流動(dòng)注射分析法測(cè)定揮發(fā)酚穩(wěn)定性探究

李文銳，王萬(wàn)敏

(樂(lè)山市沙灣區(qū)疾病預(yù)防控制中心 , 四川 樂(lè)山 614900)

水中揮發(fā)酚通常指在蒸餾時(shí)可以隨水蒸氣揮發(fā)的苯及其稠環(huán)的羥基衍生物，長(zhǎng)期接觸有可能導(dǎo)致致畸、致癌和致突變[1]。目前常用的檢測(cè)方法包括4-氨基安替比林分光光度法和流動(dòng)注射-4氨基安替比林分光光度法，其中流動(dòng)注射法因?yàn)榫哂凶詣?dòng)化水平較高，準(zhǔn)確度和精密度好，分析速度快，消耗試劑少，且不需要使用三氯甲烷有毒萃取試劑等優(yōu)點(diǎn)，在揮發(fā)酚的測(cè)定應(yīng)用中越來(lái)越廣[2]。但揮發(fā)酚在空氣中的穩(wěn)定性和4-氨基安替比林易被空氣氧化等因素對(duì)測(cè)量結(jié)果存在直接影響[3]。周紹倫[4]從標(biāo)液配制、重復(fù)性試驗(yàn)等方面的不確定度，對(duì)流動(dòng)注射測(cè)定揮發(fā)酚的穩(wěn)定性進(jìn)行了探究。但揮發(fā)酚和4-氨基安替比林在空氣中隨時(shí)間暴露自身的穩(wěn)定性變化相關(guān)探究較少，本文通過(guò)運(yùn)用流動(dòng)注射分析儀，每間隔1 h對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和質(zhì)控品進(jìn)行重復(fù)測(cè)定，以吸光度變化情況反應(yīng)揮發(fā)酚的濃度變化情況，探討揮發(fā)酚在檢測(cè)過(guò)程中的穩(wěn)定狀況。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器：流動(dòng)分析儀，法國(guó)Alliance-proxima；純水機(jī)，優(yōu)普CPC-20T；分析天平，上海舜宇JA5003；超聲波清洗機(jī)，昆山KQ-300DE。

試劑：鐵氰化鉀，分析純，Sigma-Aldrich公司；硼酸，優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；4-氨基安替比林試劑，分析純，默克公司；磷酸，優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；氯化鉀，優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；氫氧化鈉，優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；揮發(fā)酚質(zhì)控，A190533，壇墨質(zhì)檢；揮發(fā)酚標(biāo)準(zhǔn)樣品，GBW(E)080241，中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院。

1.2 試劑配制

1.2.1反應(yīng)試劑配制

氫氧化鉀溶液：溶解5.61 g氫氧化鉀于80 mL超純水中，定容至100 mL；磷酸蒸餾溶液：取50 mL磷酸于400 mL超純水中，并用超純水稀釋至500 mL，混勻；4-氨基安替比林溶液：稱(chēng)取0.13 g 4-氨基安替比林溶解于200 mL超純水中,混勻，超聲過(guò)濾除氣10 min后備用；鐵氰化鉀緩沖溶液：在250 mL燒杯中，依次稱(chēng)取0.4 g鐵氰化鉀，0.6 g硼酸，1 g氯化鉀于180 mL超純水中，并用氫氧化鉀溶液調(diào)整pH值至10.3，定容至200 mL，混勻[5]。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)系列

吸取1 000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL于100 mL容量瓶中，用超純水定容，配置成10 mg/L中間液；從中間液中吸取5 mL于100 mL容量瓶中，用純水定容，配置成500 μg/L的使用液，用使用液配置0、5、10、20、40、60、80、100 μg/L標(biāo)準(zhǔn)系列[6]。

1.2.3質(zhì)控品使用液配制

準(zhǔn)確吸取揮發(fā)酚標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控品1 mL，于1 000 mL容量瓶中定容，配置成濃度為(7.25±0.48)μg/L的質(zhì)控品使用液。

