中藥材質(zhì)量的研究方法和進(jìn)展

張雅娟，姜云耀

(清華大學(xué) 藥學(xué)院 中藥研究院，北京100084)

中西醫(yī)結(jié)合、中西藥并用在防控新冠病毒肺炎疫情中取得了良好的臨床療效和救治前景。近來疫情在全球快速擴(kuò)散，情勢危急，中國方案和經(jīng)驗(yàn)備受世衛(wèi)組織和各國關(guān)注，包括“三藥三方”在內(nèi)的中醫(yī)藥馳援海外參與救治。這表明中醫(yī)藥在世界臨床醫(yī)學(xué)的地位和國際影響力進(jìn)一步提升，為中醫(yī)藥走向世界帶來新的契機(jī)。長期以來，中藥無論是在獲得國內(nèi)新藥審批還是通過國外藥品審批都非常困難，根本原因在于中藥質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的落后，根源則是中藥有效成分不清楚、作用機(jī)制不明確,質(zhì)量可控性差。

2019年10月20日中共中央、國務(wù)院印發(fā)的《關(guān)于促進(jìn)中醫(yī)藥傳承創(chuàng)新發(fā)展的意見》中明確提出要加強(qiáng)中藥材質(zhì)量控制，促進(jìn)中藥飲片和中成藥質(zhì)量提升，加強(qiáng)中藥質(zhì)量安全監(jiān)管。中藥質(zhì)量直接關(guān)系到人民的健康，并且和日常生活、社會(huì)進(jìn)步息息相關(guān)。隨著老齡化程度的加重，中醫(yī)藥大健康產(chǎn)業(yè)的作用也逐漸凸顯。廣大群眾預(yù)防保健的意識(shí)不斷提高，醫(yī)療衛(wèi)生健康和中藥質(zhì)量規(guī)范需迎合時(shí)代的步伐，進(jìn)一步提高。但中藥市場缺乏管理，中藥質(zhì)量良莠不齊，不良事件頻發(fā)，若想充分發(fā)揮中醫(yī)藥的作用，傳承中醫(yī)藥精髓，加強(qiáng)中藥市場管理刻不容緩。

加強(qiáng)中藥質(zhì)量控制要從源頭抓起，中藥材是中成藥和中藥飲片的基本原料，是中藥產(chǎn)業(yè)鏈的源頭環(huán)節(jié)和中藥質(zhì)量的首道保障。中藥材質(zhì)量的安全性和有效性，不僅關(guān)系中藥產(chǎn)業(yè)自身生存發(fā)展，更對中醫(yī)藥整體價(jià)值產(chǎn)生全局性影響，是中藥產(chǎn)學(xué)研各方必須承擔(dān)的一項(xiàng)緊迫任務(wù)。近兩年來，我國藥監(jiān)部門高度重視中藥材質(zhì)量下滑的問題。2019年6月，國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心首次發(fā)布《中藥材質(zhì)量控制與研究技指導(dǎo)原則(征求意見稿)》，明確提出“應(yīng)認(rèn)識(shí)中藥材作為中藥制劑源頭的重要性，提升中藥材源頭質(zhì)量控制能力”“要根據(jù)中藥材的特點(diǎn)和生長物候期，制定科學(xué)的生長年限、采收期及采收方案”等要求。常見的中藥材其質(zhì)量與選種、育苗、生長條件、人為干預(yù)、采收、加工、炮制、貯藏、制劑工藝等環(huán)節(jié)息息相關(guān)[1]。從一棵幼苗成長到成為治病救人的良藥，中間的每一個(gè)環(huán)節(jié)都對中藥的質(zhì)量產(chǎn)生極大的影響，決定著它的價(jià)值。因此，中藥質(zhì)量要從藥材這一源頭抓起，要運(yùn)用現(xiàn)代技術(shù)和科學(xué)的方法對中藥材質(zhì)量進(jìn)行全面研究。影響中藥材質(zhì)量的每一個(gè)步驟都需要相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)去規(guī)范，加大中藥市場監(jiān)管力度。

