氣相色譜法測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷類農(nóng)藥方法優(yōu)化

□ 謝 茵 新疆伊犁州奎屯市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局

蔬菜是人們生活飲食的必需品，但目前食品安全問題依然比較嚴(yán)重，農(nóng)藥殘留是社會(huì)各界人士關(guān)注的重點(diǎn)。有機(jī)磷農(nóng)藥可有效去除蔬菜中病蟲害，具有非常廣泛的應(yīng)用。但對(duì)人體健康、生態(tài)環(huán)境等會(huì)造成較大危害。開展蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)，是保證蔬菜安全的主要舉措。我國對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量有嚴(yán)格限制，并且其限量逐年降低，對(duì)測(cè)定的速度、精度、可靠性等提出了更高的要求?；诖?，應(yīng)用氣相色譜法測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷類農(nóng)藥就顯得尤為必要。

1 測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷類農(nóng)藥的現(xiàn)狀和意義

我國有機(jī)磷農(nóng)藥使用量非常大，占全球總有機(jī)磷農(nóng)藥使用量的1/3，占全國農(nóng)藥總用量的1/2，受多種因素的共同影響，如果有機(jī)磷農(nóng)藥污染問題異常嚴(yán)峻，不但會(huì)破壞周圍的生態(tài)環(huán)境，而且會(huì)給食品安全構(gòu)成較大的安全隱患。因此，大力發(fā)展測(cè)定精度高、效率高、針對(duì)性強(qiáng)的蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)定方法，對(duì)保護(hù)生態(tài)環(huán)境，提升食品安全等皆有重要意義。常用的測(cè)定方法有氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法、高效液相色譜法等。其中氣相色譜法是目前應(yīng)用最廣泛，操作最便捷的蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)定方法，但在測(cè)定過程中，進(jìn)樣口溫度、柱箱溫度、升溫程序等參數(shù)指標(biāo)不同，得到的結(jié)果也不相同，甚至存在較大差距。因此，優(yōu)化氣相色譜法測(cè)定方法，得到分析有機(jī)磷農(nóng)藥的最優(yōu)條件就有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。

2 氣相色譜法測(cè)定過程分析

2.1 合理選擇儀器和試劑

選擇GC—2014c 氣相色譜儀，由日本島津提供，同時(shí)配備相應(yīng)的FPD 檢測(cè)器；DB—1 毛細(xì)管，由美國安捷倫公司提供；甲基對(duì)硫磷，二嗪磷，亞胺硫磷，殺冥硫磷，伏殺硫磷等標(biāo)準(zhǔn)樣品100 mg/L，由當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研所提供；丙酮作為液相色譜純。

2.2 測(cè)定方法

處理樣品。將選擇的蔬菜樣品切碎，稱取10.0 g 混合均勻，放置到50 mL 離心管中，然后加入25 mL 乙酸乙酯，充分振蕩后浸泡2 h，樣液經(jīng)盛有10 g 無水硫酸鈉的濾紙過濾之后，放入100 mL 比色管中，再用25 mL乙酸乙酯分3 次加入離心管中，洗脫3次，然后再將濾液合并放入比色管中，放置到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中恒溫45 ℃，濃縮到1 ～2 mL，再用乙酸乙酯定容到5 mL，在漩渦混合器上充分混勻，并用0.45 μm 濾膜過濾后供氣相色譜檢測(cè)。

配制農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液。選擇具有代表性的有機(jī)磷農(nóng)藥甲基對(duì)硫磷，二嗪磷，亞胺硫磷，殺冥硫磷，伏殺硫磷等標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，其濃度為100 mg/L 1 mL，放入容量為10 mL 的容量瓶中，加入丙酮定容，貯存在—18 ℃冰箱中。再配置混合有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，選擇濃度為10 mg/L 的甲基對(duì)硫磷，二嗪磷，亞胺硫磷，殺冥硫磷，伏殺硫磷各0.25 mL 放入10 mL 容量瓶中，用丙酮進(jìn)行定容，這五種農(nóng)藥的濃度都是0.25 mg/L[1]。

色譜條件。GC—2014c 氣相色譜儀，色譜柱大小為30 mm×0.25 mm×0.25 μm，進(jìn)樣口溫度為240 ℃，檢測(cè)器溫度為250 ℃，柱子溫度程序升溫為70 ℃，保持1 min，以30 ℃/min上升到220 ℃，保持6 min，再以10 ℃/min 升到240 ℃，保持2 min，載氣設(shè)置為氮?dú)?5 mL/min，氫氣80 mL/min，空氣為120 mL/min。其中進(jìn)樣量為1 μL，不分流進(jìn)樣。定量方法選擇的峰面積外標(biāo)發(fā)定量。

檢測(cè)儀器穩(wěn)定之后，連續(xù)注入數(shù)針有機(jī)磷混合標(biāo)樣溶液，并計(jì)算各組分的相對(duì)響應(yīng)值，等相鄰兩針的相對(duì)響應(yīng)值變化小于1.5%之后，再按照溶劑、混合標(biāo)樣溶液、樣品溶液、添加收樣品溶液的順序進(jìn)行測(cè)定，通過外標(biāo)法進(jìn)行定量分析[2]。

3 探討和結(jié)果

3.1 線性、檢出限、定量限

將配制好的濃度為0.05、0.1、0.5、1.0 mg/kg 的混合標(biāo)樣用氣相色譜儀分析，每個(gè)標(biāo)樣進(jìn)樣3 次，每次進(jìn)樣1 μL，取平均值繪制7個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸方程。在0.04 ～0.8 μg/mL線性范圍中，甲基對(duì)硫磷、二嗪磷、亞胺硫磷、殺冥硫磷與伏殺硫磷5 種有機(jī)磷農(nóng)藥的線性相關(guān)系良好，其中R2都 在0.999 ～1.0。檢 出 限 數(shù)值在0.001 ～0.02 mg/kg。再通過10 倍噪聲值，就可以計(jì)算出最低定量限，最低定量限數(shù)值在0.004 ～0.05 mg/kg，5 種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限、定量如表1 所示。

通過表1 可看出，在此種優(yōu)化條件下，氣相色譜在測(cè)定蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥時(shí)具有很高的靈敏度、線性良好，無論是檢出限還是定量限都能夠達(dá)到國家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)[3]。

3.2 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)

需要采取空白加標(biāo)法分析，在0.04、0.12、0.4 mg/kg 濃 度 下，進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，且每個(gè)濃度至少做3 個(gè)平行實(shí)驗(yàn)，測(cè)定結(jié)果表明，5 種有機(jī)磷農(nóng)藥的回收率范圍在83.4%～113.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.17%～6.95%，滿足國家固定蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)定的要求。

表1 5 中有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限、定量限表

4 結(jié)語

綜上所述，本文結(jié)合理論實(shí)踐，分析了氣相色譜法測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷類農(nóng)藥方法優(yōu)化，分析結(jié)果表明，采用進(jìn)樣口溫度控制在230 ℃左右，檢測(cè)器溫度控制在250 ℃左右；二階程序升溫分離來測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法，線性相關(guān)系數(shù)、最低檢出限、最低定量限等都滿足要求。而且分離效果好，線性范圍寬，準(zhǔn)確度高，為保證蔬菜的安全性，值得大范圍推廣應(yīng)用。