GB 5009.27—2016檢測食品中 苯并（a）芘時(shí)注意事項(xiàng)

◎ 崔瑞霞，賽 平

（河南中測技術(shù)檢測服務(wù)有限公司，河南 鄭州 450000）

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并（a）芘的測定》（GB 5009.27—2016）[1]是國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布的強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)，基本涵蓋所有可能含有苯并（a）芘食品類別，是食品檢測中常用的檢測標(biāo)準(zhǔn)。近年來，隨著人們生活水平的提高，食品安全也被更多的人關(guān)注和重視，其中食品中苯并（a）芘也被列入每年的國家食品抽檢項(xiàng)目中。該標(biāo)準(zhǔn)雖然前處理簡單，但會(huì)出現(xiàn)試劑空白中檢出苯并（a）芘、平行樣相對偏差大、回收率低等現(xiàn)象，并且存在一定安全隱患?；诖?，結(jié)合前處理操作過程中需要注意的問題做以下總結(jié)。

1 安全防護(hù)

苯并（a）芘是一種多環(huán)芳香烴類化合物[2]，對人體具有強(qiáng)致癌性、致畸性、致突變性等危害[3-13]。苯并（a）芘的測定一定要在通風(fēng)櫥中操作，帶上口罩和手套，盡量減少暴露，同時(shí)全部采樣器具均應(yīng)使用玻璃制品，避免與塑料或橡膠接觸。檢測過程中，部分步驟必須更換手套以防交叉污染，對從事實(shí)驗(yàn)過程的整個(gè)區(qū)域桌面和器具進(jìn)行有效清理。如已污染了皮膚，應(yīng)采用10%次氯酸鈉水溶液浸泡和洗刷，在紫外光下觀察皮膚上有無藍(lán)紫色斑點(diǎn)，直到藍(lán)色斑點(diǎn)消失為止。

2 材料

該標(biāo)準(zhǔn)中有2種凈化方法，即中性氧化鋁柱凈化法和分子印跡柱法凈化法，其中中性氧化鋁柱需儲(chǔ)存在避光干燥的環(huán)境中，否則空氣中水分會(huì)影響中性氧化鋁柱的性能，從而直接影響苯并（a）芘的加標(biāo)回收率。苯并（a）芘分子印跡柱凈化法不同廠家的質(zhì)量差距較大，每次使用苯并（a）芘分子印跡柱前處理時(shí)一定要做全程質(zhì)控加標(biāo)回收，確定回收率達(dá)到要求才能作為檢測使用。

3 試劑

樣品前處理過程中，會(huì)用到水、甲苯、正己烷、二氯甲烷和乙腈，從多次試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，甲苯、正己烷、二氯甲烷、乙腈一定要用色譜純試劑，并且需做全程試劑空白試驗(yàn)，扣除試劑空白以確保試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

4 標(biāo)準(zhǔn)溶液

標(biāo)準(zhǔn)溶液是對樣品中的目標(biāo)物定性定量的重要參考物，標(biāo)準(zhǔn)溶液的采購、保存、溶劑和配制過程也是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確非常重要的因素。①采購正規(guī)的、能夠附有被認(rèn)可的證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥99%），并且避光保存在0～5 ℃的冰箱中。②標(biāo)準(zhǔn)溶液的溶劑是色譜純乙腈，要用能準(zhǔn)確定量的移液槍逐級稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液。③在配制和逐級稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液過程用到的槍頭、容量瓶和吸量管需要先用干凈的色譜純乙腈潤洗至少2遍，在配制和逐級稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液過程中需注意需先加入少量乙腈至容量瓶，再加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)溶液，最后用乙腈定容。④標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)臨用現(xiàn)配。標(biāo)準(zhǔn)溶液放置一段時(shí)間后濃度會(huì)有所改變，每次用之前應(yīng)與之前的、同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液圖譜進(jìn)行比較，檢查其同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積是否有較大的變化，若變化較大應(yīng)重新采購新的標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)重新配制。

