紫花地丁全草化學(xué)成分研究

崔 雪，鄭重飛，李 瑩，喻 琨，王 悅，姚慶強(qiáng)*

?化學(xué)成分 ?

紫花地丁全草化學(xué)成分研究

崔 雪1，鄭重飛1，李 瑩1，喻 琨2，王 悅1，姚慶強(qiáng)1*

1. 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所，山東第一醫(yī)科大學(xué)，山東 濟(jì)南 250000 2. 青島大學(xué)紡織服裝學(xué)院智能穿戴技術(shù)研究中心，山東 青島 266071

研究紫花地丁全草的化學(xué)成分。采用硅膠、ODS、Sephadex LH-20凝膠和半制備型高效液相等柱色譜方法進(jìn)行分離純化，通過理化性質(zhì)結(jié)合NMR、MS等譜學(xué)數(shù)據(jù)分析鑒定化合物結(jié)構(gòu)。從紫花地丁95%乙醇提取物中分離得到21個(gè)化合物，分別鑒定為秦皮乙素-6--β--呋喃芹糖基-(1→2)-β--吡喃葡萄糖苷（1）、吲哚-3-甲酸乙酯（2）、脫氫地芰普內(nèi)酯（3）、濱蒿內(nèi)酯（4）、蒲公英苦素（5）、水楊苷（6）、丁香苷（7）、4-羥基-4-[3′-(β--葡萄糖基)亞丁基]-3,5,5-三甲基-2-環(huán)己烯-1-醇（8）、柑橘苷A（9）、(7,8)-二氫去氫二松柏醇-9--β--吡喃葡萄糖苷（10）、山柰素- 3--α--(4--乙?；?鼠李糖基-7--α--鼠李糖苷（11）、山柰酚-7--α--鼠李糖苷（12）、山柰酚-3--α--鼠李糖苷（13）、山柰酚-3--α--鼠李糖基-7--α--鼠李糖苷（14）、山柰酚-3--β--葡萄糖苷（15）、芹菜素（16）、(＋)-異地芰普內(nèi)酯（17）、尿苷（18）、腺苷（19）、6-羥基-香豆素-7--α--鼠李糖基-(1→6)--β--葡萄糖苷（20）、(7,8)-二氫去氫二松柏醇-4--β--吡喃葡萄糖苷（21）?；衔?為新化合物，命名為紫丁葡芹苷，2為新天然產(chǎn)物，5～11和18為首次從堇菜屬中分離得到，12和21為首次從紫花地丁中分離得到。

