禽流感研究進展摘譯

中國禽流感的防控措施與經驗教訓

近幾十年來，多種亞型（H9N2、H5N1、H7N9）禽流感病毒（AIV）在我國廣泛傳播，造成了巨大的經濟損失，對公眾健康也構成了相當大的威脅。本文分析了AIV 在我國持續(xù)存在的原因，闡述了我國采取的控制措施，并總結了經驗教訓。

AIV 在我國的流行源于根深蒂固的生態(tài)系統特征和社會經濟特征。在過去30 年中，我國的家禽數量增加了10倍，但生物安全防護卻相對滯后，且更多家禽和野鳥受到AIV感染，進一步增加了我國AIV傳播的風險。為了控制AIV，中國政府主要采取了三種控制策略：撲殺感染禽類、大規(guī)模疫苗接種和提高生物安全水平。由于撲殺和提高生物安全水平都無法阻止AIV 傳播，因此，大規(guī)模疫苗接種是抑制AIV傳播最有效的方法，目前已在我國取得較好的防控效果。

在過去的30年里，AIV在中國傳播的風險大大增加，但由于生態(tài)系統和社會經濟特征的變化，預計在未來幾十年內會顯著降低。我國實施的撲殺感染禽類和大規(guī)模疫苗接種成功控制了禽流感疫情，減少了經濟損失及人類感染風險。本文的研究成果將有助于將來更好地控制AIV在中國及全球的傳播。

H7亞型禽流感病毒重組酶介導等溫擴增檢測方法的建立

H7亞型禽流感病毒感染是亞洲一些國家新興的人畜共患病，也是全球范圍內重要的禽類疫病。在疫病暴發(fā)期間，需要一種快速而簡單的檢測方法來確認疑似病例的感染狀況。基于此目的，本研究建立了H7亞型禽流感病毒重組酶介導等溫擴增（RT-RAA）檢測方法，該方法在單溫度（39℃）下反應20 min，即可獲得檢測結果。

結果顯示，該方法與影響禽類的主要呼吸道病毒—新城疫病毒和傳染性支氣管炎病毒均無交叉反應。根據統計分析，該方法的檢測靈敏度為102個RNA拷貝/反應，特異性為100%。通過檢測342 份臨床禽源樣本，該方法與已發(fā)表的熒光RT-PCR 法K 值為0.988（p＜0.001），靈敏度為100%（95%CI，90.40%～100%），特異性為99.96%（95%CI，97.83%～99.98%）。以上結果表明，本試驗建立的RT-RAA方法是檢測H7亞型禽流感病毒的有力工具。

H7N9禽流感病毒血凝素優(yōu)勢非中和表位的鑒定

H7N9 禽流感疫苗可誘導高水平的抗血凝素（HA）非中和（nonNeu）抗體。然而，誘導這種特殊抗體反應的抗原表位尚不明確。本研究制備了13株抗H7N9病毒HA蛋白的單克隆抗體，其中12株無血凝抑制和病毒中和活性。

利用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）和噬菌體展示隨機肽庫篩選技術，研究人員發(fā)現了3株單克隆抗體識別的線性表位373-TAA-375和1株單克隆抗體識別的構象表位220Q-225S-227G。競爭ELISA結果顯示，220Q-225S-227G表位在誘導nonNeu 抗體中具有免疫優(yōu)勢。此外，373-TAA-375表位在H1-H17亞型中是保守的，識別該表位的單克隆抗體與不同亞型病毒均表現出交叉反應。

本研究成果為H7N9 疫苗的抗體免疫提供了全新的分子基礎，并為疫苗的設計和改造提供了有益啟示。

H9N2 型禽流感病毒受體結合偏好和人畜共患潛力的遺傳決定因素

受體識別與結合是病毒感染的第一步，也是決定宿主特異性的關鍵因素。禽流感病毒不能有效地結合類人唾液酸受體是其無法在人體內有效傳播和流行的主要原因。H9N2 型禽流感病毒在亞洲和非洲部分地區(qū)的家禽中流行，偶爾會感染人類，因此被認為是具有人畜共患病潛力的病毒。本研究采用基因突變方法，通過改變H9血凝素中的單個或多個位點，然后用生物膜層反射光干涉技術測試突變后的病毒與禽和人類受體類似物的結合情況。

經過試驗，科研人員確定了H9N2 的偏好結合位點，分別是起決定性作用的190、226和227位氨基酸及作用相對較小的位點159、188、193、196、198 和225。此外，135、137、147、157、158、184、188和192位氨基酸變化也可以調節(jié)病毒受體的親和力。

本文研究成果將有助于指導未來的H9N2監(jiān)測工作，并促進人類了解具有更大人畜共患病潛力的禽流感病毒。

一株誘導快速免疫的廣譜HVT-H5禽流感病毒載體疫苗

目前，應對家禽中高致病性禽流感（HPAI）暴發(fā)的主要方法是撲殺和預防性撲殺，但這會導致巨大的經濟損失。緊急疫苗接種可以作為一種替代方案，防止疫情擴散。目前常規(guī)的禽流感滅活疫苗不具備大規(guī)模適用性，也無法實現快速免疫。本文旨在進一步研究火雞皰疹病毒（HVT）作為含有HPAI H5N1 重組H5 血凝素載體疫苗的潛力。

結果顯示，HVT-H5疫苗在SPF蛋雞接種后2周，可對其提供4 株不同HPAI H5N1 毒株的完全保護效力。HVT-H5疫苗在接種后3周可誘導3周齡SPF蛋雞對11株HPAI H5N1 菌株和HPAI H5N8 A/ch/Neth/14015531/2014株產生高滴度保護性抗體（≥4）。除了誘導保護性抗體應答外，HVT-H5還可誘導特異性T細胞反應。

以上數據表明，HVT-H5疫苗符合理想禽流感疫苗標準，可能是對抗全球禽流感暴發(fā)的有用工具?！?/p>