傳統(tǒng)的鑒別方式包括看、摸、聞、嘗、水試、火試等[2]，這些方式能快速的對中藥材真?zhèn)芜M(jìn)行鑒別，但要求鑒定人員具備一定的專業(yè)知識(shí)及經(jīng)驗(yàn)。還有一些藥材及其混淆品在氣味、外觀鑒別方面相似，簡單的鑒別很難將它們區(qū)分，如山銀花。目前常用的方法則更多的依賴現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，如分子鑒別法、化學(xué)鑒別法、形態(tài)鑒別法和生物效應(yīng)鑒別法等,還有將現(xiàn)代互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)結(jié)合其中的新型鑒別方法[3]。中藥材發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)是化學(xué)成分，因此目前主要依靠測定指標(biāo)成分含量和指紋圖譜技術(shù)對中藥材質(zhì)量進(jìn)行控制[4]。然而，指標(biāo)成分的含量和指紋圖譜的相似度評價(jià)并不能全面、真實(shí)地反映中藥材質(zhì)量。如何科學(xué)的評價(jià)中藥材的質(zhì)量，一直是中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究熱點(diǎn)，科研人員也開展了大量的研究工作。

1 本草考證

通過查閱古今文獻(xiàn)，參照考古實(shí)物，調(diào)查產(chǎn)地分布，產(chǎn)地實(shí)地考察，分析生態(tài)習(xí)性、植物生長周期特點(diǎn)等方法，結(jié)合文字訓(xùn)詁、時(shí)代背景、政治因素，對中藥基原、名稱、產(chǎn)地、形態(tài)、道地、品質(zhì)、功效、用藥劑量、用藥部位、采收、加工和炮制等進(jìn)行綜合分析。

朱文娟等[5]通過整理獨(dú)活相關(guān)資料，包括獨(dú)活正品、地方習(xí)用品種、易混品和偽混品，對獨(dú)活各種植物基原進(jìn)行文獻(xiàn)考證，為明確獨(dú)活的正確來源和資源分布，減少市場中的摻假、作假亂象, 保障用藥安全提供依據(jù)。王雨婷等[6]通過查閱歷代文獻(xiàn)和《中國植物志》,對黃精的源流、名稱、產(chǎn)地、形態(tài)、功效進(jìn)行考證，明確了現(xiàn)代藥用黃精的3個(gè)品種來源。王藝涵等[7]通過查閱古籍以及《中國藥學(xué)大辭典》《中國植物志》《Flora of China》《中藥志》《中藥材品種論述》和《中國藥典》等近、現(xiàn)代文獻(xiàn)典籍，對經(jīng)典名方中莪術(shù)、郁金、 姜黃和片姜黃的名稱、基原、道地、品質(zhì)、用藥部位、采收、加工和炮制進(jìn)行考證，并對川郁金、姜黃和莪術(shù)在經(jīng)典名方中的應(yīng)用提供合理建議。翁倩倩[8]等通過對歷代本草、醫(yī)籍方書和現(xiàn)代文獻(xiàn)資料及著作的考證研究，系統(tǒng)梳理了古代經(jīng)典名方中升麻類藥材的名稱、基原、道地產(chǎn)地、品質(zhì)、藥用部位、采收加工和炮制，考證發(fā)現(xiàn)(Cimicifugafoetida) L.是古代藥用升麻的主要來源。此外，亦有文獻(xiàn)報(bào)道了澤瀉、遠(yuǎn)志、枳殼、半夏、天南星、車前、沒藥、枇杷、厚樸、白術(shù)、石斛、巴豆、知母、黃柏、何首烏、草珊瑚、延胡索、艾草、五味子、地龍、丹參、枸杞、佛手、馬錢子、萆薢、祁術(shù)、黨參、黃芪、蓮子、薄荷、蒼耳子、龜甲、款冬花、麻黃、三七、辛夷、淫羊藿、貫眾、細(xì)辛、玉竹、人參、巴戟天、蛇床子、甘草、橘紅、益智、地榆、羌活、青蒿、草蓯蓉、乳香、蛇附子、陳皮、五加皮、香附、云芝、金銀花、葶藶子、飛仙藤、黃芩、益母草、川楝子、黃連、沉香、連翹、菟絲子、雷公藤、板藍(lán)根、吳茱萸、天麻、川芎、紫花地丁、地黃、火麻仁、芡實(shí)、貝母、牛蒡子、防己、西河柳、功勞葉、大薊、葛根、姜黃、清風(fēng)藤、菊花、敗醬草、白芷、重樓、虎刺、蒼術(shù)、蓽茇等藥材，紫堇屬藥物、景天屬藥物、珍珠屬藥物、茯苓類藥材、烏頭屬中藥、金粟蘭屬藥物、血竭藥物以及經(jīng)典名方中芍藥類藥材、牛膝類藥材、術(shù)類藥材、柴胡藥材、石菖蒲藥材、蔓荊子、黃柏、百合等300余種中藥的草本考證。