堇菜屬；紫花地??；香豆素苷；黃酮氧苷；秦皮乙素-6--β--呋喃芹糖基-(1→2)-β--吡喃葡萄糖苷；吲哚-3-甲酸乙酯；紫丁葡芹苷；蒲公英苦素；柑橘苷A

紫花地丁Makino為堇菜科堇菜屬植物，是一種多年生草本植物，具有清熱解毒、涼血消腫的功效，主要用于治療疔瘡腫毒、癰疽發(fā)背、丹毒、毒蛇咬傷等癥狀[1]。其用藥歷史悠久，始載于《千金方》?，F(xiàn)代藥理研究表明，紫花地丁具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗腫瘤、抗凝血等作用[2-4]。目前，已從該植物中發(fā)現(xiàn)香豆素、黃酮、木脂素、萜類、甾體、生物堿等類化學(xué)成分[5-9]。但關(guān)于紫花地丁活性成分的研究報(bào)道還較少，為進(jìn)一步豐富紫花地丁的化學(xué)結(jié)構(gòu)類型，完善其物質(zhì)基礎(chǔ)，探尋活性較好的化合物，本實(shí)驗(yàn)對(duì)紫花地丁全草95%乙醇水提取物的化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究，從中分離得到21個(gè)化合物，分別鑒定為秦皮乙素- 6--β--呋喃芹糖基-(1→2)-β--吡喃葡萄糖苷[aesculetin-6--β--apiofuranosyl-(1→2)-β--gluco-pyranoside，1]、吲哚-3-甲酸乙酯（ethyl indole-3- carboxylate，2）、脫氫地芰普內(nèi)酯（dehydrololiolide，3）、濱蒿內(nèi)酯（scoparone，4）、蒲公英苦素（taraxacin，5）、水楊苷（salicin，6）、丁香苷（syringin，7）、4-羥基-4-[3′-(β--葡萄糖基)亞丁基]-3,5,5-三甲基-2-環(huán)己烯-1-醇（()-4-hydroxy-4-[3′-(β--glucopyra- nosyloxy)butylidene]-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexen-l- one，8）、柑橘苷A（citroside A，9）、(7,8)-二氫去氫松柏醇-9--β--吡喃葡萄糖苷[(7,8)-dihydro- dehydrodiconiferyl alcohol-9--β--glucopyranoside，10]、山柰素-3--α--(4--乙?；?鼠李糖基-7--α--鼠李糖苷[kaempferol-3--α--(4--acetyl) rhamno-pyranoside-7--α--rhamnopyranoside，11]、山柰酚- 7--α--鼠李糖苷（kaempferol-7--α--rhamno- pyranoside，12）、山柰酚-3--α--鼠李糖苷（kaempferol-3--α--rhamnopyranoside，13）、山柰酚-3--α--鼠李糖基-7--α--鼠李糖苷（kaempferitrin，14）、山柰酚-3--β--葡萄糖苷（kaempferol 3--β--glucopyranoside，15）、芹菜素（apigenin，16）、(＋)-異地芰普內(nèi)酯 [(＋)- isololiolide，17]、尿苷（uridine，18）、腺苷（β-adenosine，19）、6-羥基-香豆素-7--α--鼠李糖基-(1→6)--β--葡萄糖苷[6-hydroxy coumarin-7--α--rhamnosyl- (1→6)--β--glucoside，20]、(7,8)-二氫去氫松柏醇-4--β--吡喃葡萄糖苷[(7,8)-dihydrodehydro- diconiferyl alcohol 4--β--glucopyranoside，21]。其中，化合物1為新化合物，2為新天然產(chǎn)物，5～11和18為首次從堇菜屬中分離得到，12和20為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

UltiMate 3000型高效液相色譜儀（美國(guó)Thermo Fisher公司），LC-20AR型制備液相色譜儀（日本Shimadzu公司），Avance 600型核磁共振儀（瑞士Bruker公司，TMS內(nèi)標(biāo)），X500 QTOF型高分辨質(zhì)譜儀（美國(guó)AB Sciex公司）。柱色譜硅膠（60～100、300～400，目青島海洋化工廠），柱色譜硅膠（200～300目，北京伊諾凱有限公司），薄層色譜硅膠預(yù)制板（煙臺(tái)市化學(xué)工業(yè)研究所），LH-20型羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20，40～63 μm，德國(guó)Merck公司），ODS柱色譜填料（ODS-A-HG，50 μm，YMC公司）。實(shí)驗(yàn)所用色譜甲醇為美國(guó)Tedia公司，其他提取分離試劑均為分析純（天津市富宇精細(xì)化工有限公司）。

紫花地丁全草于2018年3月采購(gòu)于湖北聚瑞中藥飲片有限公司，原產(chǎn)地為河南省平頂山市，經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)王厚偉副教授鑒定為堇菜科植物紫花地丁Makino的干燥全草。

2 提取與分離

取紫花地丁干燥全草5 kg，用95%乙醇水回流提取3次，每次2 h，提取液合并后濾過，將濾液減壓濃縮得總浸膏600 g?？偨嘟?jīng)硅膠柱色譜（60～100目）分離，以石油醚、二氯甲烷、二氯甲烷-甲醇（50∶1）、二氯甲烷-甲醇（10∶1）、二氯甲烷-甲醇（5∶1）、二氯甲烷-甲醇（2∶1）、甲醇作為流動(dòng)相梯度洗脫，共得到7個(gè)流分Fr. A～G。