1.3 方法

1.3.1水樣處理

因本實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑谟谔骄繐]發(fā)酚在自然狀態(tài)下測(cè)量時(shí)的穩(wěn)定性，所以在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液、質(zhì)控品及試劑的配制過(guò)程中稀釋溶劑皆用超純水，不添加NaOH進(jìn)行固定[3,7]。質(zhì)控品分為實(shí)驗(yàn)組(質(zhì)控1)和對(duì)照組(質(zhì)控品2)兩組，其中實(shí)驗(yàn)組在檢測(cè)過(guò)程中持續(xù)暴露于空氣中，每次測(cè)量前不進(jìn)行溶液補(bǔ)充；對(duì)照組在每次檢測(cè)前重新更換1.2.3中所配置的質(zhì)控品使用液。

1.3.2參數(shù)設(shè)定

按照儀器操作規(guī)范打開(kāi)儀器，連接后管道后，依次打開(kāi)自動(dòng)進(jìn)樣器、化學(xué)分析模塊及電腦軟件，設(shè)定相關(guān)參數(shù)。相關(guān)參數(shù)見(jiàn)表1。

1.3.3測(cè)量

表1 揮發(fā)酚測(cè)定相關(guān)參數(shù)設(shè)定

控制室溫穩(wěn)定于25 ℃，將儀器管線(xiàn)插入相應(yīng)的試劑瓶中，待基線(xiàn)穩(wěn)定后，將標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液和質(zhì)控1、質(zhì)控品2溶液放置于樣品架中固定，每間隔1 h進(jìn)行一次測(cè)定，共測(cè)定5次，并記錄所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中各濃度的吸光度值、線(xiàn)性方程及質(zhì)控值。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)量結(jié)果

在不同時(shí)間下所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中各濃度的吸光度值及線(xiàn)性方程見(jiàn)表2，不同時(shí)間間隔下的兩組質(zhì)控品測(cè)量值見(jiàn)表3。

表2 在不同時(shí)間下所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中各濃度的吸光度值、線(xiàn)性方程及質(zhì)控值

表3 不同時(shí)間間隔下的兩組質(zhì)控品測(cè)量值

2.2 結(jié)果分析

2.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的穩(wěn)定性

由表2可知，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)在5 h內(nèi)總體線(xiàn)性較好r≥0.999 8，在10 g/L濃度時(shí)吸光度的波動(dòng)隨著時(shí)間變化較大，RSD為4.75%；在20、40、60、80、100 g/L濃度時(shí)吸光度的波動(dòng)隨時(shí)間變化較小，RSD分別為1.20%、1.60%、1.15%、0.72%、1.34%；低濃度揮發(fā)酚溶液隨著在空氣中暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，其濃度有下降的趨勢(shì)，而較高濃度揮發(fā)酚溶液，其吸光度變化趨勢(shì)較為平緩，溶液濃度變化較小。

2.2.2質(zhì)控品穩(wěn)定性

3 討論

本實(shí)驗(yàn)中揮發(fā)酚低濃度(10 g/L)值的測(cè)量結(jié)果波動(dòng)較大的原因，可能是由于流動(dòng)分析儀測(cè)量時(shí)需要高濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行尋峰定性，導(dǎo)致基線(xiàn)波動(dòng)較大，當(dāng)尋峰定性完后，低濃度值在檢測(cè)時(shí)受基線(xiàn)波動(dòng)影響就相對(duì)較大。雖然低濃度吸光度受基線(xiàn)影響，但對(duì)整體的測(cè)量影響較小，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性在5 h內(nèi)均保持良好線(xiàn)性關(guān)系r≥0.999 8，且質(zhì)控品在5 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在運(yùn)用連續(xù)流動(dòng)分析儀進(jìn)行測(cè)定過(guò)程中，揮發(fā)酚溶液和反應(yīng)試劑在室溫條件下穩(wěn)定性較好，適合大批量樣本在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)連續(xù)測(cè)定。