2 本草基因組學(xué)

是利用組學(xué)技術(shù)研究中藥基原物種的遺傳信息及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，闡明中藥防治人類疾病分子機(jī)制的學(xué)科，從基因組水平研究中藥及其對人體作用的前沿科學(xué)[9]。本草基因組學(xué)為模式中藥的研究、本草學(xué)的生物基礎(chǔ)、針對性的中藥育種、中藥合成生物學(xué)以及中藥基因庫的構(gòu)建提供了理論基礎(chǔ)和有效的技術(shù)平臺(tái)。研究者因此能夠通過測序、組裝和記錄基因組，并進(jìn)一步分析它們的遺傳功能，進(jìn)而系統(tǒng)地對藥用植物進(jìn)行研究。而且，基因組信息可以與轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)數(shù)據(jù)相結(jié)合應(yīng)用于中藥相關(guān)的生物學(xué)研究領(lǐng)域，從而開展基于大數(shù)據(jù)的中藥遺傳和生物學(xué)性質(zhì)的研究[10]。本草基因組學(xué)是研究中藥基原物種遺傳信息的有效工具，可在中藥資源保護(hù)、評價(jià)、發(fā)掘、利用等全產(chǎn)業(yè)鏈研究和應(yīng)用中發(fā)揮重要的作用[11]。

陳士林[12]課題組利用新一代測序技術(shù)對靈芝菌株進(jìn)行了全基因組測序和組裝，獲得了靈芝的全基因組圖譜，獲得43.3 Mb的基因組信息，預(yù)期編碼了16 113個(gè)基因。研究發(fā)現(xiàn)了一系列編碼細(xì)胞色素P450s (CYPs)的基因以及轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和調(diào)節(jié)蛋白等協(xié)同參與次級代謝的蛋白質(zhì)。總共鑒別出了24個(gè)CYP基因簇。此外，研究發(fā)現(xiàn)了78個(gè)與羊毛固醇合酶共表達(dá)的CYP基因，其中16個(gè)與可特異羥化睪酮的真菌CYPs具有高度相似性。SHEN Q等[13]報(bào)道了1.74 Gb的青蒿基因組，含有63 226個(gè)蛋白編碼基因。研究通過轉(zhuǎn)錄組的數(shù)據(jù)揭示了青蒿中已經(jīng)演化出了復(fù)雜的青蒿素生物合成轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，并構(gòu)建了能夠提升青蒿素生物合成的轉(zhuǎn)基因青蒿株系。XU Z C等[14]采用第三代PacBio測序技術(shù)繪制了高雜合度卷柏的基因組圖譜，共組裝到卷柏的二倍體基因組301 Mb，基因組注釋到27 761蛋白質(zhì)編碼基因，11%的蛋白編碼基因在脫水狀態(tài)下顯著高表達(dá),進(jìn)一步分析揭示了卷柏耐旱的分子機(jī)制。除此之外，目前已對蓖麻、靈芝、三七、鐵皮石斛、人參、菊花、丹參、罌粟、紫芝、穿心蓮、天麻、赤芝、長春花等超過40種中藥進(jìn)行了本草基因組學(xué)的測序分析。