Fr. B經(jīng)硅膠柱色譜（200～300目）分離，以石油醚-二氯甲烷-甲醇（100∶0∶0、20∶1∶0、10∶1∶0、5∶1∶0、2∶1∶0、1∶1∶0、0∶100∶0、0∶10∶1、0∶2∶1、0∶0∶100）梯度洗脫，得到7個(gè)組分Fr. B-1～B-7。Fr. B-2經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，得到4個(gè)組分Fr. B-2-1～B-2-4。Fr. B-2-3經(jīng)Sephadex LH-20和ODS柱色譜分離，得到9個(gè)組分Fr. B-2-3-1～B-2-3-9。Fr. B-2-3-1經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（30∶70）洗脫，得到化合物3（R＝65 min，14.8 mg）。Fr. B-2-3-2經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（35∶75）洗脫，得到化合物4（R＝75 min，1.9 mg）。Fr. B-2-3-5經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（50∶50）洗脫，得到化合物5（R＝65 min，5.6 mg）。Fr. B-2-4經(jīng)300～400目硅膠柱色譜分離，再經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（60∶40）洗脫，得到化合物2（R＝49 min，1.7 mg）。Fr. B-7經(jīng)硅膠柱色譜（300～400目）分離，以二氯甲烷-甲醇（100∶0、100∶1、50∶1、20∶1、10∶1、5∶1、2∶1、0∶100）梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜（TLC）分析合并洗脫液，得到15個(gè)組分Fr. B-7-1～B-7-15。Fr. B-7-5經(jīng)Sephadex LH-20和ODS柱色譜分離，再經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（29∶71）洗脫，得到化合物17（R＝37 min，22.7 mg）。

Fr. C經(jīng)200～300目硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇（100∶0、500∶1、50∶1、20∶1、10∶1、5∶1、2∶1、0∶100）梯度洗脫，得到9個(gè)組分Fr. C-1～C-9。Fr. C-2經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜以及半制備型HPLC分離，以甲醇-水（60∶40）洗脫，得到化合物16（R＝50 min，7.8 mg）。

Fr. D經(jīng)硅膠柱色譜（200～300目）分離，以二氯甲烷-甲醇（50∶1、20∶1、10∶1、7∶1、5∶1、1∶1、0∶100）梯度洗脫，得到9個(gè)組分Fr. D-1～D-9。Fr. D-7經(jīng)Sephadex LH-20和ODS柱色譜分離，得到15個(gè)組分Fr. D-7-1～D-7-15。Fr. D-7-2經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（10∶90）洗脫，得到化合物19（R＝70 min，34.4 mg）和6（R＝90 min，15.8 mg）。Fr. D-7-3經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（20∶80）洗脫，得到化合物7（R＝60 min，6.8 mg）。Fr. D-7-5經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（30∶70）洗脫，得到化合物8（R＝47 min，6.0 mg）和9（R＝50 min，15.2 mg）。Fr. D-7-7經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（37∶63）洗脫，得到化合物10（R＝71 min，2.9 mg）。Fr. D-7-9經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（40∶60）洗脫，得到化合物15（R＝100 min，2.8 mg）。Fr. D-7-10經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（48∶52）洗脫，得到化合物13（R＝56 min，5.0 mg）。Fr. D-7-13經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（50∶50）洗脫，得到化合物11（R＝60 min，11.2 mg）。Fr. D-7經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜和反復(fù)ODS柱色譜分離，最后經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜純化，得到化合物14（18.5 mg）。

Fr. E經(jīng)200～300目硅膠柱色譜分離，以二氯甲烷-甲醇（100∶0、100∶1、50∶1、20∶1、10∶1、5∶1、2∶1、1∶1、0∶100）梯度洗脫，得到8個(gè)組分Fr. E-1～E-8。Fr. E-3經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜分離，重結(jié)晶純化得到化合物12（22.9 mg）。Fr. E-5經(jīng)Sephadex LH-20和ODS柱色譜分離，得到12個(gè)組分Fr. E-5-1～E-5-12。Fr. E-5-2經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（9∶91）洗脫，得到化合物18（R＝23 min，13.4 mg）。Fr. E-5-4經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（20∶80）洗脫，得到化合物20（R＝59 min，7.7 mg）。Fr. E-5-5經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（20∶80）洗脫，得到化合物1（R＝77 min，8.9 mg）。Fr. E-5-8經(jīng)半制備型HPLC分離，以甲醇-水（35∶65）洗脫，得到化合物21（R＝46 min，6.5 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

表1 化合物1的1H-、13C-NMR的波譜數(shù)據(jù) (600/150 MHz, CD3OD)

