miRNA在肺癌中的作用機制及潛在臨床意義

王琳瑤 薛逢來 史曉舜 沈建飛

肺癌高居全球癌癥病死率之首，已成為發(fā)達國家和發(fā)展中國家的男性病死率最高的惡性腫瘤，且已超過乳腺癌，成為發(fā)達國家女性病死率最高的惡性腫瘤。肺癌在病理學上分為非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC；85%）和小細胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC；14%）兩大類型，NSCLC進一步分為鱗狀細胞癌（squamous cell carcinoma，SCC；30%）、腺癌（adenocarcinoma，AC；50%）和大細胞癌（large cell cancer，LCC；10%）[1]。盡管免疫治療及靶向治療顯著提高了肺癌患者5年的生存率，但生存率仍然很低。診斷較晚、治療方法有限、獲得性耐藥及復發(fā)是肺癌患者預后不良的主要原因。近年來，miRNA失調(diào)已被證實是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的一個重要因素或機制，它通過惡性細胞、非惡性基質(zhì)細胞和腫瘤微環(huán)境中非細胞成分之間的相互作用影響腫瘤增殖、血管新生、轉(zhuǎn)移和獲得性耐 藥[2-3]。因此，研究miRNA與肺癌的關系已成為目前的研究熱點，且已在很大程度上彌補了對肺癌發(fā)病機制認識上的不足。

1993年在對線蟲的研究中首次發(fā)現(xiàn)miRNA，即lin-4和let-7。它們是由20～24個小核苷酸所組成的內(nèi)源性非編碼RNA，相對穩(wěn)定、體積小，且具有高度保守性，這與其功能的重要性有密切的關系[4]。miRNA可以識別并結(jié)合在mRNA的3'非編碼區(qū)（UTR）中的互補位點，從而通過降解或翻譯mRNA抑制導致轉(zhuǎn)錄后基因沉默。完全性互補通過剪切和降解mRNA導致轉(zhuǎn)錄抑制，不完全互補或有限堿基對導致翻譯抑制[5]。此后又證實miRNA與靶基因的密切聯(lián)系，甚至幾個miRNA也可以精確調(diào)控同一個靶基因。另外，miRNA還與蛋白質(zhì)形成微小核糖核蛋白復合體（microRNA ribonucleoprotein complex，miRNP），這也可導致基因激活，并與mRNA的5'UTR和開放閱讀框架（open reading frame，ORF）相結(jié)合，影響翻譯的激活。目前，已明確miRNA在真核生物中的重要功能有調(diào)控轉(zhuǎn)錄、參與mRNA選擇性剪接、參與mRNA的穩(wěn)定和翻譯調(diào)控過程以及影響蛋白質(zhì)的穩(wěn)定和轉(zhuǎn)運[6]。據(jù)推測，miRNA調(diào)節(jié)人類約三分之一的基因，這種對基因表達的顯著調(diào)控作用是miRNA區(qū)別于其他RNA的獨立特征，并有望成為新的腫瘤生物標志物和潛在的治療靶點[7]。

一、miRNA的生物合成

miRNA生物合成的第一步是通過微處理器復合物處理初級的pri-miRNA，pri-miRNA由RNA結(jié)合蛋白DGCR8和III型RNA水解酶DROSHA組成。此初始事件需要通過DGCR8識別pri-miRNA發(fā)夾的莖與側(cè)翼單鏈RNA（ssRNA）之間的連接，然后募集DROSHA，切割RNA雙鏈體以產(chǎn)生premiRNA產(chǎn)物[8]。新合成的pre-miRNA通過exportin-5（輸出蛋白5）或者RNAGTP轉(zhuǎn)運到細胞質(zhì)。在組裝miRNP的過程中，RNA螺旋酶提取了兩條雙鏈miRNA，僅有一條單鏈進入miRNP，而另一條鏈則被降解。加工完成后，單鏈miRNA通過與Argonaute（Ago）蛋白結(jié)合形成RNA誘導的沉默復合物（RNA-induced silencing complex，RISC）并靶向mRNA的3'UTR，導致mRNA降解、翻譯減少或脫腺苷化[9]，從而降低微調(diào)蛋白的表達影響生物學功能。據(jù)文獻報道，miRNA-622首先與RISC結(jié)合形成RISC-miRNA-622復合物，再互補配對結(jié)合到靶mRNA的3'非翻譯區(qū)，調(diào)控下游靶蛋白的表達，從而參與細胞的生長、增殖、分化及凋亡等 過程[10]。

