目標(biāo)片段切膠回收。利用QuantiFluorTM-ST藍(lán)色熒光定量系統(tǒng)對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)定量，并根據(jù)結(jié)果將各樣品等量混合，而后HiSeq文庫(kù)進(jìn)行高通量測(cè)序，樣品測(cè)序和分析由百邁客生物科技有限公司三代測(cè)序平臺(tái)完成。

1.2.4 測(cè)序數(shù)據(jù)處理與分析 使用FLASH Version 1.2.7軟件，通過(guò)overlap對(duì)每個(gè)樣品的reads進(jìn)行拼接，得到的拼接序列即原始Tags數(shù)據(jù)；然后使用Trimmomatic Version 0.33軟件，對(duì)拼接得到的原始Tags數(shù)據(jù)進(jìn)行過(guò)濾，得到高質(zhì)量的Tags數(shù)據(jù)；最后使用UCHIME Version 4.2軟件，鑒定并去除嵌合體序列，得到最終有效數(shù)據(jù)。得到的有效數(shù)據(jù)基于百邁客云平臺(tái)微生物多樣性分析樣本的alpha多樣性和Beta多樣性。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所測(cè)得數(shù)據(jù)均包含3次生物學(xué)重復(fù)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(SD)的方式呈現(xiàn)。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010進(jìn)行初步整理分析，應(yīng)用IBM SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，Alpha多樣性指數(shù)和Beta多樣性指數(shù)的組間差異分析選用t檢驗(yàn)，顯著差異水平P<0.05。采用one-way ANOVA的單因素方差分析和最小顯著差異法(least-significant difference，LSD)測(cè)驗(yàn)不同處理的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 二甲酸鉀對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

分別按照6個(gè)組方飼喂白羽肉雞，在28 d的試驗(yàn)周期內(nèi)，記錄并計(jì)算出每組的料重比(F/G)來(lái)評(píng)估每組的生長(zhǎng)狀況。飼喂不同劑量二甲酸鉀，發(fā)現(xiàn)隨著濃度的增加料重比出現(xiàn)先下降后上升的趨勢(shì)，在添加0.3%(KDF9)時(shí)白羽肉雞的料重比最高，而添加0.7%(KDF7)料重比最低，但均與空白組(CHE)相比存在顯著差異(P<0.05)(圖1)。結(jié)果表明，不同劑量的二甲酸鉀與金霉素添加劑量對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能均有提升效果，KDF7的影響效果最好。

圖1 同處理之間的生長(zhǎng)性能比較

2.2 測(cè)序數(shù)據(jù)

將促進(jìn)生長(zhǎng)的最佳二甲酸鉀濃度和金霉素以及空白對(duì)照，3組實(shí)驗(yàn)的9個(gè)白羽肉雞腸道菌群樣本進(jìn)行構(gòu)建文庫(kù)測(cè)序。共得到713 630條原始序列，質(zhì)量控制后，得到710 426高質(zhì)量序列，質(zhì)控有效率達(dá)99.55%，堿基平均長(zhǎng)度為417 bp。單獨(dú)樣品的測(cè)序結(jié)果如表2所示。同時(shí)，有效率為84.05%。

表2 不同白羽雞腸道菌群樣品16S rDNA測(cè)序基本信息

2.3 腸道菌群多樣性結(jié)果分析

在獲得OTU豐度矩陣后，對(duì)三組白羽肉雞腸道菌群進(jìn)行Alpha與Beta多樣性分析，使用Chao1和Ace指數(shù)衡量物種豐度，使用Shannon和Simpson指數(shù)用于衡量物種多樣性(表3)。分析CKB、KDF組與空白組CHE之間的ACE、Chao1、Shannon、Simpson等alpha多樣性指數(shù)，發(fā)現(xiàn)CKB組和KDF組的Shannon指數(shù)均低于空白組，同時(shí)KDF組的Shannon指數(shù)低于CKB組，均存在顯著差異(P<0.05)；CKB組和KDF組的Simpson指數(shù)均高于空白組，KDF組的Simpson指數(shù)與空白組相比存在顯著差異(P<0.05)，而CKB組的Simpson指數(shù)與空白組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)；CKB組和KDF組的Chao1指數(shù)與空白組對(duì)比無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表3 多樣性指數(shù)統(tǒng)計(jì)

