恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

劉 盼，楊 慕，賈成霞，張清靖，曲疆奇

( 北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所 漁業(yè)生物技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部北方地區(qū)漁業(yè)資源環(huán)境觀測(cè)試驗(yàn)站，北京 100068 )

恩諾沙星又名乙基環(huán)丙沙星，是人工合成的第三代喹諾酮類(lèi)藥物，該藥物具有高效廣譜、副作用小以及不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)，已被應(yīng)用于動(dòng)物和人類(lèi)多種感染性疾病的治療，對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的細(xì)菌感染性疾病也具有很好的療效[1-4]。臨床上，恩諾沙星被廣泛應(yīng)用于淡水魚(yú)類(lèi)疾病中的出血性敗血癥、爛鰓病、腸炎病、赤皮病等，同時(shí)也已被應(yīng)用于鱘魚(yú)養(yǎng)殖業(yè)中[5-7]。恩諾沙星在不同種類(lèi)動(dòng)物體內(nèi)均可不同程度地代謝成環(huán)丙沙星，環(huán)丙沙星容易導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，且易殘留在動(dòng)物體的血液和肝臟等組織中，對(duì)人類(lèi)健康造成威脅，為保證動(dòng)物源性食品的安全性，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行藥殘監(jiān)測(cè)[8]。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是廣泛存在于魚(yú)類(lèi)細(xì)胞漿和線(xiàn)粒體中的重要氨基酸轉(zhuǎn)氨酶，在魚(yú)類(lèi)蛋白質(zhì)代謝中起到非常重要的作用，其活性大小不僅反映氨基酸代謝程度的強(qiáng)弱，也是指示肝細(xì)胞功能的敏感指標(biāo)[9-12]。陳琛等[6]研究了恩諾沙星對(duì)史氏鱘(Acipenserschrencki)和小體鱘(A.ruthenus)體內(nèi)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶系活性的影響，結(jié)果表明，兩種鱘魚(yú)肝臟組織中谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶系的變化幅度明顯大于血漿中。艾曉輝等[13]研究了不同水溫下磺胺甲惡唑在草魚(yú)(Ctenopharyngodonidella)體內(nèi)的藥動(dòng)力，結(jié)果表明，水溫越高，草魚(yú)體內(nèi)的藥物代謝越快。但西伯利亞鱘(A.baeri)在不同水溫下恩諾沙星對(duì)其機(jī)體中轉(zhuǎn)氨酶的影響還未見(jiàn)報(bào)道。筆者選擇西伯利亞鱘最適生長(zhǎng)水溫中的較低溫度(15 ℃)和較高溫度(26 ℃)，研究在這兩種水溫條件下口灌恩諾沙星，實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)的西伯利亞鱘體內(nèi)的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的變化，進(jìn)而得出溫度對(duì)恩諾沙星代謝規(guī)律的影響，以期對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)踐中不同水溫下合理應(yīng)用恩諾沙星給藥方式、制定休藥期及藥物殘留標(biāo)準(zhǔn)限量提供基礎(chǔ)性的數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚(yú)及養(yǎng)殖

試驗(yàn)魚(yú)為人工繁殖的西伯利亞鱘，取自北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所房山養(yǎng)殖基地。挑選健壯無(wú)病無(wú)傷的西伯利亞鱘300尾。保證魚(yú)的狀態(tài)正常，無(wú)畸形；體色和皮膚光澤度正常，皮膚緊致無(wú)損傷，無(wú)病灶；眼球飽滿(mǎn)，角膜清晰。體質(zhì)量(212.3±5.6) g，體長(zhǎng)(21.16±0.14) cm。試驗(yàn)前于養(yǎng)殖槽中暫養(yǎng)7 d，每日上、下午按體質(zhì)量1%投喂鱘魚(yú)專(zhuān)用不含任何藥物的商品膨化飼料。試驗(yàn)用水為經(jīng)活性炭過(guò)濾、充氧后經(jīng)過(guò)曝氣的自來(lái)水。養(yǎng)殖和暴露期間條件控制：水溫由冷暖機(jī)自動(dòng)控制(海鮮養(yǎng)殖恒溫機(jī)，HYH-2DR-B，15 ℃和26 ℃)，水硬度8.0 mg/L，pH 7.6±0.3，溶解氧(8.60±1.04) mg/L。試驗(yàn)用西伯利亞鱘經(jīng)抽查，組織中不含恩諾沙星。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 藥品及試劑配置