圖1 miRNA與肺癌的關系

二、miRNA表達與肺癌發(fā)生

研究[11]表明，miRNA與肺癌，尤其是NSCLC的發(fā)生密切相關。如在NSCLC組織中miRNA-30a-5p、miRNA-486-5p和miRNA-126-3p下調(diào)，而miRNA-205-5和miRNA-210-3p上調(diào)，其中miR-30a-5p與miR-210-3p具有高度敏感性和特異性，可為區(qū)分癌組織與非癌組織進一步提供依據(jù)[12]（圖1）。此外，miRNA-210-3p在鑒別AC與其他病理類型的肺癌方面顯示出較高的準確性[13]。一些研究還證實miRNA-92b、miRNA-146a、miRNA-375、miRNA-1224和miRNA-1246在SCLC中高表達[14]，而miRNA-27a-5p和miRNA-34b-3p則在SCLC中低 表達[15]。

類癌是一類罕見的肺癌，曾有小樣本研究[16]顯示let-7b-5p在大多數(shù)肺類癌患者中呈過表達。

肺癌中許多原癌基因與miRNA所參與調(diào)控表達的聯(lián)系十分密切，具體表現(xiàn)為一種或多種miRNA表達水平的下調(diào)或上調(diào)通過靶向原癌基因的信號轉(zhuǎn)導通路而影響腫瘤的發(fā)生及發(fā)展[17]。例如作為NSCLC的抑癌基因，miRNA-223可通過靶向EGFR調(diào)控PI3K/AKT途徑[18]（表1）；miRNA-199b可靶向抑制ERK和Akt信號通路相關基因，抑制K-Ras突變NSCLC的生長和轉(zhuǎn)移[19]；miRNA-449a通過抑制MAP2K1降低NSCLC細胞的侵襲性等[20]。

肺癌發(fā)生的另一個重要因素是抑癌基因的失活，目前已證實大多數(shù)NSCLC和SCLC存在p53抑癌基因失活[22]（表2），Takahashi等[23]發(fā)現(xiàn)45%的NSCLC中存在p53突變，而在SCLC中73.3%存在p53突變，一些miRNA可直接結(jié)合p53 mRNA的3'UTR抑制p53翻譯[24]，如miRNA-675-5p、miRNA-449a、miRNA-200a、miRNA-141和miRNA-429等。同時，miRNA也可通過抑制p53拮抗物以增強p53蛋白的穩(wěn)定性和功能，如miRNA-149-3p和miRNA-4270[25-26,30-31]。少數(shù)NSCLC和幾乎所有的SCLC存在另一種重要抑癌基因Rb的失活，如miRNA-17-92在SCLC中高表達，以抵消RB失活導致的DNA損傷[27]。另外，肺癌中LKB1基因突變可調(diào)節(jié)腫瘤細胞的分化和遷移[28]，例如miRNA-451可通過調(diào)節(jié)LKB1/AMPK抑制NSCLC細胞的增殖和遷移[21]，miRNA-93通過抑制LKB1/PTEN/CDKN1A激活PI3K/AKT途徑，促進NSCLC的發(fā)生和轉(zhuǎn)移，miRNA-150-5p可通過抑制LKB1促進NSCLC發(fā)生和發(fā)展[29,32]。miRNA-208a的過表達通過p21促進NSCLC細胞中AKT/mTOR的激活，從而促進癌細胞增殖[33]，miRNA-221-3p的過表達降低了p27的表達并促進了NSCLC癌細胞周期從G1到S期的發(fā)展[34]。

因此，miRNA幾乎全程參與了肺癌的發(fā)生和發(fā)展，這種調(diào)控作用體現(xiàn)在各型肺癌的細胞分子水平上。

三、肺癌中miRNA調(diào)控異常的機制

成熟miRNA在肺癌中的調(diào)控異常與癌細胞生長、侵襲及遷移密切相關，而這種調(diào)控異常的主要原因包括表觀遺傳修飾的改變、表觀遺傳缺失、基因缺陷以及轉(zhuǎn)錄抑制等[35]。

表觀遺傳修飾的改變通常為廣泛的基因組DNA啟動子低甲基化，這可導致突變的致癌性miRNA的表達。與相應基因組低甲基化相關的14q32 miRNA的過表達促進肺癌的轉(zhuǎn)移，其中的miRNA-487a-3p、miRNA-323b-3p和miRNA-539-5p顯著促進了侵襲性表型[36]。另外，啟動子低甲基化與miRNA-130b表達的升高明顯關聯(lián)[37]。另一種表觀遺傳修飾的改變?yōu)镈NA啟動子的高甲基化，可導致抑制腫瘤的miRNA表達下調(diào)，例如，具有抑癌作用的miRNA-137就因DNA啟動子的高甲基化而在肺癌中被下調(diào)[38]（圖2）。

