阿爾茨海默病伴抑郁患者外周血炎性因子、25羥維生素D水平的研究*

潘名志 徐曉文 任秀乾 楊勇 杜向東

阿爾茨海默?。ˋD）是常見老年病，它既不能有效預(yù)防也不能被治愈?；颊叱哂卸嘀卣J知功能缺陷和社會功能減退等核心特征外，還會伴發(fā)某些精神性癥狀，抑郁是AD患者最常見的精神心理行為癥狀之一[1，2]。AD和抑郁癥通常被視為兩種不同的精神疾病，但兩者都存在如認知功能缺陷、執(zhí)行功能降低、軀體化癥狀等諸多共同特征。此外，在AD和抑郁癥兩種疾病患者中均存在某些大腦區(qū)域的變化，但健康人卻無此變化[3]。這些發(fā)現(xiàn)提示：阿爾茨海默病和抑郁癥的病因可能存在相似之處，諸如外周血液中促炎細胞因子水平升高及維生素D水平降低等危險因素[4，5]。鑒于此，本研究檢測AD患者血清中炎性因子和25-OH-VD水平，旨在探討其水平與認知功能缺陷及抑郁的相關(guān)性。

對象與方法

1 研究對象 選取蘇州大學(xué)附屬廣濟醫(yī)院2016年1月～2019年6月住院治療的AD患者46例。入組標(biāo)準[6，7]：①符合美國國立老化研究所和阿爾茨海默病協(xié)會AD診斷標(biāo)準；②簡易智力狀態(tài)檢查量表（MMSE）評分＜24分、臨床癡呆評定量表評分（CDR）≥ 1、Hachinski缺血指數(shù)量表（HIS）評分＜4分；③無內(nèi)分泌疾病，入組前后未服用影響其代謝的藥物；④根據(jù)臨床表現(xiàn)和檢查排除其他原因所致的癡呆患者。采用漢密頓抑郁量表（HAMD）對入組資料進行篩選，HAMD評分＞17設(shè)為AD伴抑郁組，共20例；HAMD評分≤7設(shè)為AD無抑郁組，共26例。同時隨機選取我院同期健康志愿者設(shè)為正常對照組，共24例。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準（蘇廣倫審2015-017號），患者及其監(jiān)護人同意，并簽署知情同意書。

2 研究方法

2.1 細胞因子的測定：以上患者均空腹于清晨采血3 mL，37 ℃水浴30 min后，以3000 r/min離心15min，將分離的血清立即轉(zhuǎn)移到兩個1 mL凍存管中，置于-70℃冰箱中儲存供測定用。采用ELISA法測定白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子（TNF-α）的水平，試劑購自Boster Biological Technology公司。嚴格遵照說明書要求進行操作，以標(biāo)準管濃度水平為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，建立標(biāo)準曲線，根據(jù)各樣本的吸光度值計算出各個因子濃度水平。

2.2 25-OH-VD的測定：試劑購自Abbott公司，采用ARCHITECT-iSR型化學(xué)發(fā)光分析儀進行測定，測定過程嚴格按照儀器標(biāo)準操作規(guī)程執(zhí)行。

3 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)應(yīng)用IBM SPSS23.0軟件進行分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準差（±s）表示，計數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗，三組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t法，兩變量間相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 三組受試對象一般資料比較 三組研究對象性別、年齡、受教育年限及體重指數(shù)均無顯著性差異（P＞0.05）。（P＞0.05），MMSE評分各組之間差異具有顯著性（P＜0.05）。結(jié)果見表1。

表1 三組受試對象一般資料比較

2 三組研究對象血清學(xué)指標(biāo)比較 與正常對照組比較，AD伴抑郁組、AD無抑郁組IL-1β、IL-6、TNF-α水平明顯增高，25-OH-VD水平明顯降低，各組間差異顯著（P＜0.05）。與AD無抑郁組比較，AD伴抑郁組IL-6、TNF-α水平升高，25-OH-VD水平降低,兩組間差異顯著（P＜0.05）。結(jié)果見表2。

