慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型的研究與思考＊

鄭鵬飛，張新雪，趙宗江

（北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院 北京 102488）

慢性腎臟?。–hronic Kidney Disease，CKD）已成為21世紀(jì)人類健康所面對(duì)的重要挑戰(zhàn)。研究資料顯示，目前廣泛接受由KDOQI9和KDIGO11定義的慢性腎臟疾病（CKD）評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，系統(tǒng)性地估計(jì)CKD（包括1-5期）的全球患病率為3%-18%；而發(fā)表在柳葉刀的最新研究表明，截止到2040年，慢性腎臟病將成為第五大影響人類壽命的疾病[1]。我國(guó)流行病學(xué)調(diào)查顯示，20歲以上成年人CKD的患病率在10%左右。慢性腎臟病起病隱匿，一旦出現(xiàn)癥狀，病情已較為嚴(yán)重，病程難以逆轉(zhuǎn)，預(yù)后不良。近年來(lái)，由于社會(huì)發(fā)展、生活方式變化等原因，慢性腎臟病患者人數(shù)逐步增加，給國(guó)家和家庭帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)。

腎陽(yáng)虛是慢性腎臟病中的常見(jiàn)而且重要的中醫(yī)證候，研究闡明慢性腎臟病中腎陽(yáng)虛證的生物學(xué)基礎(chǔ)對(duì)于研究腎陽(yáng)虛證的本質(zhì)和發(fā)展中西醫(yī)結(jié)合治療慢性腎臟病具有重要意義。慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型可以客觀地、直觀地和定量地反映腎陽(yáng)虛型慢性腎臟病病程中的生物學(xué)變化，揭示相關(guān)病證本質(zhì)，為基礎(chǔ)研究和臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。目前，國(guó)內(nèi)慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證模型已經(jīng)取得了一定成果，主要產(chǎn)生了化學(xué)藥物造模和復(fù)合因素造模兩類造模方法，并獲得了較為穩(wěn)定的動(dòng)物模型。但這些成果散在于實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)中，缺乏對(duì)于模型制備和評(píng)價(jià)的系統(tǒng)研究，本文對(duì)這些模型文獻(xiàn)進(jìn)行了匯總整理，從模型概述、模型制備、模型評(píng)價(jià)等方面進(jìn)行分析與評(píng)價(jià)。分析了現(xiàn)有慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證造模方法存在的不足，并根據(jù)這些不足提出了進(jìn)一步研究的思路與方法，以期構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)化慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型。

1 慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型的研究現(xiàn)狀

腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型是最早建立的中醫(yī)證候動(dòng)物模型，早在1963年，鄺安堃等[2]就采用氫化可的松建立了首個(gè)腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型。而隨著上海沈自尹院士等[3-9]開(kāi)展的一系列針對(duì)腎虛證本質(zhì)的研究，腎陽(yáng)虛證的動(dòng)物模型也隨之發(fā)展起來(lái)，時(shí)至今日其造模方法眾多，評(píng)價(jià)指標(biāo)豐富且仍處于不斷進(jìn)步之中。慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型是針對(duì)性在動(dòng)物體內(nèi)復(fù)制腎陽(yáng)虛型慢性腎病病理變化本質(zhì)的模型，但模型發(fā)展卻不盡如人意，造模方法有限，局限于特定的化學(xué)物質(zhì)或手術(shù)方法，在模型評(píng)價(jià)上雖有一般狀況、腎臟病理和血尿生化等指標(biāo)但缺乏綜合性和共識(shí)性的評(píng)價(jià)指標(biāo)體系。我們采取文獻(xiàn)管理軟件與人工結(jié)合的方法，以限定“腎陽(yáng)虛”、“慢性腎臟病∕慢性腎病”、“模型∕造模”，“CKD”等詞語(yǔ)為關(guān)鍵詞，在中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方、維普、PUBMED等平臺(tái)對(duì)相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行檢索和篩選整理，在檢索獲得的橫跨1996-2018年的701篇文獻(xiàn)中，與腎陽(yáng)虛型腎病或腎臟病理這一主題密切相關(guān)的文獻(xiàn)僅有20篇，占文獻(xiàn)總數(shù)的2.9%，且缺乏專門(mén)針對(duì)腎陽(yáng)虛型慢性腎臟病的綜述性文獻(xiàn)。從客觀上反映了目前本病證模型發(fā)展所面臨的局限。

1.1 慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型的造模方法

目前文獻(xiàn)報(bào)道的動(dòng)物模型造模方法僅有四種，兩種為使用單一藥物造模，一種為使用復(fù)合藥物造模，一種造模方法為藥物配合手術(shù)進(jìn)行。

1.1.1 化學(xué)藥物造模

1.1.1.1 腺嘌呤

傅氏等[10]將腺嘌呤制成混懸液后以200 mg·kg-1劑量每日定時(shí)灌胃給藥，給藥時(shí)間從第1天到第12天每日給藥，從第12天后隔日給藥直到第24天造模結(jié)束。操氏等[11]以腺嘌呤250 mg·kg-1給大鼠灌胃一個(gè)月。劉氏[12]等則在每日上午以10 mg·kg-1·d-1定時(shí)灌胃，持續(xù)21天。宋氏等[13]以200 mg·kg-1·d-1為標(biāo)準(zhǔn)，大鼠10 mL·kg-1·d-1將腺嘌呤以蒸餾水配制為2%的溶液在每日上午進(jìn)行灌胃，同樣持續(xù)21天。此外，還有其他人應(yīng)用腺嘌呤方法制備模型[14-16]。