表觀遺傳缺失具體表現(xiàn)為組蛋白甲基化缺失和組蛋白乙?；笔?，二者可分別使突變的致癌性miRNA表達及抑癌性miRNA表達下調(diào)[39]。

表1 抑癌miRNA及其靶基因

表2 致癌miRNA及其靶基因

肺癌中miRNA的調(diào)控異常與基因缺陷也有重要關系，其中最常見的就是p53在NSCLC中的表達或功能缺失，并且使下游效應因子缺失。miRNA通過直接靶向p53來調(diào)節(jié)其水平和功能，如miRNA-183-5p、miRNA-675高表達可以抑制p53而促進機體NSCLC的轉(zhuǎn)移及生長[40-41]。Drosha和Dicer是miRNA生物發(fā)生的兩大關鍵酶[42]，而p53通過Drosha加工復合體的相互作用，對miRNA的生物加工發(fā)揮了調(diào)控作用：在早期NSCLC患者血漿中miRNA-27a、miRNA-31和miRNA-182呈高表達是由于p53突變干擾Drosha加工機制[43]（圖2）。

肺癌細胞中miRNA調(diào)控異常與轉(zhuǎn)錄抑制的關系具體與c-Myc這種原癌基因相關：c-Myc是miRNA-17-92簇激活劑，它與啟動子結(jié)合后導致多種抑癌miRNA的表達缺失，或上調(diào)致癌miRNA的表達。研究表明c-Myc/miRNA-150/EPG5介導的自噬功能障礙促進了NSCLC的發(fā)展[44]，其穿梭在肺癌衍生的細胞外囊泡中可誘導癌基因miRNA-19b和miRNA-92a表達的上調(diào)[45]。另外，c-Myc還可直接作為一些miRNA的靶基因，例如miRNA-449c靶向c-Myc可抑制NSCLC細胞進程[46]（圖2）。

圖2 miRNA在肺癌中調(diào)控異常的機制

四、miRNA在肺癌的有氧糖酵解中的作用

肺癌細胞與正常組織細胞代謝的最大不同之處在于癌細胞的有氧糖酵解特性。癌細胞中約有一半的ATP是通過糖酵解途徑合成的，即便是在有氧環(huán)境中，癌細胞仍然偏好通過糖酵解途徑提供能量并生成乳酸，這被稱為瓦伯格效應(Warburg effect)。這種效應既可提高癌細胞對缺氧的耐受性又可分解破壞癌細胞周圍的細胞基質(zhì)，以促進腫瘤細胞遷移[47-48]。新興研究[49]表明，miRNA可以通過直接調(diào)節(jié)主要糖酵解酶的表達或間接調(diào)節(jié)致癌或抑癌信號通路來影響癌癥代謝。

肺癌細胞的有氧糖酵解特性需優(yōu)先增強特定同型糖酵解酶的表達，這些酶包括葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白（glucose transporter type 1，GLUT1）、己糖激酶（hexokinase 2，HK2）、磷酸果糖激酶（phosphofructokinase，PFK）、磷酸葡萄糖變位1（phosphoglucomutase，PGM1）、磷酸甘油酸激酶1（phosphoglycerate kinase 1，PGK1）、丙酮酸激酶同工酶M2（pyruvate kinase M2，PKM2）、蛋白激酶B（protein kinase B，PKB）、磷酸酯酶與張力蛋白同源物（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten，PTEN）、磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）等。這些糖酵解酶可調(diào)節(jié)一些針對它們自身的mRNA降解的miRNA[50]。如在缺氧條件下，miRNA-210-3p靶向三羧酸循環(huán)中的琥珀酸脫氫酶（Succinate dehydrogenase，SDHD），以調(diào)節(jié)線粒體代謝和缺氧誘導因子（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）的活性并增強糖酵解[51]。下調(diào)的miRNA-144-5p通過靶向GLUT1的表達，增強了肺癌細胞的葡萄糖代謝（圖3）。miRNA-320a低表達與PFKm的升高有關，miRNA-26-5p靶向PTEN并觸發(fā)PI3K/AKT/mTOR通路，影響腫瘤細胞的增殖和 代謝[52]。此外，與對放射敏感的肺癌細胞相比，獲得性放射抵抗的NSCLC細胞miRNA-133b表達顯著下調(diào)，靶向PKM2的表達升高，導致糖酵解率升 高[53]。miRNA-377-5p通過靶向AKT1信號轉(zhuǎn)導可抑制肺癌細胞增殖[54]。miRNA-22-3p靶向ENO1促進了腺癌糖酵解和腫瘤的進展[55]。另外，miRNA-23a-3p還可靶向PTEN以抑制NSCLC的增殖和侵襲[56]。下調(diào)miRNA-214抑制HK2和PKM2來抑制NSCLC細胞的增殖和糖酵解，miRNA-133b過表達可通過下調(diào)PKM2抑制肺癌干細胞的生長和增殖[57-58]。

