陳見南,占劉英,陳學軍,尹明偉,徐 軍,金小波
浙江大學醫(yī)學院附屬兒童醫(yī)院/國家兒童健康與疾病臨床醫(yī)學研究中心實驗檢驗中心輸血科,浙江杭州 310052
輸血是臨床治療的一種常見手段,輸血的安全也成為人們高度重視的問題。輸血前做交叉配血試驗和對獻血員與受血者的血型進行復核是保證輸血安全的重要手段,交叉配血的主側(cè)結(jié)果尤其應該引起醫(yī)務人員的重視。既往有研究報道,血清不規(guī)則抗體是引起成年人交叉配血困難的主要原因之一[1-3]。除此之外,ABO血型亞型也是不可忽視的一大影響因素[4]。兒童是特殊的群體,兒童患者的疑難交叉配血有其自身的特點。本研究通過收集本院近兩年中發(fā)現(xiàn)的兒童主側(cè)不相合的交叉配血病例,對其進行進一步血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查及鑒定、交叉配血試驗,分析其形成的原因及輸血策略,旨在保障兒科臨床科學、合理、安全、有效用血。
1.1一般資料 選取本院2018-2019年兒童交叉配血中發(fā)現(xiàn)的主側(cè)不合的疑難交叉配血病例77例,其中男44例、女33例;年齡1~28 d 35例,>28 d至1歲6例,>1~3歲12例,>3~7歲 14例,>7~14歲10例;新生兒溶血35例、血液病15例、自身免疫性貧血4例、系統(tǒng)性紅斑狼瘡1例、先天性心臟病4例、腫瘤5例、消化系統(tǒng)疾病6例、神經(jīng)系統(tǒng)疾病3例、呼吸系統(tǒng)疾病2例、腎臟疾病2例。交叉配血不合患兒的性別、年齡、疾病分布見表1。
1.2方法 血型鑒定采用微柱凝膠法和試管法進行,儀器與試劑包括ABO反定型紅細胞、單克隆抗-A、抗-B、抗-A1、抗-D血清(上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司);ABO血型正反定型鑒定卡、DiaMed ID-Incubator 37 SⅡ離心機(瑞士達亞美公司)??贵w篩查和鑒定采用微柱凝膠法和抗球蛋白試管法進行,試劑與儀器包括抗人球蛋白抗Cd3檢測試劑盒、抗人球蛋白抗C3d抗-IgG檢測試劑盒、抗體篩查譜細胞、單克隆抗-A1、抗-H、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e、抗-P1、抗-M、抗-N血清(上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司),抗人球蛋白卡(抗-IgG+C3d)、DiaMed ID-Incubator 37 SⅠ孵育器、DiaMed ID-Incubator 37 SⅡ離心機(瑞士達亞美公司)。所有操作均按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[5]進行。
1.3統(tǒng)計學處理 采用Excel軟件記錄和分析數(shù)據(jù)。
2.1不規(guī)則抗體鑒定結(jié)果與檢出率的比較 77例主側(cè)不合交叉配血患兒中,檢測出不規(guī)則抗體者占92.2%(71/77),其中同種抗體占81.7%(58/71),具體分布情況見表2;檢測出自身抗體者占檢測出不規(guī)則抗體者的18.3%(13/71),其中冷自身抗體3例,占23.1%(3/13),溫自身抗體占76.9%(10/13)。
表2 不規(guī)則抗體鑒定結(jié)果與檢出率的比較(n=6)
2.3疑難血型導致交叉配血不合的情況 77例主側(cè)不合的交叉配血中,血型不符者占7.8%(6/77),其中亞型占66.7%(4/6),造血干細胞占33.3%(2/6)。在血型不符導致的疑難交叉配血中,ABO亞型是主要原因,見表3。