5 樣品制備

樣品制備是樣品預(yù)處理中至關(guān)重要的步驟，對后續(xù)樣品提取和凈化起到基石性的作用。一定要取可食用部分，去除雜質(zhì)，固體樣品要打碎均勻或絞碎均勻，保存在樣品瓶中，注意樣品編號、檢測狀態(tài)和保存溫度，待稱取用。

6 天平

標(biāo)準(zhǔn)要求使用是千分之一電子天平，先檢查其是否水平，再開機(jī)提前預(yù)熱30 min以上。天平室環(huán)境溫濕度要特別注意，濕度需控制在80%以下，溫度控制在 25 ℃左右。前處理過程中用到的玻璃儀器一定要用記號筆做好標(biāo)記，離心管無污染且刻度清晰，一次性吸管要完全干燥。稱取樣品前檢查樣品，充分混勻樣品，盡可能減少樣品間不均勻性。樣品直接稱取至50 mL離心管中，盡量不要粘在離心管壁上，稱量結(jié)束后按要求及時(shí)填寫天平的使用記錄，稱重?cái)?shù)據(jù)直接寫在原始記錄上。

7 提取

正己烷特別容易揮發(fā)，稱取好樣品的離心管加入正己烷后需盡快擰緊離心管蓋。每次加入5 mL正己烷，先渦旋混合0.5 min，再在40 ℃水的超聲波中超聲提取10 min，此過程中注意控制溫度不超過40 ℃。4 000 r·min-1離心5 min，用一次性移液管轉(zhuǎn)移出上清 液，至少提取2次，合并正己烷提取液待凈化。

8 凈化

日常工作中用苯并（a）芘分子印跡柱，在正式投入使用前要進(jìn)行驗(yàn)收，確保為合格品。先加二氯甲烷再加正己烷逐次活化柱子，加二氯甲烷的目的是去除固相萃取柱中的殘留物，且需注意一定要使用色譜純的二氯甲烷不能用分析純二氯甲烷。收集凈化液再在水浴溫度40 ℃氮吹蒸發(fā)吹干，切記在氮吹前一定要用酒精棉擦洗氮吹管，且氮吹管不得離凈化液面過近，以防污染樣品。

9 上機(jī)測定

色譜柱一定要按標(biāo)準(zhǔn)要求用C18柱（4.6 mm× 250 mm，5 μm）或性能相當(dāng)者。選用合適的色譜柱，柱子過短易造成分離不開、假陽性等問題，流動(dòng)相用到的乙腈一定是色譜純，水一定要用GB/T 6682—2008[14]規(guī)定的一級水。熒光檢測器先預(yù)熱，最好是檢測器燈打開，基線平穩(wěn)至少30 min后再采集進(jìn)樣。

10 原始記錄

原始記錄必須做到真正原始，一定要能反映現(xiàn)場狀態(tài)的全部信息，應(yīng)及時(shí)、準(zhǔn)確、完整、客觀，具備重現(xiàn)性。①數(shù)字修約應(yīng)符合GB/T 8170—2008[14]數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定。②計(jì)算按照標(biāo)準(zhǔn)要求結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后一位。③記錄如需更改要按照《法定計(jì)量檢定機(jī)構(gòu)考核規(guī)范》（JJF 1069—2012）[15]中的要求，在改動(dòng)的內(nèi)容處劃杠改加簽名。④原始記錄要三級審核簽名，以確認(rèn)相關(guān)信息和數(shù)據(jù)準(zhǔn)確無誤。

11 其他注意事項(xiàng)

①化驗(yàn)室新購買的試劑應(yīng)先做試劑空白，確定試劑是否符合要求。②移液槍使用后應(yīng)調(diào)到最大刻度并放到移液槍專用架子上。③當(dāng)檢測結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的臨界值附近或離散數(shù)據(jù)容易造成誤判時(shí)或檢測過程中發(fā)生異常情況（如環(huán)境變化、儀器故障、停電、停水等）有可能會(huì)影響檢測結(jié)果時(shí)需要進(jìn)行復(fù)測。