3 DNA條形碼分子鑒定

DNA條形碼分子鑒定法是利用基因組中一段公認(rèn)的、相對較短的DNA序列來進(jìn)行物種鑒定的一種分子生物學(xué)技術(shù)，是傳統(tǒng)形態(tài)鑒別方法的有效補(bǔ)充[15]。中藥材DNA條形碼分子鑒定法彌補(bǔ)了傳統(tǒng)中藥材鑒定方法在基原鑒定上的局限性，為確保中藥的臨床用藥安全性和有效性提供了新技術(shù)和新方法，也為中藥材的基原鑒定提供了科技支撐[16]。目前，國家藥典委已將該方法納入2010年版和2015年版的《中國藥典》[17]。

龐中化等[18]通過對310份東亞鉗蝎樣本的測序分析，建立了東亞鉗蝎的正品COI數(shù)據(jù)庫，并確定東亞鉗蝎正品和偽品的DNA條形碼。通過該方法能夠準(zhǔn)確地鑒定全蝎的基原動(dòng)物及其偽品。馬麗杰等[19]通過對35份東北透骨草及其混偽品的基因組DNA進(jìn)行雙向測序分析，構(gòu)建了Neighber-jioning (NJ)系統(tǒng)進(jìn)化樹，預(yù)測了ITS2二級結(jié)構(gòu)，最終建立了東北透骨草的DNA條形碼，對東北透骨草的基原進(jìn)行準(zhǔn)確鑒別。吳田澤等[20]提取了32份13種不同莢蒾屬植物樣品的基因組DNA進(jìn)行測序分析，并比較了種內(nèi)、種間序列差異,構(gòu)建系統(tǒng)聚類樹，確定莢蒾屬植物的DNA條形碼，為鑒定莢蒾屬植物提供了分子生物學(xué)的方法。此外，中藥材DNA條形碼分子鑒定法也被成功用于人參、何首烏、川貝母、冬蟲夏草、半夏、香青蘭、麥冬、肉蓯蓉、沙棘、白頭翁、蒼耳子、艾納香、藏紅花、苦杏仁、金花茶、天南星、臭蒿、雞骨草、紫蘇子、冬葵子、苘麻子、龍葵、雞血藤、地黃、藤梨根、防風(fēng)、荊芥、鎖陽、黃連、金蓮花、甘草、百合、柴胡、地楓皮、陳皮、白芷、黨參、五加皮、遠(yuǎn)志、絞股藍(lán)等中藥材，人參、金蓮花、北沙參、桔梗、羌活、王不留行、澤瀉、知母、黃芩、重樓、丹參等中藥材種子，當(dāng)歸屬、蘆薈屬、烏頭屬、百合屬、菱屬、石斛屬、黃精屬、菊屬、懸鉤子屬、蘭屬、莢蒾屬、睡蓮屬植、水仙屬、白頭翁屬、黔產(chǎn)黨參屬、金錢豹屬、人參屬、烏頭屬、蛇葡萄屬、薔薇屬、冬青屬藥用植物，靈芝屬真菌，海馬、鹿茸、蛤蚧、蛇蛻、蜈蚣、穿山甲、哈蟆油、水蛭、炮山甲、熊膽粉、雪蛤、金環(huán)胡蜂、僵蠶、麝香、地龍等動(dòng)物藥材以及蛇膽川貝膠囊、三七片、普樂安片、如意金黃散等中成藥組分的基原物種鑒定研究。

