細(xì)菌的傳統(tǒng)鑒定及基因分子鑒定在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用

楊 旭 舒 鳴 白 玲 郭青春 王 湘

（懷化職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南懷化 418000）

獸醫(yī)臨床進(jìn)行診治過程中，有效微生物鑒定十分關(guān)鍵，而具體鑒定過程中，不同方法的鑒定效果和成效也存在著一定程度不同之處，那么就需要結(jié)合實(shí)際情況選用合理的方法進(jìn)行鑒定。傳統(tǒng)鑒定方法中，可以通過顯微鏡首先進(jìn)行形態(tài)鑒定，將形態(tài)分為球狀、桿狀和螺旋狀，這樣的觀察為后續(xù)其他生理生化特征鑒定會(huì)鋪下很關(guān)鍵的基礎(chǔ)。而除此之外，傳統(tǒng)鑒定過程中，又離不開生理生化特性鑒定，這也是相對(duì)關(guān)鍵一部分內(nèi)容，對(duì)于整體操作效果來說有著決定性影響價(jià)值和意義。

1 生理生化特性鑒定應(yīng)用

1.1 培養(yǎng)與生化特征

分離培養(yǎng)是在具體操作過程中十分關(guān)鍵一部分內(nèi)容，也是傳統(tǒng)鑒定過程中獲得純病原微生物的基礎(chǔ)手段、基本技能，每一類病原微生物自身都有較為明顯的特異性和特殊性，其自身生物學(xué)特征也十分明顯，因此培養(yǎng)過程中也需要充分認(rèn)識(shí)這一特點(diǎn)[1]。一般來說病原微生物對(duì)于生長(zhǎng)環(huán)境都有著一定要求，特別是對(duì)于氧氣、二氧化碳等方面有著基礎(chǔ)性要求，同時(shí)也有一些病原微生物會(huì)在液體、固體或半固體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，同時(shí)還需要觀察其自身血平板上的溶血情況，色素以及氣味，這都是后續(xù)鑒定的最主要依據(jù)。而生化特征方面，則是利用生物化學(xué)的方法來辨別不同病原微生物，通過這樣試驗(yàn)得到最終結(jié)果，一般活細(xì)胞中存在全部生物化學(xué)反應(yīng)稱之為大些，而代謝主要是酶促反應(yīng)過程，不同病原微生物自身的生物酶系統(tǒng)也存在著一定差異，因此對(duì)底物分解能力有所不同，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收利用、排泄物分解和合成也會(huì)存在著一定不同。那么在進(jìn)行界定、鑒定過程中，就可以根據(jù)這樣的特異性差異，對(duì)其自身種類情況進(jìn)行一定劃分，進(jìn)一步有效鑒定其種類特點(diǎn)，優(yōu)化最終鑒定的效果和質(zhì)量的情況。

結(jié)合這一特點(diǎn)，具體應(yīng)用的過程中也逐漸開發(fā)出來自動(dòng)化的系統(tǒng)，能夠準(zhǔn)確進(jìn)行鑒定，同時(shí)也能夠讓其自身試驗(yàn)效果更加明確。在這樣情況下，由于其自身應(yīng)用范圍相對(duì)較為廣泛，應(yīng)用時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)一些，憑借這樣優(yōu)勢(shì)，也一定程度上提高了其自身技術(shù)的成熟性，優(yōu)化了技術(shù)最終應(yīng)用效果，自動(dòng)檢定系統(tǒng)的優(yōu)越性也不容小覷。但值得一提的是，其自身應(yīng)用時(shí)也有不足之處，影響最終效果以及效率等情況。

1.2 傳統(tǒng)鑒定應(yīng)用的不足

在具體應(yīng)用過程中，傳統(tǒng)生化鑒定方法存在著一定不足之處，主要是在實(shí)際操作過程中，同一鑒定板檢測(cè)出現(xiàn)不同生物型原因試驗(yàn)中，應(yīng)用四種不同麥?zhǔn)蠞舛?，將三種不同種屬病原微生物放置于不同濕度恒溫箱中，得到不同濕度條件下鑒定板中汽包則會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果[2]。這樣的情況會(huì)直接影響最終效果，歸根結(jié)底其自身很容易受多種因素影響，導(dǎo)致最終結(jié)果出現(xiàn)偏差，如果不能謹(jǐn)慎操作，則很容易出現(xiàn)一定問題。

2 基因分子鑒定應(yīng)用

2.1 16SrRNA基因序列分析鑒定

基因分子鑒定的方法相對(duì)較為多樣，而目前應(yīng)用相對(duì)較成熟的一類就是16SrRNA基因序列分析鑒定，其自身由保守區(qū)和可變區(qū)交錯(cuò)排列所組成，自20世紀(jì)八十年代就開始有在這方面投入研究。一般而言此類方法應(yīng)用相對(duì)較為廣泛，單純形態(tài)學(xué)以及生化檢查大多數(shù)都不能完全鑒定種屬，操作也相對(duì)較為復(fù)雜，影響最終質(zhì)量和效果的因素較多，而此類技術(shù)則可以充分有效鑒定，起到一個(gè)有效分類的作用。其自身作為分類方法，不僅僅應(yīng)用于病原微生物分類，還可以應(yīng)用于其他生物分類，作用效果相對(duì)較好。但其自身也可以與生化鑒定二者聯(lián)合，然后明確相應(yīng)的種屬，提高最終鑒定的效果。

2.2 23SrRNA基因序列分析鑒定

值得一提的是，23SrRNA基因序列所包含信息量是原本一類方法的兩倍，因此也經(jīng)用于物種鑒定，能夠特異性進(jìn)行物種鑒定，對(duì)于種屬確定來說有著積極價(jià)值。此類方法具備較強(qiáng)特異性和變異性，對(duì)于親緣關(guān)系比較近種系鑒定有著積極意義，鑒定作用效果更好，尤其比傳統(tǒng)方法成效更佳?？偟膩碚f，目前相關(guān)技術(shù)也在不斷走向成熟化，最終操作相對(duì)更為簡(jiǎn)便，能夠針對(duì)性進(jìn)行鑒定，效果也相對(duì)較好一些。而在具體進(jìn)行操作過程中，此類技術(shù)不用依賴于微生物分離培養(yǎng)，能夠快速精準(zhǔn)進(jìn)行相應(yīng)的鑒定，比傳統(tǒng)技術(shù)和方法成效更佳，能夠輔助提升臨床鑒定的效果，要對(duì)相關(guān)技術(shù)充分重視。

3 結(jié)束語

如上所述，獸醫(yī)臨床細(xì)菌傳統(tǒng)鑒定以及基因分子鑒定技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值和意義十分明顯，傳統(tǒng)技術(shù)存在著一定不足之處，效果很容易受到諸多影響因素作用產(chǎn)生一定問題，而基因分子則可以有效鑒定，效果較好，可以結(jié)合實(shí)際情況選用。