在相同物種豐度的情況下，Shannon指數(shù)值越大，Simpson指數(shù)值越小，說(shuō)明樣品的物種多樣性越高，Chao1值越大表示物種越多，Good′s Coverage用于計(jì)算覆蓋率，值越大表示覆蓋越好。說(shuō)明金霉素和二甲酸鉀都可以顯著得提高白羽肉雞的腸道菌群物種多樣性，同時(shí)二甲酸鉀的在提高腸道菌群物種多樣性作用上比抗生素效果更好；對(duì)比KDF與CKB組之間的α多樣性指數(shù)發(fā)現(xiàn)，KDF組的Simpson、ACE、Chao1與CKB組不存在顯著差異(P>0.05)，說(shuō)明二甲酸鉀與抗生素對(duì)于白羽肉雞腸道菌群結(jié)構(gòu)影響效果相似。Coverage指數(shù)均大于0.999，說(shuō)明測(cè)序結(jié)果已基本覆蓋測(cè)序樣本的多樣性。

在本研究中，分別使用Weighted Unifrac算法與Bray-Curtis距離進(jìn)行PCoA分析及NMDS統(tǒng)計(jì)，如圖2A與圖2B所示，PC1占總方差的65.63%，PC2占總方差的34.37%，空白組與金霉素組和二甲酸鉀組樣品距離明顯分開(kāi)，說(shuō)明空白組與金霉素組和二甲酸鉀組的樣品菌群結(jié)構(gòu)主成分具有顯著差異。在無(wú)度量多維標(biāo)定法統(tǒng)計(jì)(NMDS)中，Stress(壓力)=0.000，小于0.2，說(shuō)明分組及抽樣方法可靠。

圖2 三組樣本腸道菌群的PCoA(A)和NMDS(B)

2.4 腸道菌群組成及優(yōu)勢(shì)菌群相對(duì)豐度分析

對(duì)白羽肉雞腸道菌群測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行注釋后，得到門(mén)、屬等分類(lèi)單元信息。從表4看出，白羽肉雞日糧中添加二甲酸鉀28 d后，在門(mén)水平分類(lèi)上，二甲酸鉀處理組和空白組比較，厚壁菌門(mén)豐度百分比下調(diào)了近16%，擬桿菌門(mén)豐度百分比上調(diào)了近24%，變形菌門(mén)豐度百分比下調(diào)了近6%，Epsilonbacteraeota豐度百分比下調(diào)了1.2%。結(jié)果表明，在門(mén)水平上，飼喂二甲酸鉀提高了白羽肉雞擬桿菌門(mén)的豐度，降低了厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)和Epsilonbacteraeota的豐度。從表5看出，在屬水平上，KDF7組與CHE組相比，巨單胞菌屬所占豐度百分比下降4%、擬桿菌屬上升30%、瘤胃球菌屬下降3%、糞桿菌屬下降1%，螺桿菌屬下降1%、另枝菌屬上升1%、Ruminococcaceae下降6%、理研菌屬上升1%、Barnesiella下降3%，其他屬下降14%；另外，在屬水平上還存在30%以上的菌未被關(guān)注，需進(jìn)一步分析。