化合物2：白色固體。ESI-MS/: 190.08 [M＋H]+, 212.06 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 8.58 (1H, s, NH), 8.19～8.15 (1H, m, H-2), 7.91 (1H, d,= 3.0 Hz, H-4), 7.41～7.39 (1H, m, H-7), 7.26～7.25 (2H, m, H-5, 6), 4.38 (2H, q,= 7.1 Hz, H-9), 1.41 (3H, t,= 7.1 Hz, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 165.5 (C-8), 136.3 (C-7a), 131.1 (C-2), 126.0 (C-3a), 123.4 (C-6), 122.2 (C-4), 121.8 (C-5), 111.7 (C-7), 109.4 (C-3), 60.0 (C-9), 14.8 (C-10)。經(jīng)SciFinder檢索，化合物2在文獻(xiàn)中通過合成得到[11]，因此其作為1個(gè)天然產(chǎn)物首次從植物中分離得到，是新的天然產(chǎn)物，結(jié)構(gòu)鑒定為吲哚-3-甲酸乙酯。

化合物3：黃色油狀物。ESI-MS/: 195.10 [M＋H]+, 217.08 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 5.89 (1H, s, H-7), 2.92 (1H, dd,= 13.6, 1.8 Hz, H-4a), 2.64 (1H, d,= 13.6 Hz, H-2a), 2.44 (1H, dd,= 14.3, 1.9 Hz, H-4b), 2.39 (1H, d,= 14.3 Hz, H-2b), 1.55 (3H, s, H-11), 1.39 (3H, s, H-9), 1.26 (3H, s, H-10)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 204.7 (C-3), 178.5 (C-8), 170.9 (C-6), 114.7 (C-7), 86.3 (C-5), 54.2 (C-4), 53.8 (C-2), 36.0 (C-1), 29.9 (C-11), 26.9 (C-9), 26.2 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[12]，故鑒定化合物3為脫氫地芰普內(nèi)酯。

化合物4：無色針狀結(jié)晶（甲醇）。ESI-MS/: 207.06 [M＋H]+, 229.04 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 7.60 (1H, d,= 9.4 Hz, H-4), 6.83 (1H, s, H-5), 6.82 (1H, s, H-8), 6.26 (1H, d,= 9.4 Hz, H-3), 3.93 (3H, s, 6-OCH3), 3.90 (3H, s, 7-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 161.6 (C-2), 153.1 (C-7), 150.2 (C-9), 146.6 (C-6), 143.5 (C-4), 113.8 (C-3), 111.6 (C-10), 108.2 (C-5), 100.2 (C-8), 56.6 (6-OCH3), 56.6 (7-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[13]，故鑒定化合物4為濱蒿內(nèi)酯。

化合物5：黃色粉末。ESI-MS/: 243.09 [M＋H]+, 265.08 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 6.50 (1H, s, H-6), 6.25 (1H, s, H-3), 5.06 (1H, dd,= 12.7, 3.3 Hz, H-8), 2.96 (1H, dd,= 16.8, 3.3 Hz, H-9a), 2.77 (1H, dd,= 16.8, 12.7 Hz, H-9b), 2.50 (3H, s, H-14), 2.24 (3H, s, H-15), 1.99 (3H, s, H-13)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 194.4 (C-2), 173.7 (C-12), 161.7 (C-5), 154.9 (C-7), 147.6 (C-10), 144.0 (C-4), 134.5 (C-3), 128.6 (C-1), 124.5 (C-11), 111.3 (C-6), 77.2 (C-8), 41.5 (C-9), 22.3 (C-14), 14.4 (C-15), 9.1 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[14]，故鑒定化合物5為蒲公英苦素。

化合物6：黃色結(jié)晶（甲醇）。ESI-MS/: 309.09 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.35 (1H, dd,= 7.5, 1.5 Hz, H-6), 7.29 (1H, dt,= 7.5, 1.5 Hz, H-4), 7.20 (1H, d,= 7.5 Hz, H-3), 7.06 (1H, dt,= 7.5, 0.9 Hz, H-5), 4.93 (1H, d,= 7.4 Hz , H-1′), 4.76 (1H, d,= 12.9 Hz, H-7b), 4.60 (1H, d,= 12.9 Hz, H-7a), 3.90 (1H, dd,= 12.2, 2.1 Hz, H-6′b), 3.72 (1H, dd,= 12.2, 5.4 Hz, H-6′a), 3.56～3.42 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 156.9 (C-2), 131.9 (C-1), 130.3 (C-6), 130.2 (C-4), 124.0 (C-5), 117.0 (C-3), 103.0 (C-1′), 78.1 (C-3′), 77.7 (C-5′), 74.9 (C-2′), 71.3 (C-4′), 62.4 (C-6′), 60.9 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[15]，故鑒定化合物6為水楊苷。