4 中藥質(zhì)量標(biāo)志物(Q-marker)研究

中藥Q-marker概念是劉昌孝院士基于規(guī)范中藥質(zhì)量研究和標(biāo)準(zhǔn)建立，考慮中藥傳統(tǒng)理論、遣藥組方、成藥制備、劑型和用法等復(fù)雜性, 以克服現(xiàn)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不足,提高質(zhì)量一致性、可控性和朔源性為目的提出的，是存在于中藥材和中藥產(chǎn)品(如中藥飲片、中藥煎劑、中藥提取物、中成藥制劑)中固有的或加工制備過程中形成的、與中藥的功能屬性密切相關(guān)的化學(xué)物質(zhì),作為反映中藥安全性和有效性的標(biāo)示性物質(zhì)進(jìn)行質(zhì)量控制[21]。中藥Q-marker把中藥“有效性-物質(zhì)基礎(chǔ)-質(zhì)量控制標(biāo)志性成分”密切地關(guān)聯(lián)在一起,對符合中醫(yī)藥辨證論治思想的中藥質(zhì)量評價(jià)方法的建立以及中藥標(biāo)準(zhǔn)化的建設(shè)具有重要的科學(xué)意義[22]。

Xin Dong等[23]建立了高效液相色譜結(jié)合代謝組學(xué)技術(shù)定量分析甘草Q-marker的方法，并基于HPLC和HPLC-Q-Exactive/MS方法建立的色譜圖，進(jìn)行不同的多元分析，選擇了七個(gè)定量指標(biāo)作為甘草的Q-marker，并建立了可靠的定量方法。劉永利等[24]基于中藥Q-marker的理念及研究模式，確定了人參的Q-marker為人參皂苷Rf、Rg1、Re與Rb1，西洋參的Q-marker為擬人參皂苷F11和人參皂苷Rg1、Re與Rb1，三七的Q-marker為三七皂苷R1和人參皂苷Rg1、Re與Rb1，并建立了人參、西洋參和三七的質(zhì)量控制方法。李斐[25]采用UPLC-Q-TOF/MS技術(shù)，結(jié)合中藥血清藥物化學(xué)和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，確定了吳茱萸的Q-marker，同時(shí)根據(jù)Q-marker的作用靶點(diǎn)探討了吳茱萸鎮(zhèn)痛、止嘔和毒性的作用機(jī)制，并建立了吳茱萸Q-marker的HPLC含量測定方法。此外，中藥Q-marker研究已經(jīng)用于香加皮、黃芩、延胡索、黃芪、葛根、丹參、陳皮、枳實(shí)、枳殼、車前子、牛蒡、益母草、趕黃草等中藥材，酸棗仁湯、元胡止痛方、金鈴子散、補(bǔ)陽還五湯等中藥方劑以及交泰丸、腦震寧顆粒、海馬補(bǔ)腎丸、杏貝止咳顆粒、清熱靈顆粒、雙黃連制劑、元胡止痛滴丸、丹紅注射液、冠心靜膠囊等中成藥的研究。

5 植物代謝組學(xué)研究

植物代謝組學(xué)是建立在代謝組學(xué)的基礎(chǔ)上，以植物為研究對象對不同物種、不同基因型和不同生態(tài)型的植物在不同生理期或受到某種外界刺激干擾前后的所有小分子代謝產(chǎn)物進(jìn)行定性和定量分析，并找出代謝變化的規(guī)律[26]。植物代謝組學(xué)通過對植物提取物中所含化學(xué)成分的全面檢測，分析因地理位置、環(huán)境氣候變化、土壤條件、采收和加工方式等導(dǎo)致的中藥化學(xué)成分差異，進(jìn)行中藥材基原的鑒別和品質(zhì)的評價(jià)[27]。

章莎莎等[28]通過植物代謝組學(xué)方法分析了北柴胡、紅柴胡、三島柴胡、黑柴胡等幾種不同品種柴胡的揮發(fā)油含量和組成，結(jié)果發(fā)現(xiàn)北柴胡和紅柴胡在揮發(fā)油含量及組成上存在顯著的差異，北柴胡與三島柴胡和黑柴胡在揮發(fā)油含量上也具有明顯差異。龐溢媛等[29]利用UHPLC-MS/MS的植物代謝組學(xué)方法對一年生和兩年生不同采收期的黃芩進(jìn)行化學(xué)成分種類和含量動(dòng)態(tài)變化的分析，指認(rèn)了不同采收期的差異代謝物及其含量變化，并建議以黃芩素等黃酮苷元類成分為目標(biāo)的5月采收，以黃芩苷等黃酮苷類成分為目標(biāo)的7～8月采收。許曉雙等[30]利用超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜對不同產(chǎn)地的遠(yuǎn)志藥材進(jìn)行代謝組學(xué)研究，分析產(chǎn)地、生長方式、藥用部位等因素對遠(yuǎn)志藥材質(zhì)量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)產(chǎn)地是影響遠(yuǎn)志藥材質(zhì)量的關(guān)鍵因素。

