非酒精性脂肪性肝病患者血清SDC4變化及其臨床意義探討*

夏淑晶，張莉莉，張秀梅，趙根寶，周松偉，羅欲承，陳紅芹，王子華，成鳳干，范建高

既往研究發(fā)現(xiàn)，與炎癥(脂聯(lián)素)、細(xì)胞凋亡(細(xì)胞角蛋白18片段)和氧化應(yīng)激(細(xì)胞色素P450)[4]相關(guān)的血清標(biāo)記物可以用于非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)的無創(chuàng)診斷[1-4]。由于此類指標(biāo)的敏感性和特異性還不高，并不能滿足臨床的需求。多配體蛋白聚糖-4(syndecan-4，SDC4)是一種表達(dá)在細(xì)胞表面的蛋白聚糖，屬于硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulfate proteoglycans，HSPGs)類的多配體蛋白聚糖家族成員之一。SDC4廣泛分布于多種組織細(xì)胞中，通過參與調(diào)節(jié)細(xì)胞因子間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的粘附等功能，在體質(zhì)量控制、糖脂代謝、炎癥反應(yīng)、損傷修復(fù)、血管生成等病理生理過程中發(fā)揮作用[5-8]。本研究檢測了健康體檢成人血清SDC4水平，分析了其變化的影響因素以及在診斷NAFLD方面的臨床應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2019年6月～12月在江蘇省興化市人民醫(yī)院參加健康體檢的人群。NAFLD的入選標(biāo)準(zhǔn)為無飲酒史或平均每周飲酒量小于 210 g(女性為小于140 g)，腹部超聲檢查符合彌漫性脂肪肝的影像學(xué)特征。排除病毒性肝炎、酒精性肝病、藥物性肝損害、自身免疫性肝病、肝豆?fàn)詈俗冃?、全胃腸外營養(yǎng)、甲狀腺功能亢進(jìn)或減退、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征、嚴(yán)重的感染、心肺功能不全、多囊卵巢綜合征、處于妊娠期、哺乳期或口服避孕藥的女性或存在可以導(dǎo)致脂肪肝的特定疾病[9]。本研究已經(jīng)興化市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過。

1.2 臨床資料的收集 詢問并記錄研究對象的性別、年齡、既往病史、個(gè)人史(吸煙、飲酒、用藥等)、家族史，并測量身高、體質(zhì)量、腰圍、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、計(jì)算體質(zhì)指數(shù)(BMI)= 體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)。

1.3 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測 使用XE-2100 全自動血細(xì)胞分析儀測定血液紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù)和血紅蛋白(HB)含量(美國貝克曼庫爾特公司)；使用AU-2700 型全自動生化分析儀及其配套試劑盒檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、尿酸(UA)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、載脂蛋白A1(APOA1)、載脂蛋白B(APOB)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG美國貝克曼庫爾特公司)；采用免疫層析法檢測糖化血紅蛋白(HbA1c，日本東曹株式會社))；使用ADVIA DX3檢測儀和采用化學(xué)發(fā)光法檢測空腹胰島素(FINS，美國貝克曼庫爾特公司)，依據(jù)公式計(jì)算HOMA穩(wěn)態(tài)模型檢測的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR = FBG(mmol/L)× FINS(mIU/L)/22.5)；采用ELISA法檢測血清SDC4含量(美國 BM公司)。

1.4 肝臟超聲檢查 常規(guī)行腹部超聲檢查。彌漫性脂肪肝的診斷及其嚴(yán)重程度評估依據(jù)： (1)肝臟近場回聲彌漫性增強(qiáng)，強(qiáng)于脾臟和腎臟，遠(yuǎn)場回聲逐漸衰減；(2)肝內(nèi)管道結(jié)構(gòu)顯示不清；(3)肝臟輕至中度腫大，邊緣圓鈍；(4)彩色多普勒血流顯像提示肝內(nèi)彩色血流信號減少或不易顯示，但肝內(nèi)血管走形正常；(5)肝右葉包膜及橫隔回聲顯示不清或不完整。具備上述第1項(xiàng)和第2～4項(xiàng)中任一項(xiàng)者為輕度脂肪肝，具備上述第1項(xiàng)和第2～4項(xiàng)中兩項(xiàng)者為中度脂肪肝，具備上述第1項(xiàng)和第2～4項(xiàng)中兩項(xiàng)及第5項(xiàng)者為重度脂肪肝[10]。

2 結(jié)果

2.1 基本資料 在209例體檢成人中，發(fā)現(xiàn)NAFLD組102例(48.8%)，男性69例，女性33例；平均年齡為52.7±11.0歲；健康人107例，男性41例，女性66例；平均年齡為51.3±7.3歲。NAFLD組男性患者占比、BMI、腰圍、RBC、HB、ALT、AST、GGT、UA、TC、TG、FBG、HbAlc、FINS和HOMA-IR等指標(biāo)顯著高于健康人，而ApoA1和HDL-C則顯著低于健康人(P<0.05，表1)。