化合物7：白色結(jié)晶（甲醇）。ESI-MS/: 395.13 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.77 (2H, s, H-3, 5), 6.56 (1H, d,= 15.8 Hz, H-7), 6.35 (1H, dt,= 15.8, 5.6 Hz, H-8), 4.89 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1), 4.24 (2H, dd,= 5.6, 1.4 Hz, H-9), 3.87 (6H, s, 2×OCH3), 3.80 (1H, dd,= 12.0, 2.4 Hz, H-6′b), 3.68 (1H, dd,= 12.0, 5.2 Hz, H-6′a), 3.21～3.50 (4H, m, H-2′～5′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 154.5 (C-2, 6), 136.0 (C-1), 135.4 (C-4), 131.4 (C-7), 130.2 (C-8), 105.6 (C-1′), 105.5 (C-3, 5), 78.5 (C-3′), 78.0 (C-5′), 75.9 (C-2′), 71.5 (C-4′), 63.7 (C-9), 62.7 (C-6′), 57.2 (2×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[16]，故鑒定化合物7為丁香苷。

化合物8：黃色油狀物。ESI-MS/: 387.18 [M＋H]+, 409.16 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.86 (3H, m, H-2, 7, 8), 4.42 (1H, m, H-9), 4.34 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1′), 3.85 (1H, dd,= 11.7, 1.9 Hz, H-6′a), 3.62 (1H, dd,= 11.7, 5.5 Hz, H-6′b), 3.23～3.35 (3H, m, H-3′～5′), 3.17 (1H, m, H-2′), 2.52 (1H, d,= 17.0 Hz, H-6b), 2.15 (1H, d,= 16.9 Hz, H-6a), 1.92 (3H, s, H-13), 1.29 (3H, d,= 6.4 Hz, H-10), 1.04 (6H, d,= 3.7 Hz, H-11, 12)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 201.3 (C-1), 167.4 (C-3), 135.4 (C-8), 131.7 (C-7), 127.3 (C-2), 102.9 (C-1′), 80.2 (C-4), 78.3 (C-5′), 78.2 (C-3′), 77.4 (C-9), 75.4 (C-4′), 71.8 (C-2′), 63.0 (C-6′), 50.8 (C-6), 42.6 (C-5), 24.8 (C-12), 23.6 (C-11), 21.3 (C-10), 19.7 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[17]，故鑒定化合物8為4-羥基- 4-[3′-(β--葡萄糖基)亞丁基]-3,5,5-三甲基-2-環(huán)己烯-1-醇。

化合物9：黃色油狀物。ESI-MS/: 409.16 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.89 (1H, s, H-8), 4.52 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1′), 4.32 (1H, m, H-3), 2.20 (3H, s, H-10), 1.47 (3H, s, H-12), 1.38 (3H, s, H-13), 1.16 (3H, s, H-11)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 213.1 (C-7), 200.9 (C-9), 119.2 (C-6), 101.5 (C-8), 98.8 (C-1′), 78.9 (C-5), 78.7 (C-3′), 77.9 (C-5′), 75.4 (C-2′), 71.8 (C-4′), 63.9 (C-3), 63.0 (C-6′), 50.0 (C-2), 48.2 (C-4), 37.2 (C-1), 32.7 (C-11), 30.2 (C-13), 26.8 (C-10), 26.8 (C-12)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[18]，故鑒定化合物9為柑橘苷A。