6 中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究

中藥藥效物質(zhì)是指中藥中含有的能夠表達(dá)藥物臨床療效的化學(xué)成分總稱，與中藥有效性和安全性等質(zhì)量問題密切相關(guān)，也是制約中藥現(xiàn)代化和國際化發(fā)展進(jìn)程的關(guān)鍵科學(xué)問題[31]。當(dāng)前，《中國藥典》是評價(jià)中藥材合格與否的法定標(biāo)準(zhǔn)，然而《藥典》中的藥材標(biāo)識(shí)成分并不一定是其發(fā)揮作用的藥效成分，標(biāo)識(shí)成分的含量也不能完全反應(yīng)藥材的質(zhì)量。因此，發(fā)掘能真正反應(yīng)中藥材臨床效果的藥效成分對評價(jià)中藥材質(zhì)量具有重要意義。

目前，中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究方法有很多，比較常用的方法有分離與活性篩選方法[32]、中藥譜效學(xué)方法[33]、血清藥物化學(xué)方法[34]、目標(biāo)成分敲除/敲入方法[35]、計(jì)算機(jī)虛擬篩選方法[36]、化學(xué)生物學(xué)方法[37]、藥代動(dòng)力學(xué)方法[38]、代謝組學(xué)方法[39]、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法[40]等。Jinmei Wang等[41]應(yīng)用譜效關(guān)系和成分敲除方法研究敲除的16個(gè)白芷成分對酪氨酸酶的激活作用，并根據(jù)各成分對白芷生物活性的貢獻(xiàn)度確定了白芷水提取中分別對酪氨酸酶具有抑制和活化作用的活性成分。龐晨等[42]采用成分敲出/敲入模式結(jié)合微量液基稀釋法，并運(yùn)用HPLC-MS技術(shù)辨別分析了藜蒿葉水提物中抗白色念珠菌的藥效組分，主要包括脫氫丹參酮ⅡA,丹參酮ⅡA和丹參酮Ⅰ,以及3種萘啶酸衍生物。馮康虎等[43]利用轉(zhuǎn)基因胚胎血管生成斑馬魚模型對地黃不同部位的促血管生成作用的藥效成分進(jìn)行篩選，并分離出了地黃促血管生成的藥效成分咖啡酸。熊婷等[44]利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法結(jié)合分子對接技術(shù)探索牛膝防治阿爾茨海默病的主要活性成分和作用靶點(diǎn)，從牛膝中篩選出小分子烷烴、酯類、羧酸類、黃酮類和蒽醌類等58個(gè)有效成分，通過Ca MK-IIα、Ca MK-IIβ、Ca MK-IIγ、Akt1和TNF-α等36個(gè)靶蛋白，MAPK信號(hào)通路、Wnt信號(hào)通路等12條通路發(fā)揮防治阿爾茨海默病的作用。此外，苦地丁、黃柏、知母、淫羊藿、黃連、牛黃、姜黃、葛根、甘草、何首烏、紅花、熊膽、大黃、柿蒂、茯苓、山楂葉、當(dāng)歸、蟾酥、尖葉假龍膽、葒草、茅蒼術(shù)、赤芍、鴉膽子、淫羊藿、連翹、石菖蒲、柿葉、澤瀉、杜仲、龍血竭、附子、板藍(lán)根、陳皮、土木香、女貞子、半夏、三七、漏蘆、川芎、麻黃、雞骨草等藥材，當(dāng)歸補(bǔ)血湯、烏頭湯、清熱除濕湯、參麥方、苓桂術(shù)甘湯、清眩降壓湯、四物湯、大黃附子湯、大承氣湯、防己黃芪湯、補(bǔ)腎益智方、黃芩湯、真武湯等方劑以及雙金散結(jié)顆粒、橘紅痰咳液、丹參川芎嗪注射液、桂枝茯苓膠囊、復(fù)方五仁醇膠囊、桃紅四物湯、復(fù)方夏連膠囊、頸腰康膠囊、腦脈通、六味五靈片、復(fù)方丹參滴丸、疏風(fēng)解毒膠囊等中成藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究也已被報(bào)道。