五、肺癌細胞中的PD-L1和miRNA

目前公認的惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展的一項重要因素是其可逃避免疫監(jiān)測。癌細胞可以通過多種方式扭曲宿主的免疫檢查點，以此逃避免疫系統(tǒng)的排斥。現(xiàn)研究較為明確的是調(diào)控腫瘤微環(huán)境中早期T細胞活性、程序性死亡受體1（programmed death-ligand 1，PD-1）及程序性死亡受體配體PD-L1和PD-L2[59]。PD-1/PD-L1信號通路主要通過降低T淋巴細胞活化、抑制T淋巴細胞增殖和誘導特異性T細胞凋亡而發(fā)揮負性調(diào)節(jié)的作用。PD-L1是在免疫反應中T細胞表面表達的免疫檢查點的抑制劑，其與存在于淋巴細胞上的PD-1相互結(jié)合使細胞毒性T細胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）抑制細胞因子和蛋白水解酶的分離[60]。癌細胞能表達PD-L1，引起免疫細胞功能障礙和凋亡，并且還能與B細胞、自然殺傷性T細胞以及樹突狀細胞上表達的PD-1結(jié)合，以抑制抗癌免疫力[61]。研究[62-64]已證實PD-L1的表達受信號通路、轉(zhuǎn)錄因子和表觀遺傳因子的調(diào)控，諸如miRNA-513、miRNA-197、miRNA-34a等miRNA在許多惡性腫瘤中負調(diào)控PD-L1（圖4）。

圖3 miRNA調(diào)節(jié)肺癌糖酵酶的示意圖

臨床上通過控制PD-L1表達和細胞增殖的分子提高治療的療效[65-66]。研究表明，miRNA-197介導的CKS1B/STAT3軸可通過多種致癌基因（Bcl-2、c-Myc和cyclin D1）調(diào)控腫瘤進展，驅(qū)動腫瘤PD-L1的表達，且miRNA-197模擬物可使PD-L1耐藥細胞對化療敏感[64]，miRNA-197-5p與PD-L1表達呈負相關，并與NSCLC患者的短生存期相關。此外，miRNA-33a-5p在腺癌中高表達且預后良好，這與PD-1、PD-L1、CTLA-4表達降低有關[67]。

圖4 miRNA調(diào)控PD-L1表達及免疫檢查點阻斷的示意圖

六、肺癌診斷與監(jiān)測的新工具：miRNA作為生物標志物

隨著生物技術的發(fā)展，臨床腫瘤診斷及預后監(jiān)測愈發(fā)受益于腫瘤分子標志物的發(fā)展及其檢測技術的不斷完善?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)miRNA在人體血清、血漿和痰液等體液中大量存在并穩(wěn)定表達，而且腫瘤患者外周血miRNA的檢測已成為熱點[68]。

一項包括中國人等亞裔患者在內(nèi)的研究結(jié)果中，揭示了5組用于檢測早期NSCLC的miRNA血清測試，并驗證了其在多個患者隊列中的表現(xiàn)。如let-7a-5p和miRNA-375可抑制腫瘤的活性，其在肺癌患者血清中表達也較低，是肺癌的預后生物標志物。而miRNA-1-3p、miRNA-214-3p呈高表達，miRNA-1-3p具有致癌活性，miR-214-3p可能是致癌因素[69]。此外，miRNA-145、miRNA-145-5p和miRNA-145-3p在肺鱗癌中作為抗腫瘤miRNA而發(fā)揮重要作用，其中miRNA-145-5p在早期NSCLC的檢測中被證明是可靠的生物標志 物[70]。miRNA-19b-3p、miRNA-221-3p、miRNA-409-3p、miRNA-425-5p、miRNA-584-5p以及miRNA-21-5p被確定為診斷腺癌的潛在生物標志物[71]。miRNA-126-5p靶向抑制NSCLC中的MDH1活性，顯示miR-126-5p在NSCLC的諸多miRNA中的組織學特異性[72]，可作為區(qū)分NSCLC與轉(zhuǎn)移性肺癌的生物學標志物。與NSCLC相比，SCLC中已明確的與miRNA關聯(lián)的生物標志物的結(jié)果還較少。血漿中miRNA-92a-2水平可作為一種診斷SCLC的潛在生物標志物，而miRNA-184和miRNA-574-5p可作為其預后的潛在生物學指標[73-74]（表3）。