表4 門(mén)分類(lèi)單元下相對(duì)豐度前4細(xì)菌的變化

表5 屬分類(lèi)單元下相對(duì)豐度前10的變化

3 討 論

二甲酸鉀作為新型飼用酸化劑產(chǎn)品，在降低畜禽胃腸道疾病發(fā)生，改善腸道微生態(tài)環(huán)境方面發(fā)揮了重要作用[2]。本研究在肉雞基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的二甲酸鉀，研究其對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能和腸道菌群的影響，并與金霉素產(chǎn)品進(jìn)行比較。研究結(jié)果顯示，抗生素(CKB)及替抗產(chǎn)品(KDF)與空白組(CHE)相比，對(duì)白羽肉雞的料重比有著顯著(P<0.05)下降趨勢(shì)，這與以往同類(lèi)產(chǎn)品對(duì)畜禽生長(zhǎng)性能的影響相似[9]，說(shuō)明二甲酸鉀能達(dá)到金霉素同等效果。同時(shí)，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在白羽肉雞的基礎(chǔ)日糧中添加0.3%二甲酸鉀效果最佳，但隨著濃度的升高效果逐漸降低，這可能是因?yàn)槎姿徕涀鳛橐环N有機(jī)酸化劑，可以降低腸胃pH，隨著二甲酸鉀濃度增加，會(huì)使腸胃pH值過(guò)低從而失去平衡，不利于腸胃消化，如在黃羽肉雞飼糧中添加0.6%二甲酸鉀，對(duì)于肉雞的生長(zhǎng)無(wú)顯著影響[10]。再者，對(duì)比將二甲酸鉀添加到其他家禽飼料的研究報(bào)道，發(fā)現(xiàn)不同動(dòng)物飼喂二甲酸鉀的最佳濃度存在較大差異。Selle等[11]研究表明，在科寶肉雞飼糧中添加0.6%二甲酸鉀時(shí)能夠有效促進(jìn)肉仔雞生長(zhǎng)。Motoki等[12]研究表明，在日本肉雞飼糧中添加1%二甲酸鉀時(shí)能夠顯著提高體質(zhì)量。出現(xiàn)這種情況，可能與二甲酸鉀的質(zhì)量、不同動(dòng)物品種的生理及采食需求存在差異有關(guān)，此外，雖然不同動(dòng)物之間對(duì)于二甲酸鉀的耐受和最適添加濃度存在差異，但諸多研究[9-13]證實(shí)飼喂合理的二甲酸鉀濃度能夠促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)，這與本研究在適宜濃度下飼喂白羽肉雞的結(jié)果一致，進(jìn)一步證明二甲酸鉀應(yīng)用于飼料的替抗?jié)摿鞍踩浴?/p>

腸道微生物是動(dòng)物機(jī)體的重要組成部分，在動(dòng)物的生理、免疫功能以及對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收上發(fā)揮著重要作用，有機(jī)酸能防止病原微生物在動(dòng)物腸道內(nèi)定植，減少發(fā)酵過(guò)程和有毒代謝物的產(chǎn)生，對(duì)腸道微生物菌群發(fā)揮有益作用[14]。通過(guò)第三代測(cè)序技術(shù)對(duì)0.3%二甲酸鉀組(KDF7)和金霉素組(CKB)與空白組(CHE)之間處理后的白羽肉雞腸道菌群進(jìn)行16S rDNA全長(zhǎng)序列進(jìn)行高通量測(cè)序，獲得了一批高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，保證了下游腸道菌群結(jié)構(gòu)分析的可靠性。通過(guò)alpha多樣性指數(shù)評(píng)估飼喂抗生素替代與抗生素后的白羽肉雞腸道菌群豐度與多樣性，發(fā)現(xiàn)飼喂二甲酸鉀與抗生素后，豐度沒(méi)有明顯變化，但均提高了腸道菌群物種多樣性，且二甲酸鉀作用效果優(yōu)于抗生素。同時(shí)，經(jīng)NMDS和PCoA分析發(fā)現(xiàn)，各樣品組間明顯分開(kāi)，且不同處理的生物學(xué)重復(fù)樣品各自聚在一起，進(jìn)一步證實(shí)了飼喂二甲酸鉀與金霉素組方后，白羽肉雞腸道菌群結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了明顯不同的結(jié)構(gòu)特征，說(shuō)明二甲酸鉀和金霉素對(duì)畜禽腸道菌群結(jié)構(gòu)具有一定的影響。