化合物11：黃色粉末。ESI-MS/: 621.13 [M＋H]+, 643.11 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.77 (2H, d,= 8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.96 (2H, d,= 8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.73 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.47 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.56 (1H, s, H-1′′′), 5.53 (1H, br s, H-1′′), 4.83 (1H, t,= 2.0 Hz, H-4′′), 4.21 (1H, br s, H-2′′), 4.02 (1H, s, H-2′′′), 3.84 (2H, m, H-3′′, 5′′′), 3.60 (1H, m, H-3′′′), 3.47 (1H, d,= 9.5 Hz, H-4′′′), 3.26 (1H, m, H-5′′), 2.04 (3H, s, COCH3), 1.27 (3H, d,= 6.2 Hz, H-6′′′), 0.79 (3H, d,= 6.3 Hz, H-6′′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 179.8 (C-4), 172.5 (COCH3-4′′), 163.7 (C-7), 163.2 (C-5), 162.0 (C-4′), 160.1 (C-2), 158.3 (C-9), 136.0 (C-3), 132.2 (C-2′, 6′), 122.5 (C-1′), 116.7 (C-3′, 5′), 107.7 (C-1′′), 102.7 (C-10), 100.8 (C-6), 100.0 (C-1′′′), 95.8 (C-8), 75.0 (C-4′′), 73.7 (C-4′′′), 72.2 (C-5′′′), 71.9 (C-2′′), 71.8 (C-2′′′), 71.5 (C-3′′′), 70.2 (C-3′′), 69.8 (C-5′′), 21.1 (4′′-COCH3), 18.2 (C-6′′′), 17.7 (C-6′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[20]，故鑒定化合物11為山柰素- 3--α-L-(4--乙?；?鼠李糖基-7--α-L-鼠李糖苷。

化合物12：黃色針狀結(jié)晶（甲醇）。ESI-MS/: 433.07 [M＋H]+, 455.05 [M＋Na]+。1H-NMR(600 MHz, DMSO-6): 12.47 (1H, s, 5-OH), 10.15 (1H, s, 4′-OH), 9.53 (1H, s, 3-OH), 8.08 (2H, d,= 9.0 Hz, H-2′, 6′), 6.93 (2H, d,= 9.0 Hz, H-3′, 5′), 6.82 (1H, d,= 2.1 Hz, H-8), 6.42 (1H, d,= 2.1 Hz, H-6), 5.54 (1H, d,= 1.5 Hz, H-1′′), 1.13 (3H, d,= 6.2 Hz, rha-CH3)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 176.1 (C-4), 161.4 (C-7), 160.4 (C-5), 159.4 (C-4′), 155.8 (C-9), 147.5 (C-2), 136.1 (C-3), 129.7 (C-2′, 6′), 121.6 (C-1′), 115.5 (C-3′, 5′), 104.7 (C-10), 98.9 (C-6), 98.4 (C-1′′), 94.4 (C-8), 71.6 (C-4′′), 70.3 (C-3′′), 70.1 (C-2′′), 69.9 (C-5′′), 18.0 (C-6′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[21-22]，故鑒定化合物12為山柰酚-7--α--鼠李糖苷。

化合物13：黃色結(jié)晶（甲醇）。ESI-MS/: 433.08 [M＋H]+，455.06 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.77 (2H, d,= 8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.94 (2H, d,= 8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.38 (1H, d,= 1.9 Hz, H-8), 6.21 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6), 5.38 (1H, d,= 1.6 Hz, H-1′′′), 4.22 (1H, dd,= 3.4, 1.6 Hz, H-2′′), 3.71 (1H, dd,= 9.1, 3.4 Hz, H-3′′), 3.34 (2H, m, H-4′′, 5′′), 0.92 (3H, d,= 5.7 Hz, H-6′′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 179.8 (C-4), 166.2 (C-7), 163.4 (C-5), 161.8 (C-4′), 159.4 (C-2), 158.7 (C-9), 136.4 (C-3), 132.0 (C-2′, 6′), 122.8 (C-1′), 116.7 (C-3′, 5′), 106.0 (C-10), 103.7 (C-1′′), 100.0 (C-6), 94.9 (C-8), 73.3 (C-4′′), 72.3 (C-3′′), 72.2 (C-5′′), 72.1 (C-2′′), 17.8 (C-6′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[23]，故鑒定化合物13為山柰酚-3--α--鼠李糖苷。