2.2 血清SDC4含量與NAFLD病變程度的關(guān)系 重度脂肪性肝病患者血清SDC水平顯著高于輕度患者(P< 0.05，表2)。

2.3 影響NAFLD發(fā)生的相關(guān)因素分析 Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，BMI、腰圍、RBC、HB、ALT、UA、TG、FBG和SDC4與NAFLD發(fā)生獨(dú)立相關(guān)(表3)。

2.4 血清 SDC4對NAFLD的預(yù)測價(jià)值 根據(jù)ROC分析，SDC4診斷NAFLD的曲線下面積(AUC)為0.917 (95%可信區(qū)間為0.878～0.956，P<0.001)，診斷的截?cái)帱c(diǎn)為8.45 ng/mL，敏感度為84.3%，特異度為87.9%(圖1)。

3 討論

NAFLD不僅導(dǎo)致肝硬化和肝細(xì)胞癌，還與肥胖、糖尿病、代謝綜合征互為因果并共同促進(jìn)心血管疾病和肝外惡性腫瘤的發(fā)生。肝活檢是診斷NAFLD和判斷疾病嚴(yán)重性的“金標(biāo)準(zhǔn)”[11，12]，因?yàn)橹两袢匀狈硐氲难鍖W(xué)標(biāo)記物無創(chuàng)診斷NAFLD及評估肝脂肪變、炎癥損傷和纖維化的程度。

SDC是由核心蛋白和糖胺多糖組成的跨膜HSPG，共有四個(gè)亞型[13]。蛋白聚糖共同結(jié)構(gòu)的胞外區(qū)為硫酸肝素鏈樣結(jié)構(gòu)，能夠與細(xì)胞外配體結(jié)合，從細(xì)胞表面水解脫落轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇艿牧蛩岣嗡匦?yīng)子，脫落的可溶性SDC分子可由旁分泌或自分泌的形式調(diào)節(jié)細(xì)胞的生物學(xué)活性，或作為競爭性抑制劑產(chǎn)生負(fù)反饋，調(diào)節(jié)多種病理生理過程14]。由于脫落的可溶性SDC胞外區(qū)經(jīng)釋放進(jìn)入血液循環(huán)，在外周血液中可被檢測出來，所以可作為某些疾病診斷及預(yù)后判斷的標(biāo)記物[15]。已發(fā)現(xiàn)血液SDC1檢測可以用于慢性病毒性肝炎患者肝纖維化的無創(chuàng)診斷，還被發(fā)現(xiàn)有助于判斷多發(fā)性骨髓瘤、宮頸癌、肺癌等惡性腫瘤患者的預(yù)后16]。SDC4的 rs1981429位點(diǎn)在健康兒童中被發(fā)現(xiàn)與其腹部內(nèi)臟脂肪增加有關(guān)17]，在成人中則被發(fā)現(xiàn)與血漿甘油三酯升高密切相關(guān)。高脂飲食喂養(yǎng)雌性Sdc4-/-小鼠比野生型小鼠有較高的體脂含量和胰島素抵抗，以及更高的血液甘油三酯和葡萄糖水平[18]。然而，至今鮮見有關(guān)血清SDC4與NAFLD關(guān)系的相關(guān)研究報(bào)道。本研究采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測了209例無過量飲酒史且無其他肝病的健康體檢成人的血清SDC4含量，并通過肝臟超聲檢查判斷有無脂肪肝及其程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)102例NAFLD患者。與既往研究結(jié)果相似，男性、BMI、血脂、血糖及胰島素抵抗等指標(biāo)與NAFLD關(guān)系密切，提示肥胖、高脂血癥、高血糖、低HDL-C、IR是NAFLD的危險(xiǎn)因素[19, 20]。本研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD組血清SDC4水平顯著高于健康人，提示SDC4可能亦與NAFLD有關(guān)。亞組分析發(fā)現(xiàn)，血清SDC水平隨著肝臟脂肪含量的增加而呈顯著增高趨勢，提示血清SDC4水平與NAFLD患者肝脂肪變程度有關(guān)。有分析發(fā)現(xiàn)，血清SDC4水平與健康體檢成人BMI、腰圍、血糖、血脂及HOMA-IR等呈正相關(guān)，而肥胖、高血脂、高血糖都是代謝綜合征的重要組分，提示血清SDC4水平同樣可以反映代謝心血管危險(xiǎn)因素，可能是血清SDC4水平與NAFLD及嚴(yán)重程度相關(guān)的原因。我們經(jīng)Logistic逐步回歸分析顯示，血清SDC4水平與健康體檢成人NAFLD的獨(dú)立相關(guān)，提示血清SDC4增高可能獨(dú)立于傳統(tǒng)的代謝心血管危險(xiǎn)因素參與NAFLD的發(fā)病。本研究經(jīng)受試者工作特征曲線研究發(fā)現(xiàn)，血清SDC4水平大于8.45 ng/mL對無傳統(tǒng)損肝因素的健康體檢成人脂肪肝診斷有較高的敏感性和特異性，提示血清SDC4水平可以作為獨(dú)立標(biāo)志物用于無創(chuàng)診斷及評估NAFLD。

表1 兩組基本資料比較

表2 不同程度脂肪性肝病患者血清SDC4水平比較

表3 影響NAFLD發(fā)生的Logistic回歸分析

圖1 血清SDC4 診斷NAFLD的ROC 曲線