茶子油面霜制備及其祛痤瘡功效評(píng)價(jià)

程金生，曾雪琪，陳妍霏，萬維宏，柯錦瀅

（1.韶關(guān)學(xué)院英東食品學(xué)院，廣東 韶關(guān) 512005；2.嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，廣東 梅州 514031）

油茶（Camellia oleiferaAbel.）是中國特有的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益俱佳的木本油料樹種，享有“長壽油”“油中之王”“東方橄欖油”等美譽(yù)［1］。目前中國是全球油茶樹分布最廣的區(qū)域，國家發(fā)改委、財(cái)政部、國家林業(yè)局出臺(tái)的《全國油茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展規(guī)劃（2009—2020年）》明確表示要把油茶產(chǎn)業(yè)培育成興林富民的支柱產(chǎn)業(yè)［2］。

油茶果實(shí)果皮較厚，包裹的油茶子呈球形、桃形和不規(guī)則形狀，油茶子油簡稱茶油，是從油茶成熟種子中提取的純天然植物油［3］，色澤淺黃或金黃，品質(zhì)純凈，澄清透明，主要由油酸、亞油酸和少量的飽和脂肪酸組成，其中單不飽和脂肪酸——油酸的含量超過橄欖油，油酸與人體皮膚脂成分接近，易于被皮膚吸收，對(duì)皮膚具有保水、潤膚、護(hù)膚及殺菌作用。茶油中維生素E含量也非常豐富，高達(dá)669.25 μg/g，比一般植物油含量高［4］。研究發(fā)現(xiàn)，茶油中富含油酸、茶多酚和維生素E，有很強(qiáng)的滲透性，與皮膚的親和性好，不容易氧化變質(zhì)，無毒，是化妝品用的植物油之一［5］。據(jù)茶油抗紫外輻射研究發(fā)現(xiàn)，茶油在310 nm波長處有較強(qiáng)的紫外吸收能力，不會(huì)使表皮細(xì)胞的蛋白質(zhì)變性，是一種天然的防曬用品，而且其維生素E的含量高于橄欖油，素有“東方橄欖油”之稱，具有抗衰老、抗氧化功能［6］。

目前，國內(nèi)茶油主要用于食用方面，茶油尤其以茶子毛油為原料的化妝品深加工產(chǎn)品或相關(guān)研究較少。而天然茶油中的獨(dú)特天然活性成分比市場(chǎng)上出售的許多化妝品更天然、親近皮膚，因此將茶油應(yīng)用于化妝品方面具有一定的可行性，應(yīng)用價(jià)值高［7，8］，有望延長茶子毛油產(chǎn)業(yè)鏈，提高附加值。本研究以粵北地區(qū)豐富的茶子毛油為研究對(duì)象，以精制后的茶油為主要成分研究面霜的制備方法，并評(píng)價(jià)其祛痤瘡功效。

1 材料與方法

1.1 主要材料與試劑

茶子毛油，購自深圳未名湖科技有限公司；檸檬酸（分析純），購自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；去離子水，由河南新源科技有限公司提供；活性白土、活性炭，購自天津市登科化學(xué)試劑有限公司；十六醇，購自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；丙三醇（分析純），購自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；三乙醇胺、卵磷脂（分析純），購自喬科化學(xué)東莞有限公司；透明質(zhì)酸、蜂蠟、EDTA-二鈉（分析純），購自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；凱松KN-15B，購自中化化工有限責(zé)任公司；金黃色葡萄球菌151014，粵江食藥監(jiān)械。