表2 三組研究對象血清學(xué)指標(biāo)比較（±s）

表2 三組研究對象血清學(xué)指標(biāo)比較（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05；與AD無抑郁組比較，#P＜0.05

組別 IL-1β（pg/mL） IL-6（pg/mL） TNF-α（pg/mL） 25-OH-VD（nmol/L）正常對照組 11.7±3.4 7.7±2.6 64.1±23 44.7±9.9 AD無抑郁組 23.5±4.6* 11.5±3.6* 94.2±22* 34.7±8.3*AD伴抑郁組 25.2±5.4* 16.8±4.1*# 122.8±32*# 26.1±6.7*#F值 62.395 37.960 28.947 26.451 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 MMSE評分與IL-1β、IL-6、TNF-α、25-OH-VD相關(guān)性分析 AD無抑郁組MMSE評分與IL-1β水平呈負相關(guān)（r=-0.433，P＜0.05）；與IL-6、TNF-α、25-OH-VD水平之間無顯著相關(guān)性（r=-0.087、-0.219、0.205，P＞0.05）。AD伴抑郁組MMSE評分與IL-β、IL-6、TNF-α水平呈負相關(guān)（r=-0.437、-0.371、-0.532，P＜0.05），與25-OH-VD水平呈正相關(guān)（r=0.512，P＜0.05）。結(jié)果見表3。

4 25-OH-VD濃度與IL-1β、IL-6、TNF-α相關(guān)性分析 AD無抑郁組25-OH-VD與IL-1β水平呈負相關(guān)（r=-0.418，P＜0.05）；與IL-6、TNF-α水平無顯著相關(guān)性（r=-0.198；-0.202，P＞0.05)。AD伴抑郁組25-OH-VD水平與IL-1β、IL-6、TNF-α水平均呈負相關(guān)（r=-0.452、-0.441、-0.471，P＜0.05）。結(jié)果見表4。

表3 MMSE評分與IL-1β、IL-6 、TNF-α、25-OH-VD相關(guān)性分析

表4 25-OH-VD與IL-1β、IL-6 、TNF-α相關(guān)性分析

討 論

大量研究提示癡呆與抑郁相關(guān)，炎癥反應(yīng)機制在其病理生理變化中起著關(guān)鍵作用，并與其他機制相互交織，參與疾病的發(fā)展。活化的小膠質(zhì)細胞和星形膠質(zhì)細胞引起的炎癥反應(yīng)是AD病理學(xué)的一個重要因素，這可從AD患者大腦的尸檢分析和動物模型的研究中得到證實[8]。這種炎癥反應(yīng)可能是由可溶性淀粉樣β肽或淀粉樣纖維引起的，導(dǎo)致小膠質(zhì)細胞的活性增加，產(chǎn)生干擾素、趨化因子、白介素、蛋白酶抑制劑和神經(jīng)毒性產(chǎn)物，引起神經(jīng)元損傷丟失和神經(jīng)細胞凋亡，促進了神經(jīng)退行性病變的發(fā)展進程[9，10]。RAPPMA研究發(fā)現(xiàn)：抑郁能加劇AD患者海馬體中的炎癥斑塊形成和纖維纏結(jié)數(shù)量增加[11]。這表明抑郁會增加細胞中炎癥因子的表達，導(dǎo)致抗炎反應(yīng)和免疫抑制的減少。外周血中的炎癥因子可以改變血-腦屏障的滲透性，促進炎癥因子進入大腦，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)促炎反應(yīng)增加，而中樞神經(jīng)系統(tǒng)細胞因子可引起突觸特性、神經(jīng)傳遞和下丘腦-垂體-腎上腺軸活性的改變，以及不同腦區(qū)的神經(jīng)傳遞和β肽代謝變化[12]，這些都可能導(dǎo)致AD和抑郁癥的發(fā)生。此外促炎細胞因子水平增高可干擾5-羥色胺正常代謝，并且降低突觸可塑性和海馬神經(jīng)再生功能，從而導(dǎo)致引起AD的β-淀粉樣蛋白沉積，因此慢性炎癥可能是抑郁促進AD發(fā)展的原因[13]。在本研究中,我們發(fā)現(xiàn)AD的IL-1β、IL-6、TNF-α水平明顯高于正常對照組，考慮到外周血炎性因子過度表達對相關(guān)的情緒障礙和認知缺陷具有重要的影響[12]，隨即我們評估了AD患者的MMSE評分與血清IL-1β、IL-6、TNF-α之間的關(guān)系。結(jié)果顯示：AD無抑郁組MMSE評分與IL-6、TNF-α水平無顯著相關(guān)性；AD伴抑郁組MMSE評分與IL-6、TNF-α水平呈負相關(guān)，且AD伴抑郁組MMSE評分顯著低于AD無抑郁組。這提示抑郁可能促進炎性因子的過度釋放，從而導(dǎo)致AD患者認知功能缺陷。