恩諾沙星儲(chǔ)備液的配制：恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品0.1 g，使用流動(dòng)相[V(乙腈)∶V(磷酸四丁基溴化銨)=5∶95]溶解，定容至500 mL，放入棕色瓶中4 ℃保存。該儲(chǔ)備液質(zhì)量濃度為200 μg/mL。

口灌恩諾沙星工作液的配制：取0.5 mL恩諾沙星儲(chǔ)備液，加入流動(dòng)相9.5 mL，配制成質(zhì)量濃度為10.00 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.2.2 給藥及樣品采集

在試驗(yàn)水溫15 ℃和26 ℃下，從90尾西伯利亞鱘中隨機(jī)選取5尾為1組，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取1組魚(yú)，共18個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)，另取10尾未口灌恩諾沙星的西伯利亞鱘作空白對(duì)照。試驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)室?guī)в醒h(huán)系統(tǒng)的玻璃缸中進(jìn)行。用套有橡皮軟管的卡介苗注射器以10 mg/kg[14]給藥劑量口灌恩諾沙星溶液，直立停留幾秒，無(wú)回吐者保留試驗(yàn)。給藥前12 h禁食，并于給藥后0(空白對(duì)照)、0.125、0.25、0.5、1.0、1.5、2、4、6、8、12、18、24、36、48、60、72、96 h和120 h分別采取血液和肝臟樣品，采集的血液于3 mL肝素抗凝管中，混勻，4000 r/min(離心半徑1 cm)下離心15 min，分離血漿，-80 ℃保存待測(cè)。肝臟取出后剪碎，按1∶9 (m/V)加入預(yù)冷生理鹽水(含0.75%氯化鈉和0.03%氯化鉀)，用手持式勻漿機(jī)于冰浴中制成勻漿液(10 000 r/min，4 ℃，3 min)。勻漿液經(jīng)10 000 r/min(離心半徑1 cm)離心10 min，取上清液備用。

1.3 酶活性測(cè)定

谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶酶活性測(cè)定按照南京建成生物工程研究所試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。組織蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010及SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(n=5)表示，各組樣本之間采用單因素方差分析和Duncan′s多重比較檢驗(yàn)均值的差異顯著性，以P<0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 不同溫度下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

2.1.1 不同溫度下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

不同溫度下，恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響見(jiàn)圖1。兩溫度組中，血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均被緩慢誘導(dǎo)至峰值。其中15 ℃試驗(yàn)組谷草轉(zhuǎn)氨酶活性振蕩較劇烈。谷草轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在給藥后的24 h [(199.73±6.06) U/mg]，與對(duì)照組[(71.24±2.36) U/mg]差異顯著(P<0.05)，但與其之后36～72 h幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。而在26 ℃試驗(yàn)組中，血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在36 h [(236.02±10.29) U/mg]出現(xiàn)峰值，與對(duì)照組[(38.86±2.98) U/mg]差異顯著(P<0.05)，后緩慢下降至平穩(wěn)。

圖1 不同溫度口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.1 Glutamic-oxaloacetic transaminase activity in serum of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at different temperatures

不同溫度下口灌恩諾沙星，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性隨時(shí)間變化見(jiàn)圖2。谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均呈現(xiàn)逐漸升高至一定水平后趨于平穩(wěn)的變化趨勢(shì)。兩溫度組中，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均在6 h達(dá)到最高。其中15 ℃峰值為(66.73±3.71) U/g，與對(duì)照組[(18.15±1.27) U/mg]差異顯著(P<0.05)；26 ℃試驗(yàn)組中，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性峰值為(286.93±24.50) U/mg，也與對(duì)照組[(7.36±1.04) U/mg]呈顯著性差異(P<0.05)。在15 ℃試驗(yàn)組中，谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在6 h達(dá)到最大值后逐漸下降，至18 h [(42.14±5.29) U/mg]后又緩慢上升，從24 h [(53.98±3.67) U/mg]后數(shù)值逐漸穩(wěn)定，各時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(P>0.05)。在26 ℃試驗(yàn)組中，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性由1 h[(145.65±10.04) U/mg]時(shí)間點(diǎn)開(kāi)始逐步上升至峰值后緩慢下降，在這段時(shí)間內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(P>0.05)。由其變化趨勢(shì)可見(jiàn)，高溫血清試驗(yàn)組中谷丙轉(zhuǎn)氨酶更易被誘導(dǎo)且酶活性水平更高。

圖2 不同溫度口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.2 Glutamic-pyruvic transaminase activity in serum of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at different temperatures