1.2 主要儀器

HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州金壇宏華儀器廠）、DZF-6050型真空干燥箱（上海合恒儀器設(shè)備有限公司）、TG16-WS型離心機(jī)（湘潭湘儀儀器有限公司）、BSC-1100ⅡA2-X型 BioBace生物安全柜（濟(jì)南樂瑞醫(yī)療器械有限公司）、DHP-9082型電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）、YXQ-LS-70A型立式壓力蒸汽滅菌鍋（上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司）、JCS-300型電子天平（常州市雙固頓達(dá)機(jī)電科技有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 茶子毛油精制 通過試驗(yàn)研究，確定化妝品用茶油的最佳精煉工藝為：采用中高溫水化和檸檬酸脫膠工藝，水化溫度為60℃，檸檬酸首次加入量為油重的3%，持續(xù)升溫水化，待油溫至95℃時(shí)，加入油重4%的檸檬酸和與油溫相近的熱水，待油中產(chǎn)生顆粒后靜置分層，上層即為脫膠油；選擇堿煉工藝，將毛油加熱到75～85℃，加入8%～10%同溫度的軟水，充分混合，離心分離水相和油相，重復(fù)2次洗滌后，將油在0.1 MPa的真空、溫度90～95℃條件下干燥20 min，待油溫降至50℃以下時(shí)取出，即得堿煉脫酸油，脫酸后酸價(jià)為0.24，達(dá)到國家一級(jí)茶油標(biāo)準(zhǔn)［9-11］。采用常壓吸附脫色工藝，活性白土和活性炭的用量各占茶油質(zhì)量的3%，用量通過脫色正交試驗(yàn)確定，在120℃下脫色30 min；在0.1 MPa下，140℃時(shí)通入少量水蒸氣，升溫至240℃脫臭2 h；采用傳統(tǒng)分提工藝，-5℃下冷凍48 h后離心分離，分離出上層液即為最終產(chǎn)品［5，12］。

1.3.2 精制茶子毛油的GC-MS分析 色譜柱為HP-5彈性石英毛細(xì)管柱（25 m×0.25 mm×0.33μm）；升溫程序?yàn)槌跏紲囟?00℃，以3℃/min升至240℃；汽化溫度為 240℃；進(jìn)樣量為 1.0 μL；溶劑延遲時(shí)間為 3 min；載氣流量（He）為 2 mL/min；分流比為20∶1。離子源為電子轟擊（EI）；離子源溫度為200℃；電子能量為 70 eV；發(fā)射電流為 34.6 μA；電子倍增器電壓為1 200 V；接口溫度為240℃；質(zhì)量掃描范圍為m/z20～500 amu。

1.3.3 面霜的制備方法 將備用的油相基底的精制茶油、蜂蠟、十六醇、卵磷脂混合，溶解于精制茶油中，以3～8℃/min的升溫速度將其加熱至70～90℃，進(jìn)行混溶，成為油相基底初料，備用。將備用的水相基底料的一半加入到備用的油相基底初料中，攪拌、乳化、均質(zhì)5 min，得水油混合料，備用；將備用的油相基底原料與2%透明質(zhì)酸混合后，以5℃/min的升溫速度將其加熱至80℃，進(jìn)行混溶，接著與備用的水相基底料的另一半混合，在50 r/min的轉(zhuǎn)速下攪拌、乳化、均質(zhì)5 min，得油水混合料，備用；將備用的水油混合料與油水混合料混勻后，攪拌冷卻至常溫，即成茶油面霜。

1.3.4 面霜的抗炎試驗(yàn) 國內(nèi)外對(duì)茶油在皮膚科的臨床應(yīng)用和試驗(yàn)研究較少，但在臨床應(yīng)用中觀察到其具有良好的抗炎作用。尋常痤瘡是青少年面部最常見的皮膚病，是一種毛囊皮脂腺的慢性炎癥，由于皮脂腺管與毛孔的阻塞，使皮脂外流不暢所致。引起毛囊孔阻塞的原因有幾個(gè)方面，一方面是肌膚類型為油性，此種人分泌油脂易阻塞毛囊口；另一方面青春期男性雄性激素分泌增多，這種激素可以促進(jìn)皮脂腺細(xì)胞的增長，使得皮脂腺分泌皮脂的作用加強(qiáng)，因此皮脂增多。此外，人的皮膚上還存在一些寄生菌，當(dāng)皮膚皮脂增多時(shí)，這些菌如痤瘡棒狀桿菌、卵圓形糠秕孢子菌、金黃色葡萄球菌釋放出溶解皮脂的脂酶，使脂轉(zhuǎn)變成游離脂肪酸，這些酸性的產(chǎn)物引起毛囊及毛囊周圍發(fā)生炎癥，引起痤瘡皮損。本試驗(yàn)以金黃色葡萄球菌為抗炎試驗(yàn)對(duì)象作對(duì)照試驗(yàn)，所用試藥為制得的茶油面霜以及市面上具有消炎祛痘作用的Lionpair獅王祛痘膏，其中的主要抗炎祛痤瘡成分為皮考布洛芬［13-16］。

