真核翻譯起始因子3 在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用

殷玉婷，何清蓮，龍嘉莉，雷 雪，李紫琪，朱 偉（廣東醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)系，廣東東莞 523808）

結(jié)直腸癌(colorectal cancer,CRC)在全球常見的惡性腫瘤序列中排列第3，也是導(dǎo)致癌癥相關(guān)死亡的第4大原因[1]。盡管CRC在診斷和治療方面取得了較大進(jìn)展，但由于早期診斷率低及晚期高頻率的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，CRC患者的預(yù)后仍然很差[2]。目前 CRC主要的治療方法是手術(shù)，另輔助放療(針對直腸癌患者)和輔助化療(適用于III/IV期和II期高危結(jié)腸癌的患者)[2]。因此，發(fā)現(xiàn)新的用于預(yù)后預(yù)測的潛在生物標(biāo)志物并深入研究 CRC的確切分子機(jī)制可以改善CRC患者的治療效果，并為研究 CRC的轉(zhuǎn)移行為提供新的思路。真核翻譯起始因子3(eIF3)是最復(fù)雜的真核翻譯起始因子。eIF3復(fù)合物由 13個亞基(eIF3a-m)組成，它對于細(xì)胞和病毒中蛋白質(zhì)的合成十分重要[3]。首先，它與40S核糖體亞基結(jié)合形成的復(fù)合物可將40S核糖體亞基維持在解離狀態(tài)并防止游離的40S亞基與60S亞基重新結(jié)合。其次，eIF3通過與40S核糖體結(jié)合參與43S啟動復(fù)合物形成，并促進(jìn)GTP-eIF2-tRNA-甲硫氨酸三聚體的形成，該三聚體是細(xì)胞內(nèi)大部分 mRNA翻譯的起始部位。再次，eIF3刺激mRNA與43S前體啟動復(fù)合物結(jié)合，并參與掃描和識別起始密碼子。eIF3還通過與核糖體進(jìn)入位點(diǎn)序列(IRES)元件結(jié)合而在翻譯調(diào)節(jié)中起重要作用。在13個亞基中，5個亞基(eIF3 a、b、c、g和i)在真核生物中是保守的，即所謂的“核心”，其余8個被認(rèn)為是“非核心”。迄今，個別亞基的功能作用仍不明了。本文對 eIF3亞基與CRC發(fā)生、發(fā)展及治療的關(guān)系進(jìn)行綜述。

1 eIF3不同亞基在CRC 發(fā)生、發(fā)展過程中的作用

1.1 eIF3a

eIF3a(p170) 是 eIF3的最大亞基，其主要功能是調(diào)節(jié) RNA翻譯，調(diào)節(jié)包括 α-微管蛋白、核糖核苷酸還原酶 M2和p27在內(nèi)的蛋白質(zhì)的合成，以及細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期控制和細(xì)胞分化[4-5]。目前為止，在許多癌組織中發(fā)現(xiàn)了eIF3a的過度表達(dá)。例如，eIF3a被確定為胰腺癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的關(guān)鍵亞基，通過特異性地敲減 eIF3a，顯著抑制了體外細(xì)胞增殖和克隆形成能力以及體內(nèi)腫瘤生長[6]。研究表明，eIF3a的表達(dá)與肺癌患者對鉑類化療的反應(yīng)相關(guān)[7]。eIF3a敲減或過表達(dá)分別增加或降低細(xì)胞對順鉑的抗性和DNA修復(fù)蛋白的表達(dá)。這意味著 eIF3a在調(diào)節(jié)DNA修復(fù)蛋白的表達(dá)中起重要作用，反過來又有助于細(xì)胞對抗癌藥物的反應(yīng)以及患者對鉑類化療的反應(yīng)。但現(xiàn)在關(guān)于 eIF3a在人CRC發(fā)生、發(fā)展過程中所起作用的研究還甚少。Liu等[5]發(fā)現(xiàn)，在 CRC細(xì)胞系HT-29和Caco-2分化之前，eIF3a的表達(dá)量急劇下降。應(yīng)用小干擾 RNA可抑制 eIF3a的表達(dá)，可促進(jìn)Caco-2的分化。因此，eIF3a可能在細(xì)胞發(fā)育和分化中發(fā)揮作用，并且降低 eIF3a的表達(dá)可能是腸上皮細(xì)胞分化的先決條件。