2.1.2 不同溫度下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

不同溫度下，恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響見(jiàn)圖3。兩溫度組中，肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均被明顯誘導(dǎo)至一定數(shù)值后趨于穩(wěn)定。15 ℃試驗(yàn)組肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在給藥后的0.5 h [(158.10±14.25) U/mg]，與對(duì)照組[(81.33±2.36) U/mg]差異顯著(P<0.05)，但與其之后各組差異不顯著(P>0.05)。而26 ℃試驗(yàn)組中，肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性則在2 h[(182.79±18.90) U/mg]出現(xiàn)峰值，與對(duì)照組[(18.26±1.24) U/mg]差異顯著(P<0.05)，后緩慢下降并趨于平穩(wěn)，與后面各時(shí)間段差異不顯著(P>0.05)。

圖3 不同溫度口灌恩諾沙星后西柏利亞鱘肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.3 Glutamic-oxaloacetic transaminase activity in liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at different temperatures

不同溫度下口灌恩諾沙星，肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)定見(jiàn)圖4，谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均呈現(xiàn)逐漸升高至一定水平后趨于平穩(wěn)的變化趨勢(shì)。不同溫度下，15 ℃試驗(yàn)組中肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在短時(shí)間內(nèi)被顯著誘導(dǎo)，在1.5 h時(shí)即達(dá)到活性峰值[(134.29±3.98) U/mg]，與對(duì)照組[(17.352±1.53) U/mg]差異顯著(P<0.05)，隨后逐漸趨于平穩(wěn)。26 ℃試驗(yàn)組中，肝臟在36 h達(dá)到最大值[(129.40±16.00) U/mg]，與對(duì)照組[(60.13±2.325) U/mg]差異顯著(P<0.05)，但與其后的各時(shí)間段差異不顯著(P>0.05)。由其變化趨勢(shì)可見(jiàn)，兩個(gè)溫度下，肝臟組織中谷丙轉(zhuǎn)氨酶更易被誘導(dǎo)且酶活性水平更高。

圖4 不同溫度口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.4 Glutamic-pyruvic transaminase activity in liver of Siberian sturgeon orally administrated with of enrofloxacin at different temperatures

2.2 恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的影響

2.2.1 15 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

15 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性影響見(jiàn)圖5。由圖5可見(jiàn)，口灌恩諾沙星0～4 h(除0.25 h外)，魚(yú)體血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性差異不顯著(P>0.05)，而6～24 h時(shí)，血清中的谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05)，但36～120 h(除72 h外)，肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性又顯著高于血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05)。

圖5 15 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.5 The activity of glutamic-oxaloacetic transaminase in serum and liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 15 ℃

15 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性影響見(jiàn)圖6。與谷草轉(zhuǎn)氨酶不同，對(duì)比0.25～4 h、36～120 h兩個(gè)時(shí)間段，肝臟內(nèi)谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05)，而試驗(yàn)中6～24 h時(shí)間段內(nèi)，血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性差異不顯著(P>0.05)。

圖6 15 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.6 The activity of glutamic-pyruvic transaminase in serum and liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 15 ℃

2.2.2 26 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

26 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶的影響見(jiàn)圖7。0～0.5 h，西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性比肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性略高，但差異不顯著(P>0.05)；1～4 h，肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性又略高于血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性，差異也不顯著(P>0.05)；6～120 h，西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均高于肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性，其中在18、24、36 h時(shí)間點(diǎn)上差異顯著(P<0.05)。

圖7 26 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.7 The activity of glutamic-oxaloacetic transaminase in serum and liver at of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 26 ℃

26 ℃下恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性影響見(jiàn)圖8。與谷草轉(zhuǎn)氨酶活性變化相似，0～0.5 h，鱘魚(yú)肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05)；1.5～120 h，鱘魚(yú)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均高于肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，4～120 h中每個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均顯著高于肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性(P<0.05)。

圖8 26 ℃下口灌恩諾沙星后西伯利亞鱘血清和肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性Fig.8 The activity of glutamic-pyruvic transaminase in serum and liver of Siberian sturgeon orally administrated with enrofloxacin at 26 ℃