1.3.5 護(hù)膚試驗(yàn) 選取2所不同高校的72位平均年齡為21±1歲的志愿者作為試驗(yàn)對(duì)象，其中男性36位，女性36位。將72位志愿者隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，試驗(yàn)組和對(duì)照組人數(shù)均為36人。臨床輕重分級(jí)采用pillsbury分類法：①Ⅰ度（輕度），黑頭粉刺散發(fā)及多發(fā)，炎癥皮疹散發(fā)；②Ⅱ度（中度），Ⅰ度+潛在性膿皰，炎癥性皮疹數(shù)增加，局限于面部；③Ⅲ度（重度），Ⅱ度+深在炎癥性皮疹，發(fā)生于面部、頸部、胸背部；④Ⅳ度（重度聚合性），Ⅳ度+囊腫，易形成疤痕，上半身多見。對(duì)照組常規(guī)護(hù)理：皮膚清潔、干燥，避免摩擦，避免日光暴曬，有癢感時(shí)不用手撓抓，不用刺激性強(qiáng)的洗滌品，忌辛辣和刺激性食物，多吃新鮮蔬菜和水果，對(duì)照組不使用含祛痘消炎成分的護(hù)膚品，護(hù)理周期28 d；試驗(yàn)組除常規(guī)護(hù)理外，添加使用茶油面霜這一步驟，護(hù)理周期28 d，在護(hù)理周期內(nèi)，每2周觀察一次直至護(hù)理周期結(jié)束，以初次未使用面霜時(shí)皮損程度與護(hù)理周期結(jié)束最后一次觀察的皮損程度做比較［17］。

試驗(yàn)對(duì)象的皮膚評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)按衛(wèi)生部皮膚藥物臨床研究進(jìn)行療效分級(jí)判定：①痊愈為皮損全部消退＞90%；②顯效為皮損消退60%～89%；③有效為皮損消退20%～59%；④無效為皮損消退＜20%。痊愈加顯效合并計(jì)算為有效率。本次試驗(yàn)志愿者中，男性志愿者輕度痤瘡20例，中度痤瘡16例；女性志愿者輕度痤瘡10例，中度痤瘡26例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，試驗(yàn)組和對(duì)照組的性別年齡和病程分級(jí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶子毛油精制前后對(duì)比

茶子毛油精制前后對(duì)比如圖1所示，精制前的茶子毛油（圖1左）顏色為黃色，液體較為渾濁；精制后的茶子毛油（圖1右）顏色接近無色，液體較精制前更澄清。

圖1 茶子毛油精制前（左）后（右）對(duì)比

2.2 精制茶子毛油的GC-MS結(jié)果

精制茶子毛油經(jīng)氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（GCMS）進(jìn)行成分分析，分析結(jié)果見圖2，經(jīng)過對(duì)比NIST圖譜庫后，得到精制后茶子毛油的主要成分（表1）。結(jié)果表明，精制茶子毛油主要含有油酸、油酸酯、角鯊烯等成分，其中順式油酸在精制茶子毛油中含量最高，為74.05%，具有抗炎癥、抗氧化功效，且可以作為自由基攻擊的標(biāo)靶，減輕或者修復(fù)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對(duì)細(xì)胞膜不飽和脂肪酸的損傷；角鯊烯成分具有保濕、抗自由基、消炎殺菌的作用，在精制茶子毛油中含量為0.84%。茶油按上述工藝精煉后，最終得到的精制茶油主要指標(biāo)為：相對(duì)密度0.910 6（20/4℃）、含水量 0.03%、酸價(jià) 0.20、碘價(jià) 78.4，在 0℃保持澄清200 h以上，油酸含量81.91%，已經(jīng)達(dá)到化妝品用油的標(biāo)準(zhǔn)。