化合物14：黃色粉末。ESI-MS/: 579.14 [M＋H]+, 601.12 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.81 (2H, d,= 8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.95 (2H, d,= 8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.74 (1H, d,= 2.1 Hz, H-8), 6.48 (1H, d,= 2.1 Hz, H-6), 5.56 (1H, s, H-1′′′), 5.40 (1H, s, H-1′′), 1.26 (3H, d,= 6.2 Hz, H-6′′′), 0.94 (3H, d,= 5.7 Hz, H-6′′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 180.0 (C-4), 163.7 (C-7), 163.2 (C-5), 161.9 (C-4′), 160.0 (C-2), 158.3 (C-9), 136.6 (C-3), 132.2 (C-2′, 6′), 122.6 (C-1′), 116.7 (C-3′, 5′), 107.7 (C-1′′), 103.7 (C-10), 100.7 (C-6), 100.0 (C-1′′′), 95.8 (C-8), 73.7 (C-4′′′), 73.3 (C-4′′), 72.3 (C-5′′′), 72.3 (C-2′′), 72.2 (C-3′′), 72.1 (C-5′′), 71.9 (C-2′′′) , 71.5 (C-3′′′), 18.2 (C-6′′′), 17.8 (C-6′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[24]，故鑒定化合物14為山柰酚-3--α--鼠李糖基-7--α--鼠李糖苷。

化合物15：黃色針狀結(jié)晶（甲醇）。ESI-MS/: 449.10 [M＋H]+, 471.08 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 8.05 (2H, d,= 8.7 Hz, H-2′, 6′), 6.89 (2H, d,= 8.7 Hz, H-3′, 5′), 6.39 (1H, s, H-8), 6.19 (1H, s, H-6), 5.24 (1H, d,= 7.4 Hz, H-1′′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 179.6 (C-4), 167.0 (C-7), 163.2 (C-5), 161.7 (C-4′), 159.1 (C-2), 158.7 (C-9), 135.6 (C-3), 132.4 (C-2′, 6′), 123.0 (C-1′), 116.2 (C-3′, 5′), 105.6 (C-10), 104.3 (C-1′′), 100.3 (C-6), 95.1 (C-8), 78.6 (C-5′′), 78.2 (C-3′′), 75.9 (C-2′′), 71.5 (C-4′′), 62.8 (C-6′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[25]，故鑒定化合物15為山柰酚-3--β--葡萄糖苷。

化合物16：黃色粉末。ESI-MS/: 271.04 [M＋H]+, 293.02 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 12.95 (1H, s, 5-OH), 7.92 (2H, d,= 8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.92 (2H, d,= 8.8 Hz, H-3′, 5′), 6.76 (1H, s, H-3), 6.48 (1H, d,= 2.0 Hz, H-8), 6.19 (1H, d,= 2.0 Hz, H-6)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 181.7 (C-4), 164.2 (C-7), 163.7 (C-2), 161.4 (C-4′), 161.2 (C-5), 157.3 (C-9), 128.4 (C-2′, 6′), 121.2 (C-1′), 116.0 (C-3′, 5′), 103.7 (C-10), 102.8 (C-3), 98.9 (C-6), 94.0 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[26]，故鑒定化合物16為芹菜素。

化合物18：白色粉末。ESI-MS/: 267.05 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 8.04 (1H, d,= 8.1 Hz, H-6), 5.94 (1H, d,= 4.7 Hz, H-1′), 5.78 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 4.25 (1H, t,= 5.0 Hz, H-3′), 4.21 (1H, t,= 5.0 Hz, H-2′), 4.07 (1H, m, H-4′), 3.89 (1H, dd,= 12.3, 2.7 Hz, H-5′b), 3.79 (1H, dd,= 12.3, 3.2 Hz, H-5′a)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 166.3 (C-4), 152.5 (C-2), 142.8 (C-6), 102.8 (C-5), 90.7 (C-1′), 86.3 (C-4′), 75.7 (C-3′), 71.3 (C-2′), 62.3 (C-5′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[28-29]，故鑒定化合物18為尿苷。

化合物19：白色粉末。ESI-MS/: 268.09 [M＋H]+, 290.07 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-6): 8.34 (1H, s, H-8), 8.13 (1H, s, H-2), 7.34 (2H, s, 6-NH2), 5.87 (1H, d,= 6.2 Hz, H-1′), 5.43 (2H, m, 2′, 5′-OH), 5.19 (1H, s, 3′-OH), 4.60 (1H, m, H-2′), 4.14 (1H, s, H-3′), 3.96 (1H, q,= 3.4 Hz, H-4′), 3.67 (1H, dt,= 12.1, 3.4 Hz, H-5′a), 3.55 (1H, m, H-5′b)；13C-NMR (150 MHz, DMSO-6): 156.2 (C-6), 152.4 (C-2), 149.0 (C-4), 139.9 (C-8), 119.4 (C-5), 87.9 (C-1′), 85.9 (C-4′), 73.4 (C-2′), 70.7 (C-3′), 61.7 (C-5′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[30]，故鑒定化合物19為腺苷。