維生素D（VD）是類固醇衍生物.可以通過1，25-（OH）2D3形式與VD受體的特定靶器官結(jié)合并發(fā)揮其生物學(xué)功能，具有神經(jīng)保護、減少氧化應(yīng)激損傷、促進β-淀粉樣蛋白清除等作用[14]。VD參與人體新陳代謝，1-25（OH）2D3是最重要的循環(huán)方式，故臨床上常以外周血1-25（OH）2D3的水平來評價患者VD的攝入、存儲和轉(zhuǎn)化情況。流行病學(xué)病例對照和基于大量人群的隨訪研究表明，人體低維生素D水平除了可能會影響神經(jīng)可塑性、神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)換外，還可能會影響其他對情緒、行為、記憶和認知有明顯影響的腦功能分子機制[15，16]。相關(guān)研究文獻表明：血液中25-OH-VD低水平不但與認知能力下降和阿爾茨海默病密切相關(guān)[17]，還與抑郁癥有關(guān)[18]。本研究發(fā)現(xiàn)：AD伴抑郁組25-OH-VD水平最低，較正常對照組降低近50%，且與MMSE評分呈正相關(guān)，即AD患者25-OH-VD水平越低，認知功能缺陷就越嚴重。本研究還發(fā)現(xiàn)：AD伴抑郁組25-OH-VD水平與IL-6、TNF-α之間有密切的負相關(guān)性，而正常對照組和AD無抑郁組中則未發(fā)現(xiàn)這種相關(guān)性，這可能因為維生素D具有免疫調(diào)節(jié)活性，通過抑制p38-MAP激酶途徑和VDR介導(dǎo)的相互作用和抑制NF-κB信號傳導(dǎo)，進而抑制單核細胞和巨噬細胞中炎性因子的產(chǎn)生，如IL-6、TNF-α等[12，19]。因此，AD患者25-OH-VD水平的顯著降低可能會導(dǎo)致患者體內(nèi)的IL-6、TNF-α水平的升高。此外AD伴抑郁組患者25-OH-VD水平降低、炎性因子IL-6、TNF-α水平升高，與AD伴抑郁組患者認知MMSE評分降低有著密切的關(guān)聯(lián)，提示臨床上可嘗試通過補充維生素D或用促炎細胞因子的特異性受體拮抗劑進行干預(yù)治療。

綜上所述，AD伴抑郁的患者外周血炎性細胞因子IL-6、TNF-α水平明顯升高，25-OH-VD水平明顯降低，MMSE評分與IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈負相關(guān)，與25-OH-VD水平呈正相關(guān)。這與AD患者的認知有著緊密的聯(lián)系。因此，外周血炎性因子和25-OHVD水平在AD伴抑郁患者臨床診療中有著重要的意義，可能為今后AD的診斷和治療帶來新的思路。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突