表3 肺癌診斷與監(jiān)測的新工具：miRNA

miRNA作為肺癌診斷的新手段，還可能使一些早期肺癌患者的高頻率影像學檢查現(xiàn)狀得以改善。研究者們開發(fā)了一組包含miRNA-21、miRNA-31和miRNA-210的組合的miRNA生物標志物[75]，以此減少用CT進行肺癌篩查的頻率，并可提高術前診斷惡性孤立性肺結(jié)節(jié)的準確率 （表3）。但痰液中的miRNA作為肺癌生物標志物還需更多前瞻性研究。

因此，miRNA可作為肺癌的潛在生物學標志物。但肺癌發(fā)病機制十分復雜，且對于miRNA在其發(fā)生及發(fā)展中所發(fā)揮的作用仍有許多未知領域，要徹底實現(xiàn)miRNA作為臨床診斷及預后的生物學指標還需繼續(xù)深入探索。

七、miRNA與肺癌的轉(zhuǎn)移及預后

miRNA表達譜有助于miRNA作為惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移監(jiān)測及預測預后的潛在生物標志物。運用TCGA數(shù)據(jù)庫獲取肺癌患者臨床信息及miRNA的表達數(shù)據(jù)，就可識別差異表達的miRNA并作進一步分析，對患者的血清、血漿、痰液甚至組織等樣本進行驗證。

近期一項研究報道了利用qRT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移的NSCLC患者血漿中的miRNA-21和miRNA-23a水平顯著高于無轉(zhuǎn)移患者，且二者的表達與腫瘤大小顯著相關，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關[76]，而miRNA-148a的下調(diào)則與NSCLC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和不良的預后密切相關，并抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移，其表達上調(diào)使DNMT1表達降低，進而抑制了A549和H1299細胞（NSCLC的細胞系）的遷移和侵襲能力[77]。另外，miRNA-21-5p在NSCLC中通過靶向SMAD7的表達促進腫瘤的發(fā)展，其在腫瘤組織中的高表達與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移以及分化顯著相關[78]。miRNA-155-3p和miRNA-155-5p直接靶向TP53INP1可抑制NSCLC中的細胞增殖、遷移和侵襲[79]。miRNA-92a、miRNA93-5p、miRNA-17-5p的表達升高和let-7b、miRNA-145-5p的下調(diào)與腺癌的較差生存結(jié)果相關，并可作為侵襲性肺癌的預后標志物[80-82]。

同時，一些miRNA可在不同肺癌病理亞型中表現(xiàn)出改變，而不只局限于一種。Reis等[83]闡述了miRNA-16-5p、miRNA-92a-3p和miRNA-451a的表達調(diào)節(jié)在早期腺癌患者的血漿中具有高度特異性，而在早期鱗癌中則具有高度敏感性，這些miRNA在肺癌發(fā)生中的已知調(diào)控途徑包括EGFR、K-RAS和PI3K/AKT的信號轉(zhuǎn)導。

再者，不同的miRNA靶向于某一信號轉(zhuǎn)導通路可使肺癌顯現(xiàn)出不同的腫瘤生物學行為。例如，miRNA-184和miRNA-574-5p均通過抑制PTPRU或EPAS1參與β-catenin信號轉(zhuǎn)導，并在SCLC中調(diào)控腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移；前者可顯著減輕NSCLC的轉(zhuǎn)移，而后者則增強了轉(zhuǎn)移，并且是SCLC的獨立危險因素[74]。所以，如何大幅度提高miRNA監(jiān)測及判定各型肺癌預后的敏感性和特異性，是miRNA從臨床前研究到臨床中運用所要面臨的又一大問題。