1.2 eIF3d

eIF3d是 eIF3的核心亞基之一。目前人們對eIF3d的了解很少，因?yàn)樗淮_定為 eIF3復(fù)合物可有可無的亞基。在腎細(xì)胞癌組織中，有人發(fā)現(xiàn)eIF3d在腎細(xì)胞癌組織中的表達(dá)水平較配對的正常組織表達(dá)水平明顯升高，并且其表達(dá)水平與TNM分期和腫瘤大小成正相關(guān)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，在抑制eIF3d表達(dá)后，腫瘤的增殖和克隆能力會被明顯抑制，說明eIF3d在腎細(xì)胞癌中起著原癌基因的作用，影響著腎細(xì)胞癌的發(fā)展[8]。在 CRC中，Yu等[9]發(fā)現(xiàn) eIF3d的敲減會抑制 HCT116細(xì)胞的增殖。Du等[10]也發(fā)現(xiàn)與正常的人結(jié)腸上皮細(xì)胞HCEpiC相比，CRC細(xì)胞具有更高的 eIF3d表達(dá)。同時，在 eIF3d高表達(dá)的分組中，CRC細(xì)胞的增殖能力增強(qiáng)。近期，eIF3d也被發(fā)現(xiàn)與耐藥性有關(guān)。Huang等[11]發(fā)現(xiàn)在腎細(xì)胞癌中，經(jīng)過舒尼替尼(一種分子靶向治療藥物)治療后，與對藥物敏感的細(xì)胞相比，在產(chǎn)生耐藥性的細(xì)胞中，eIF3d的表達(dá)量明顯升高，提示 eIF3d在腎細(xì)胞癌細(xì)胞的耐藥性中起到重要作用，它可能是作為腎細(xì)胞癌治療的潛在靶標(biāo)。

1.3 eIF3e

eIF3e，也稱為 Int6(the integration site 6)，定位于人染色體8q22-q23，這是一個含有 13個外顯子的45 kb區(qū)域。研究表明，CRC組織中eIF3e的表達(dá)顯著升高，eIF3e 在CRC中高表達(dá)與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、臨床分期、組織病理學(xué)分類以及對血管的侵犯顯著相關(guān)[12]。單變量和多變量分析顯示，eIF3e 是CRC患者存活率的獨(dú)立預(yù)后因素。體外實(shí)驗(yàn) eIF3e下調(diào)可抑制 CRC細(xì)胞的增殖和克隆，并且促進(jìn)細(xì)胞凋亡。因此，eIF3e高表達(dá)可促進(jìn)腫瘤進(jìn)展并且可用來預(yù)測CRC的不良預(yù)后。

1.4 eIF3g

eIF3g(p44) 的 c端 (320個氨基酸)含有 RNA識別序列(RNA recognition motif,RRM)，它介導(dǎo)了43S起始復(fù)合物與eIF4f的 mRNA之間的相互作用，促進(jìn)翻譯起始因子復(fù)合物的形成[3]。eIF3g還可與eIF3a相互作用，并通過 RRM與rRNA結(jié)合[13]。耐藥性是 CRC患者死亡的重要因素。Yang等[14]發(fā)現(xiàn)，在HCT116/5-Fu(5-fluorouracil)(抗 5-氟尿嘧啶 HCT116)細(xì)胞中，eIF3g的 RNA和蛋白質(zhì)高度表達(dá)。此外，沉默eIF3g會促進(jìn) HCT116/5-Fu細(xì)胞的凋亡。該研究還證實(shí)，eIF3g的改變可將 HCT116/5-Fu重新轉(zhuǎn)化為對5-Fu敏感的細(xì)胞。在體內(nèi)和體外的實(shí)驗(yàn)中，沉默 eIF3g以及使用5-Fu對 HCT116/5-Fu細(xì)胞進(jìn)行處理具有協(xié)同作用。這些發(fā)現(xiàn)表明，eIF3g是 CRC中耐藥性的靶向調(diào)節(jié)劑，抑制 eIF3g與應(yīng)用5-Fu的搭配可能是 CRC的潛在治療策略。