圖2 精制茶子毛油GC-MS分析

表1 精制茶子毛油的主要成分

2.3 面霜的制備

制備茶油面霜所用的主要原料有精制茶油、十六醇、丙三醇、去離子水。通過試驗(yàn)，得出最佳配比為去離子水∶丙三醇∶十六醇∶精制茶油=25∶5∶5∶3。其中，去離子水、丙三醇、三乙醇胺為水相，油相基底的原料為精制茶油、蜂蠟、十六醇、卵磷脂混合，溶解于茶油中，以 3～8℃/min的升溫速度將其加熱至70～90℃，進(jìn)行混溶，成為油相基底初料，水相基底料的50%加入到備用的油相基底初料中，攪拌、乳化、均質(zhì)5 min，得水油混合料，將水油混合料與油水混合料混勻后，攪拌冷卻至常溫，即成面霜。綜合面霜志愿者試驗(yàn)和抗痤瘡功效驗(yàn)證試驗(yàn)，獲得最優(yōu)化配方為去離子水50 g、精制茶油6 g、丙三醇10 g、十六醇 10 g、三乙醇胺 0.5 g、卵磷脂 1 g、蜂蠟 1 g、EDTA-二鈉 0.2 g、凱松 5 d、透明質(zhì)酸 1.5 g。

2.4 面霜的祛痤瘡功效評(píng)價(jià)研究

2.4.1 面霜的抗炎試驗(yàn) 面霜抗炎試驗(yàn)中藥液抑菌的試驗(yàn)結(jié)果見表2。由表2可知，所制得的面霜抑菌圈大小與具有抗炎祛痘作用的藥膏抑菌圈大小相近，所制得的茶油面霜具有一定的抑菌效果。

表2 藥液抑菌的試驗(yàn)結(jié)果

2.4.2 皮膚反應(yīng) 試驗(yàn)組與對(duì)照組療效比較見表3。由表3可知，試驗(yàn)組痊愈及顯效共計(jì)28例，有效率為77.78%（痊愈加顯效合并計(jì)算為有效率）；對(duì)照組痊愈及顯效共計(jì)4例，有效率為11.11%。2組的差異經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）。表3的痊愈率對(duì)比數(shù)據(jù)也可以直觀地觀察到本研究所制備的抗痤瘡面霜具有較好的抗痤瘡功效。試驗(yàn)組所有被測(cè)36個(gè)樣本中，痊愈人數(shù)達(dá)13人，占比高達(dá)36.11%。而對(duì)照組痊愈人數(shù)只有1人（占比僅為2.78%），應(yīng)可視為自然痊愈。

表3 試驗(yàn)組與對(duì)照組療效比較（n=36）

3 小結(jié)與討論

根據(jù)茶子毛油精制的試驗(yàn)結(jié)果可得，經(jīng)脫膠、脫酸、脫色、脫臭、分提等工藝精制后的茶子毛油各項(xiàng)指標(biāo)均符合化妝品用油標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)過相關(guān)試驗(yàn)，得出最佳脫色方案為各占毛油重3%的活性白土與活性炭混合脫色。在脫色過程中用玻璃棒不斷攪拌，以達(dá)到最佳脫色效果。在毛油真空脫臭過程中，因?yàn)檎婵彰摮羲铚囟葹?40℃，為防止毛油爆沸噴濺，在真空脫臭前需事先干燥毛油，以防毛油爆沸噴濺造成油分損失。本研究通過試驗(yàn)得出茶子面霜的最佳配方，所制得的面霜符合相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)面霜的抗炎祛痘效果經(jīng)面霜抗炎試驗(yàn)和護(hù)膚試驗(yàn)可得，所制得的面霜具有良好的抗炎作用，具有較好的應(yīng)用前景，也可以較好地延長油茶產(chǎn)業(yè)鏈。