八、miRNA在肺癌治療中的調(diào)控作用

近年來，靶向治療聯(lián)合放化療在肺癌患者、尤其是晚期肺癌患者的治療中具有較高的臨床應用價值，而靶向miRNA治療劑的開發(fā)也已成為重要的抗癌補充策略及研究熱點。證據(jù)表明，一些關鍵miRNA的調(diào)節(jié)還可能逆轉(zhuǎn)致癌信號通路，并增強抗癌治療中的細胞毒性作用[84]。如miRNA-4262可通過調(diào)節(jié)PTEN進而參與NSCLC對紫杉醇的耐藥性，抑制其表達可能是克服NSCLC對紫杉醇耐藥性的一種方法[85]；miRNA-34a直接靶向MYCN可以使NSCLC細胞對順鉑敏感。由于miRNA調(diào)節(jié)參與惡性腫瘤發(fā)生及發(fā)展的信號通路中的非編碼序列和其他眾多基因的表達，故而使其承擔起了潛在的治療靶點角色。

EGFR-TKI等藥物在近些年晚期NSCLC患者已面臨嚴重的耐藥問題。部分患者EGFR-TKI獲得性耐藥機制除了與HER2擴增、MET擴增激活和PI3K突變等有關外，還與miRNA或其他的非編碼RNA有關[86]。這些證據(jù)使得與EGFR-TKI耐藥相關聯(lián)的一些miRNA有望成為NSCLC患者的潛在治療佐劑。如大多數(shù)晚期NSCLC患者對厄洛替尼產(chǎn)生了耐藥性，miRNA-125a-5p明顯降低了NSCLC患者EGFR mRNA的表達，且呈時間依賴性，導致細胞增殖明顯抑制和自發(fā)凋亡，miRNA-125a-5p對EGFR的抑制作用可有效觸發(fā)肺癌細胞凋亡，同時克服肺癌細胞對EGFR-TKI的耐藥性，miRNA-125a-5p可能是肺癌患者潛在的治療輔助劑[87]。

抗HER2的單克隆抗體是目前治療SCLC的又一重要靶向藥物。miRNA-125a和miRNA-125b可結(jié)合到HER2的mRNA 3'UTR，二者下調(diào)導致SCLC細胞中HER2上調(diào)。鈣黃素試驗證明順鉑等化療藥物在活體原位肺癌模型中抗腫瘤作用增強，通過調(diào)控miRNA-125-HER2途徑可作為曲妥珠單抗介導的SCLC細胞毒性的新型治療靶點[88]。

一些miRNA靶向的調(diào)控軸在肺癌放射治療中也起重要作用，并代表了NSCLC新的潛在治療靶點。如miRNA-21-5p的抑制可通過HMSH2促進NSCLC的放射敏感性[89-90]。miRNA-144-5p靶向激活ATF2并增強了NSCLC的放射敏感性，而miRNA-124可靶向抑制STAT3，進而抑制NSCLC生長并誘導所放射的細胞凋亡[91-92]。miRNA-339-5p靶向PRL-1提高肺癌細胞的放射敏感性[93]。

miRNA作為治療惡性腫瘤的靶點或潛在靶點，在臨床前和臨床實驗階段顯示出有希望的前景。但基于臨床環(huán)境中靶向miRNA治療的復雜性及其他問題，還需更多臨床前及臨床的前瞻性 研究。

九、總結(jié)與展望

目前已可在肺癌的不同階段使miRNA得到實時定量及定性檢測，并可作為肺癌的診斷、預后甚至預測性生物標志物。但要使miRNA完全進入臨床診斷階段仍存在諸多難點，如miRNA標志物的特異性及敏感性欠佳，檢測和定量技術也需要改善，從而能夠普及于臨床，且經(jīng)濟有效。

此外，miRNA還可被用于補充當前肺癌干預治療的策略。合成或干預特定的miRNA來抑制肺癌的發(fā)生、發(fā)展、耐藥性及放射抵抗性等。但是仍有許多障礙需要克服，諸如藥物輸送、特異性、脫靶效應、毒性介導及免疫學激活的不良事件等突出問題。

再者，某些miRNA在增強或抑制肺癌進展方面具有雙重作用，且不同信息分子與不同信號轉(zhuǎn)導途徑之間還存在交叉對話，構(gòu)成了復雜的調(diào)控及信號轉(zhuǎn)導網(wǎng)絡。因此，想要實現(xiàn)miRNA從臨床前階段到臨床中診治肺癌的徹底轉(zhuǎn)變，就需要對其在肺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及機制有更深入的認識及理解，并通過大規(guī)模的研究解決許多上述的關鍵性問題。