7 中藥功效物質(zhì)基礎(chǔ)研究

中藥功效是在傳統(tǒng)中醫(yī)理論的基礎(chǔ)上對中藥臨床作用的系統(tǒng)總結(jié),是多種特定化學(xué)成分在特定病證條件下對機(jī)體進(jìn)行整體調(diào)節(jié)作用的生物學(xué)效應(yīng)，這些特定化學(xué)成分就是中藥的功效物質(zhì)[45]。雖然以藥效成分為指標(biāo)在一定程度上可以反應(yīng)藥材的質(zhì)量和療效，但并不符合傳統(tǒng)的中醫(yī)藥理論，不利于以中醫(yī)理論為指導(dǎo)的臨床應(yīng)用和功效評價(jià)。因此，以發(fā)揮中藥功效作用的化學(xué)成分作為質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)更符合中醫(yī)藥理論，能更真實(shí)地反應(yīng)中藥的質(zhì)量和功效，更適用于中藥質(zhì)量的評價(jià)。

目前，已有科研團(tuán)隊(duì)開展了中藥功效物質(zhì)基礎(chǔ)的相關(guān)研究。如劉建勛團(tuán)隊(duì)通過建立病證結(jié)合動(dòng)物和細(xì)胞模型及其評價(jià)技術(shù)指標(biāo)體系，結(jié)合藥效學(xué)評價(jià)、證候評價(jià)、藥效指征成分，建立了中藥復(fù)方功效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究思路和方法[45]；喬延江團(tuán)隊(duì)提出了基于系統(tǒng)中藥學(xué)的中藥功效標(biāo)志物的研究方法[46]；任鈞國等[47]對547味中藥、335種傳統(tǒng)功效和86種藥理作用進(jìn)行了關(guān)聯(lián)性研究等。然而，由于缺少中藥功效的評價(jià)指標(biāo)以及適合的動(dòng)物模型，中藥功效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究仍然是一個(gè)難點(diǎn)，需要廣大科研工作者投入更多的時(shí)間和精力開展深入的研究。

8 其他常用研究方法

高效液相色譜法、氣相色譜法、薄層色譜法、高速逆流色譜法和生物方法等也是目前研究者們最常用的中藥質(zhì)量控制的研究方法[48]。田蜜[49]采用高效液相色譜法建立菊苣根的特征圖譜，并測定10批不同產(chǎn)地的菊苣根藥材綠原酸的含量，對菊苣根的質(zhì)量進(jìn)行研究。王玉萍等[50]以正十四烷為內(nèi)標(biāo)物，采用氣相色譜法測定紫蘇葉中紫蘇醛的含量，對21批不同產(chǎn)地的紫蘇質(zhì)量進(jìn)行研究。遲鵬等[51]按照2015年版《中國藥典》中《藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則》的要求，采用薄層色譜法對強(qiáng)力腦心康膠囊中的多糖和肽進(jìn)行鑒定分析，從而對中成藥強(qiáng)力腦心康膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。趙子劍等[52]基于生物測定法，根據(jù)魚腥草對照藥材對金黃色葡萄球菌、沙門微球菌和白念珠菌等敏感菌株的劑量效應(yīng)曲線，構(gòu)建了魚腥草的生物檢定方法，對魚腥草藥材質(zhì)量進(jìn)行控制。此外，近紅外光譜技術(shù)也被用于中藥材種類、產(chǎn)地和真?zhèn)蔚蔫b別以及有效成分、水分及揮發(fā)油等含量的分析[53]。杜敏等[54]利用近紅外光譜儀掃描了枸杞子表面不同部位的近紅外光譜,通過特定算法對枸杞子產(chǎn)地進(jìn)行快速無損辨識(shí)。但近年來，質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用成為中藥質(zhì)量研究的主要方法。趙勝男等[55]利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析不同生長年限和不同采收期黃芩藥材中黃芩素、千層紙素A、白楊素和漢黃芩苷等6種黃酮類成分的含量變化，研究不同采收期黃芩藥材的質(zhì)量。