將0.3%二甲酸鉀飼喂白羽肉雞后，其腸道菌群在門(mén)分類(lèi)水平，厚壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、Epsilonbacteraeota的相對(duì)豐度占據(jù)前三；金霉素飼喂白羽肉雞后，其腸道菌群在門(mén)分類(lèi)水平，厚壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、變形菌門(mén)的相對(duì)豐度占據(jù)前三。以往研究發(fā)現(xiàn)飼喂抗生素制劑能顯著降低變形菌門(mén)和Epsilonbacteraeota的相對(duì)豐度，顯著提升擬桿菌門(mén)的相對(duì)豐度[15]，這與本研究飼喂抗生素制劑的變化一致。然而，飼喂二甲酸鉀后，擬桿菌門(mén)相對(duì)豐度顯著上升，厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)和Epsilonbacteraeota相對(duì)豐度顯著下降，這與其他替代抗生素產(chǎn)品飼喂家禽后趨勢(shì)相同[16]。值得注意的是，厚壁菌門(mén)比擬桿菌門(mén)會(huì)更有效地吸收食物中的熱量，從而導(dǎo)致肥胖[17]，因此厚壁菌門(mén)相對(duì)豐度降低，擬桿菌門(mén)相對(duì)豐度增加，有助于改善白羽肉雞代謝、減少脂肪沉積；此外，以往研究發(fā)現(xiàn)炎癥性腸病和腹瀉等疾病中，往往伴隨著變形菌門(mén)和Epsilonbacteraeota相對(duì)豐度上升，擬桿菌門(mén)相對(duì)豐度降低[4]，可見(jiàn)飼喂0.3%的二甲酸鉀和金霉素，可以減少大腸埃希菌和沙門(mén)氏菌等病原菌在腸道定植，提高免疫力，減少白羽肉雞發(fā)病的可能?？傮w而言，適宜的二甲酸鉀濃度和金霉素制劑可以抑制病原菌繁殖，改善動(dòng)物的腸道健康狀況，產(chǎn)生更有利的微生物菌群[18]，同時(shí)也降低了致病菌的排瀉量，凈化了動(dòng)物的生長(zhǎng)環(huán)境。

在屬分類(lèi)水平，飼喂0.3%二甲酸鉀與金霉素和空白對(duì)照(CHE)相比，均提高了擬桿菌屬相對(duì)豐度，其中二甲酸鉀組與空白對(duì)照相比存在顯著差異(P<0.05)，同時(shí)降低了Barnesiella和螺桿菌屬的相對(duì)豐度。以往研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加替代抗生素產(chǎn)品可以提高肉雞擬桿菌屬的相對(duì)豐度[19]，這與本研究飼喂二甲酸鉀的變化一致，而且研究表明患有腹瀉的畜禽腸道中擬桿菌屬相對(duì)豐度顯著減少[20]，因此擬桿菌屬的相對(duì)豐度上升可以增強(qiáng)白羽肉雞機(jī)體抵抗力，減少腹瀉等腸道疾病。此外，以往研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加益生菌可以顯著降低肉雞螺桿菌屬和Barnesiella的相對(duì)豐度，螺桿菌屬定植腸道會(huì)引起的肝炎與腸炎等疾病的發(fā)生，同時(shí)Barnesiella寄生于禽類(lèi)中，也可成為急、慢性病的病原[12]，這類(lèi)菌的相對(duì)豐度的降低，可以增強(qiáng)白羽肉雞機(jī)體免疫力，減少肉雞肝炎與腸炎等疾病的發(fā)生。這些證據(jù)都表明，適宜濃度的二甲酸鉀作為無(wú)抗飼料添加劑飼喂白羽肉雞后，可以改善白羽肉雞的腸道微生態(tài)平衡，對(duì)于白羽肉雞腸道健康具有促進(jìn)作用。

本研究首次利用昆明三正生物科技(集團(tuán))有限公司開(kāi)發(fā)的金霉素和替抗產(chǎn)品(二甲酸鉀)飼喂白羽肉雞，比較其生長(zhǎng)性能和腸道菌群的變化。結(jié)果證實(shí)，二甲酸鉀對(duì)于白羽肉雞生長(zhǎng)性能和腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響與金霉素相似，二甲酸鉀的添加降低了白羽肉雞的料重比，促進(jìn)肉雞快速生長(zhǎng)發(fā)育，同時(shí)改善了腸道中微生物菌群的健康情況，表現(xiàn)為益生菌的豐度增加和有害菌豐度的減少。因此，二甲酸鉀可以作為抗生素的替代品，具有很好的應(yīng)用前景。