化合物20：白色粉末。ESI-MS/: 487.12 [M＋H]+, 509.10 [M＋Na]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.86 (1H, d,= 9.5 Hz, H-4), 7.35 (1H, s, H-8), 7.04 (1H, s, H-5), 6.31 (1H, d,= 9.5 Hz, H-3), 4.90 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1′), 4.73 (1H, brs, H-1′′), 1.26 (3H, d,= 6.2 Hz, H-6′′)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 164.5 (C-2), 150.9 (C-7), 149.5 (C-9), 146.2 (C-6), 146.0 (C-4), 115.5 (C-10), 114.6 (C-3), 114.0 (C-5), 105.8 (C-8), 103.5 (C-1′), 102.1 (C-1′′), 77.9 (C-3′), 77.5 (C-5′), 74.9 (C-2′), 73.8 (C-4′′), 72.6 (C-3′′), 72.2 (C-2′′), 72.1 (C-4′), 70.0 (C-5′′), 68.0 (C-6′), 18.2 (C-6′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[31-32]，故鑒定化合物20為6-羥基-香豆素-7--α--鼠李糖基-(1→6)--β--葡萄糖苷。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Chemical constituents from whole herbs of

CUI Xue1, ZHENG Zhong-fei1, LI Ying1, YU Kun2, WANG Yue1, YAO Qing-qiang1

1. Institute of Materia Medica, Shandong First Medical University &Shandong Academy of Medical Sciences, Jinan 250000, China 2. Research Center for Intelligent and Wearable Technology, College of Textiles and Clothing, Qingdao University, Qingdao 266071, China

To investigate the chemical constituents from whole herbs of.The chemical constituents were isolated and purified by silica gel, ODS column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography and semi-preparative HPLC. The structures of the isolated compounds were identified by physicochemical properties, NMR and MS spectroscopic methods.A total of 21 compounds were isolated from the 95% ethanol extract of, and their structures were identified as aesculetin 6--β--apiofuranosyl-(1→2)-β--glucopyranoside (1), ethyl indole-3-carboxylate (2), dehydrololiolide (3), scoparone (4), taraxacin (5), salicin(6), syringin (7), ()-4-hydroxy-4-[3′-(β--glucopyranosyloxy) butylidene]-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexen-l-one (8), citroside A (9), (7,8)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol-9--β-- glucopyranoside (10), 3--α-L-(4--acetyl)rhamnopyranosyl kaempferol 7--α-L-rhamnopyranoside (11), kaempferol-7--α-- rhamnopyranoside (12), kaempferol-3--α-L-rhamnopyranoside (13), kaempferitrin (14), kaempferol-3--β--glucopyranoside (15), apigenin (16), (+)-isololiolide (17), uridine (18), β-adenosine (19), 6-hydroxycoumarin-7--α--rhamnosyl-(1→6)--β--glucoside (20), and (7,8)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4--β--glucopyranoside (21).Compound 1 is obtained as a new compound, named as vioyegluapiside and compound 2 as a new natural product, with compounds 5-11 and 18 isolating from the genus Viola for the first time and with compounds 12 and 21 from plantfor the first time.

genus Viola;Makino; coumarin glycoside; flavone-glycosides; aesculetin-6--β--apiofuranosyl-(1→2)-β--glucopyranoside; ethyl indole-3-carboxylate; vioyegluapiside; taraxacin; citroside A

R284.1

A

0253 - 2670(2021)04 - 0917 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.04.002

2020-11-28

山東省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（魯渝科技協(xié)作）項(xiàng)目（2019LYXZ026）；山東省農(nóng)業(yè)科技園區(qū)產(chǎn)業(yè)提升工程項(xiàng)目（2019YQ033）；山東第一醫(yī)科大學(xué)學(xué)術(shù)提升計(jì)劃（2019LJ003）

崔 雪，女，碩士研究生，從事天然藥物化學(xué)研究。E-mail: cuixue_sunny@163.com

姚慶強(qiáng)，男，博士，博士生導(dǎo)師。Tel: (0531)82595867 E-mail: yao_imm@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]