目前對中藥質(zhì)量的研究絕大部分都只是基于化學(xué)成分的研究。一些研究是根據(jù)《中國藥典》中的標(biāo)識(shí)成分含量高低來判斷中藥材及飲片的質(zhì)量；一些研究在《藥典》標(biāo)識(shí)成分的基礎(chǔ)上又加入了一些活性成分的分析；還有一些研究利用紅外光譜技術(shù)從宏觀角度比較全成分的差異，從而判斷中藥材質(zhì)量。但無論采用哪種方法進(jìn)行研究，都沒有明確中藥的有效成分，所檢測的化學(xué)成分不能代表該藥材，也不能完全反應(yīng)中藥材的質(zhì)量。因此，對中藥材質(zhì)量的研究不能缺少藥效試驗(yàn)，基于藥效學(xué)的中藥材質(zhì)量評價(jià)才更有說服力。然而，基于藥效學(xué)的中藥質(zhì)量研究仍然是一個(gè)難點(diǎn)。一方面由于實(shí)驗(yàn)樣本過多，導(dǎo)致試驗(yàn)成本過高，一般課題組難以承擔(dān)；另一方面中藥功效研究缺少成熟的動(dòng)物模型，如對不同黃芪樣品進(jìn)行評價(jià)，黃芪功效為補(bǔ)氣，則需要建立動(dòng)物氣虛模型，什么樣的指標(biāo)變化為氣虛還不明確，雖然已有氣虛動(dòng)物模型建立的相關(guān)報(bào)道，但還存在很多爭議，仍未得到廣泛認(rèn)可。

除此之外，為了解決中藥材質(zhì)量參差不齊、一致性差的問題，筆者認(rèn)為應(yīng)加快啟動(dòng)中藥材優(yōu)質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)的研究和制訂。然而，目前對中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究表現(xiàn)出明顯的動(dòng)力不足。中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的意義重大，但耗時(shí)費(fèi)力，且需較高的經(jīng)費(fèi)支撐，而其成果一般不會(huì)給研究部門帶來直接經(jīng)濟(jì)收益，加之這類研究的學(xué)術(shù)論文影響因子不高，科研院所和高校往往缺乏積極性，中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究成為中藥科研領(lǐng)域的一灘洼地。對中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究國家應(yīng)當(dāng)及時(shí)引導(dǎo)和扶持。

鑒于中藥標(biāo)準(zhǔn)的制定離不開科研機(jī)構(gòu)的幫助與支持，故應(yīng)加強(qiáng)科研機(jī)構(gòu)和企業(yè)之間的交流，合作進(jìn)行相關(guān)研究，使得中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)切實(shí)可行并穩(wěn)步提升[56]。要重視現(xiàn)代技術(shù)在中藥材質(zhì)量研究中的應(yīng)用，使中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)擁有更多的現(xiàn)代檢測方法和路徑，融入更多的客觀評價(jià)指標(biāo)。尤要重視運(yùn)用現(xiàn)代技術(shù)，開展中藥材指標(biāo)成分特征與藥效、功效的相關(guān)性研究，建立適合中藥材的評價(jià)體系和標(biāo)準(zhǔn)體系。要推行中藥材優(yōu)質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)，提高社會(huì)資源的利用效能，為推動(dòng)更多中國生產(chǎn)的醫(yī)藥產(chǎn)品進(jìn)入國際市場，推動(dòng)中醫(yī)藥走向世界提供質(zhì)量保障。