1.5 eIF3i

eIF3i已被證實(shí)在乳腺癌、頭頸部鱗狀細(xì)胞癌和肝癌中過度表達(dá)[15-16]。Qi等[17]發(fā)現(xiàn)，eIF3i在人結(jié)腸腺癌、息肉以及誘導(dǎo)的 CRC細(xì)胞系模型中表達(dá)均上調(diào)。腸上皮細(xì)胞中異位 eIF3i過表達(dá)通過直接上調(diào)環(huán)氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白的合成，并激活介導(dǎo) eIF3i致癌功能的β-catenin/TCF4(β-catenin/Tcell factor 4)信號傳導(dǎo)途徑而引起腫瘤發(fā)生。這提示eIF3i可能通過調(diào)節(jié)/改變下游腫瘤抑制因子或癌基因的合成水平來發(fā)揮其致癌功能。

1.6 eIF3k

eIF3k N端的 HAM(HEAT analog motif,HAM)結(jié)構(gòu)域和C端的 WH(winged-helix,WH)結(jié)構(gòu)域都參與蛋白質(zhì)之間的相互作用[3]。eIF3k C端的 WH結(jié)構(gòu)域主要參與DNA和RNA的合成。據(jù)推測，eIF3k起著結(jié)構(gòu)蛋白的作用，這可能與癌癥的發(fā)展有關(guān)[3]。因此，eIF3K的表達(dá)差異有望為篩選腫瘤化療的有效靶位提供依據(jù)。

1.7 eIF3m

Zeng等[18]發(fā)現(xiàn) eIF3m通過穩(wěn)定核心亞基 eIF3c、eIF3f和eIF3h來維持 eIF3復(fù)合物的完整性。eIF3m的丟失會嚴(yán)重?fù)p害 eIF3復(fù)合物的完整性。通過敲除小鼠體內(nèi)的eIF3m實(shí)驗(yàn)證實(shí)，eIF3m的表達(dá)水平是器官構(gòu)建期間細(xì)胞分裂次數(shù)的重要決定因素。研究表明，eIF3m對于細(xì)胞分裂周期25A(cell division cycle 25A,CDC25A)很重要，而這對于 HCT116細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)展必不可少；通過敲減 eIF3m實(shí)驗(yàn)證實(shí)eIF3m影響 CRC細(xì)胞系HCT116細(xì)胞的增殖、細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞死亡，同時發(fā)現(xiàn) eIF3m高表達(dá)不僅限于CRC細(xì)胞系，還發(fā)生在白血病和其他癌癥中，這表明 eIF3m在腫瘤發(fā)生中具有重要的作用[19]。上述結(jié)果顯示，進(jìn)一步研究腫瘤發(fā)生相關(guān)基因及其通過eIFs的調(diào)節(jié)，將為設(shè)計針對癌癥的靶向治療提供重要線索。

2 結(jié)語

本文主要總結(jié)了eIF3s 的 13個亞基中與CRC發(fā)生發(fā)展相關(guān)的亞基?？梢园l(fā)現(xiàn)，它們在CRC細(xì)胞中的表達(dá)水平較正常結(jié)直腸細(xì)胞都有明顯的升高。除此之外，在其他惡性腫瘤例如胃癌[20-21]、宮頸癌(鱗狀細(xì)胞癌)[22]、卵巢癌[23]、子宮內(nèi)膜癌[24]、肺癌[25-27]等組織中，eIF3的不同亞型也被檢測出過度表達(dá)，表明 eIF3在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，并且其不同的亞基有可能成為治療不同惡性腫瘤包括CRC的潛在治療靶標(biāo)，但上述研究方向尤其是與eIF3相關(guān)的調(diào)控機(jī)制仍需日后大量的研究來探討。