3 討 論

3.1 谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶在生物體內(nèi)的代謝機(jī)理

谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是動(dòng)物機(jī)體中參與藥物代謝的兩個(gè)關(guān)鍵的轉(zhuǎn)氨酶，它們?cè)跈C(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用[15-16]。二者均為非特異性免疫功能酶，但它們存在的組織不同[17-20]，谷草轉(zhuǎn)氨酶廣泛分布于各個(gè)組織器官，而存在于肝細(xì)胞線(xiàn)粒體中較多，細(xì)胞質(zhì)和線(xiàn)粒體中的谷草轉(zhuǎn)氨酶是保證蘋(píng)果酸穿梭作用的重要酶系之一；谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要存在于各組織細(xì)胞中，只有少量釋放入血液中[21-22]。谷草轉(zhuǎn)氨酶與谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的大小不僅反映氨基酸代謝程度的強(qiáng)弱，其活性變化與肝細(xì)胞的炎癥、變性等也密切相關(guān)；血清中的轉(zhuǎn)氨酶活性亦可表征肝功能是否受到損傷，因此血清和肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性變化均為反映肝功能正常與否的主要敏感指標(biāo)，可借以評(píng)價(jià)藥物的毒副作用[10]。

谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的主要作用是催化氨基酸生成酮酸。谷草轉(zhuǎn)氨酶催化谷氨酸與草酰乙酸的轉(zhuǎn)氨作用，谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化谷氨酸與丙氨酸的轉(zhuǎn)氨作用。當(dāng)機(jī)體中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性較弱時(shí)，轉(zhuǎn)氨作用較弱；反之，當(dāng)機(jī)體中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性較高時(shí)，加快尿素生成，轉(zhuǎn)氨作用相應(yīng)增加，聯(lián)合脫氨作用容易進(jìn)行，氨基酸的氧化分解作用增強(qiáng)，減少氨基酸代謝產(chǎn)物對(duì)機(jī)體的毒害，從而保持機(jī)體的穩(wěn)定[9,17,23]。通過(guò)對(duì)血清及肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活性的檢測(cè)，可以查明機(jī)體肝功能是否健康。健康血清中這兩種酶的活性均不高[24]。

3.2 不同溫度下口灌恩諾沙星對(duì)西伯利亞鱘血清和肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

在本試驗(yàn)中，口灌10 mg/kg恩諾沙星，15、26 ℃條件下西伯利亞鱘血清和肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均有所升高。15 ℃下西伯利亞鱘血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值分別出現(xiàn)在給藥后的24 h和6 h，而26 ℃下谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在36 h和6 h。15 ℃下西伯利亞鱘肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值出現(xiàn)在0.5 h和1.5 h，而26 ℃下谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性最大值則分別出現(xiàn)在2 h和36 h。這說(shuō)明低溫下誘導(dǎo)谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性達(dá)到峰值的時(shí)間較高溫更短。

由峰值看，15 ℃下血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的峰值為(199.73±6.06) U/mg和(66.73±3.71) U/mg，顯著低于26 ℃下血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的峰值[(236.02±10.29) U/mg和(286.93±24.50) U/mg]。與血清指標(biāo)不同，15 ℃下肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶的峰值[(158.10±14.25) U/mg]與26 ℃下谷草轉(zhuǎn)氨酶的峰值[(182.79±18.90) U/mg]差異顯著(P<0.05)，但谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性峰值在兩個(gè)溫度下差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明，谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在高溫下的峰值均高于低溫下的峰值。說(shuō)明谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性在高溫下更易被誘導(dǎo)。

在兩個(gè)溫度下，西伯利亞鱘血清和肝細(xì)胞內(nèi)谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性隨時(shí)間推移而升高，之后則趨于平緩，這與乳酸諾氟沙星對(duì)南方大口鲇(Silurussoldatovimeridionalis)[25]肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響和高效氯氰菊酯殺蟲(chóng)劑對(duì)鯽(Carassiusauratusauratus)[26]體內(nèi)谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響相似。在低溫下6～24 h，血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性高于肝臟，而隨著時(shí)間延長(zhǎng)，肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性又高于血清，說(shuō)明藥物未對(duì)魚(yú)體造成損傷；但高溫18～36 h，血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶活性一直高于肝臟。與谷草轉(zhuǎn)氨酶相似，谷丙轉(zhuǎn)氨酶低溫下從0.25 h開(kāi)始肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于血清，但高溫下血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于肝臟。這是因?yàn)樵诟邷叵?，肝?xì)胞受到藥物刺激，產(chǎn)生了一定的應(yīng)激反應(yīng)，細(xì)胞膜的通透性增大，肝細(xì)胞內(nèi)這兩種酶的活性降低，導(dǎo)致大量谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶滲入血液，致使肝臟中的谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性明顯下降[25]。試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)際生產(chǎn)中，在應(yīng)用有效藥物含量之前，要充分考慮到環(huán)境因素。高溫天氣下，要適當(dāng)減小用藥量，盡量避免藥物對(duì)西伯利亞鱘機(jī)體帶來(lái)的影響。