表3 血型不符導致疑難交叉配血原因分析
在臨床工作中,經(jīng)常會遇見交叉配血主側(cè)不合的情況,如何通過合理的檢測手段來為患者提供相配的血液進行輸注是工作中的難點。本研究對近兩年交叉配血主側(cè)不合的各年齡階段的患兒分成5個年齡段進行統(tǒng)計,發(fā)現(xiàn)日齡1~28 d的患兒所占比例最高,為45.5%。
有許多因素可以引起交叉配血主側(cè)不相合,不規(guī)則抗體的存在是其中的一個重要因素。在本研究中,不規(guī)則抗體包括同種抗體與自身抗體。同種抗體占不規(guī)則抗體的81.7%,其主要是Rh血型系統(tǒng)抗體,占所有同種抗體的55.2%(32/58),其分布比例由高到低依次為抗-E、抗-D、抗-E合并抗-c、抗-D合并抗-C、抗-C,這與相關(guān)文獻報道基本相似[7-9]???E已成為Rh血型系統(tǒng)中檢出率最高的抗體。這表明對于需要多次輸血的患者,進行Rh表型檢測,可以有效地排除Rh抗體引起的主側(cè)不合交叉配血。MNS血型系統(tǒng)抗體在所有不規(guī)則抗體中排第二位,占37.9%,主要為抗-M。除去Rh血型系統(tǒng)與MNS血型系統(tǒng)以外,還檢測出抗-Jka與抗-Lea各1例,其分別屬于Kidd血型系統(tǒng)與Lewis血型系統(tǒng)。
在本次調(diào)查中,還有2例抗體未檢測出特異性,可能的原因有:(1)遺傳的變異,如抗-Bga、-Kna、-McCa、-Sla、-Yka、-Csa和-JMH,具有看不出特異性的模糊的反應格局是這些抗體的特征;(2)未列入抗原譜的抗原,標本可能與試劑制造商提供的抗原譜上沒有常規(guī)列出的抗原發(fā)生反應,如Ytb;(3)標本可能與大多數(shù)或全部O型紅細胞反應,但不會與自身ABO血型紅細胞反應,如抗-H、抗-IH或抗-LebH;(4)可能含有多種抗體;(5)因合子型、個體間差異、血液儲存的影響,抗原表達發(fā)生變化;(6)高頻抗原的抗體;(7)低頻抗原的抗體等[10]。與Rh血型系統(tǒng)抗體、MNS血型系統(tǒng)抗體比較,其他血型系統(tǒng)抗體和未鑒定出特異性抗體所占比例明顯較低。
與成人疑難交叉配血相比較,引起兒童交叉配血不合的不規(guī)則抗體種類較少,主要是Rh、MNS、Kidd、Lewis等血型系統(tǒng)抗體,故在平時工作中可以重點關(guān)注這類抗體。兒童交叉配血不合在不同疾病患兒中的分布也與成年人不同,主要存在于新生兒溶血病與血液病患兒中。
在不規(guī)則抗體陽性標本中,還有13例患者存在自身抗體,占18.3%。自身抗體的產(chǎn)生與疾病、藥物有關(guān)。對于冷自身抗體,可以先在37 ℃預熱后進行交叉配血,一般能去除大部分冷凝集素的干擾,若在37 ℃仍具有反應性,一般認為有臨床意義[11]。而對于存在溫自身抗體的患者而言,其血型鑒定和交叉配血存在一定的困難。如該患者能夠耐受貧血,則不建議輸血。若是在緊急情況下,可以篩選出主側(cè)凝集程度小于自身凝集程度的O型Rh同型的洗滌紅細胞進行輸注。
疑難血型也是造成交叉配血主側(cè)不合中的主要原因,占7.8%。其中主要是ABO血型亞型和異基因的造血干細胞移植等導致的。對于前者如要輸血可選擇同型紅細胞或O型洗滌紅細胞,異基因的造血干細胞移植患者可選擇O型洗滌紅細胞輸注。
綜上所述,臨床上如遇交叉配血主側(cè)不合,可通過三步分析法[11],在排除人為因素的前提下,確定配血不相合的原因,再通過試驗選擇相配的血液進行輸注。