1.1.1.2 阿霉素

趙氏[17]比較了單純注射阿霉素、左腎3∕4切除或全切合并阿霉素注射造模的方法，認(rèn)為單純注射阿霉素更符合腎陽(yáng)虛表現(xiàn)。

1.1.2 復(fù)合因素造模

1.1.2.1 不同藥物組合造模

王氏等[18]采取先分別以4 mg·kg-1和3.5 mg·kg-1兩次尾靜脈注射阿霉素制備水腫模型再以每日定時(shí)肌注氫化可的松的方式建立大鼠腎陽(yáng)虛水腫模型。葉氏等[19]對(duì)阿霉素腎病腎陽(yáng)虛證模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，采用一次性尾靜脈注射阿霉素5 mg·kg-1再定時(shí)臀部肌注氫化可的松25 mg·kg-1的方式制備模型。

1.1.2.2 藥物手術(shù)組合造模

孫氏[20]等報(bào)道使用丙硫嘧啶配合5∕6腎切除制備慢性腎衰腎陽(yáng)虛模型。

1.2 慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)方法

通過(guò)文獻(xiàn)整理可以發(fā)現(xiàn)，目前慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型較為缺乏針對(duì)性強(qiáng)的評(píng)價(jià)方法與檢測(cè)指標(biāo)，主要為參考腎陽(yáng)虛證模型評(píng)價(jià)附加腎臟疾病特有的部分指標(biāo)。上述造模方法主要是采取動(dòng)物出現(xiàn)體重減輕、畏寒、蜷縮弓背、反應(yīng)降低、毛發(fā)稀疏等符合腎陽(yáng)虛表現(xiàn)的狀態(tài)作為界定證候造模成功的標(biāo)志[10,12-16]，部分作者采取的是證候表現(xiàn)復(fù)合特定生化指標(biāo)作為界定[17-19]，個(gè)別作者采取的是形態(tài)學(xué)復(fù)合生化指標(biāo)[11]或證候表現(xiàn)復(fù)合藥物反證[20]的方式。

具體評(píng)價(jià)方法和指標(biāo)主要有以下幾方面：

1.2.1 癥狀體征

包括對(duì)大鼠的體重體態(tài)，皮毛色澤，精神狀態(tài)，活動(dòng)狀況，飲食飲水，體溫，排泄，耳廓∕口鼻∕肛周等進(jìn)行觀察，此外還有引入抓力等作為觀察指標(biāo)的研究[16]。

1.2.2 生化指標(biāo)

主要由血液生化和尿液生化指標(biāo)組成。血液主要有尿素氮，肌酐，尿酸，總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白與低密度脂蛋白，cAMP∕cGMP[17-18]等，此外還有靶腺軸指標(biāo)如下丘腦-垂體-甲狀腺（HPT）軸的甲狀腺T3∕T4、下丘腦-垂體-性腺（HPGA）軸的雌二醇和睪酮[18]以及下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸指標(biāo)ACTH、CORT和17-OHCS[16]，水通道蛋白AQP1，2[12,16]。尿液指標(biāo)主要是尿液生化分析和24h尿蛋白定量。

1.2.3 腎臟病理

主要有以下幾方面，腎臟大體形態(tài)觀察：腎臟外觀，腎臟色澤，腎臟包膜，腎臟皮質(zhì)髓質(zhì)交界與色澤。腎臟光鏡觀察，主要觀察腎小球與腎小管結(jié)構(gòu)與腎間質(zhì)結(jié)構(gòu)，包括腎小體數(shù)量，腎小球萎縮情況，腎小管擴(kuò)張情況，上皮細(xì)胞病變，纖維組織增生與炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等。腎臟電鏡觀察，包括對(duì)腎小球腎小管的結(jié)構(gòu)和上皮細(xì)胞細(xì)胞器的觀察[10]。

1.3 慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型的應(yīng)用

目前，慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型主要有兩方面應(yīng)用：首先是病證結(jié)合模型研究，即西醫(yī)的辨病與中醫(yī)的辨證相結(jié)合。研究腎臟疾病與中醫(yī)證型腎陽(yáng)虛證的病理表現(xiàn)與模型研制。其次是研究中藥與中藥復(fù)方對(duì)于腎陽(yáng)虛型慢性腎臟病的干預(yù)作用，如研究真武湯、右歸飲對(duì)于腎陽(yáng)虛型慢性腎衰的干預(yù)作用。兩者緊密聯(lián)系，前者為后者提供了模型試驗(yàn)基礎(chǔ)，后者的成功運(yùn)用則反過(guò)來(lái)推進(jìn)了相關(guān)模型評(píng)價(jià)指標(biāo)等方面的發(fā)展。當(dāng)然腎陽(yáng)虛腎臟病動(dòng)物模型有待于進(jìn)一步拓展應(yīng)用范圍，挖掘應(yīng)用深度，并與其他領(lǐng)域相結(jié)合，體現(xiàn)其學(xué)術(shù)價(jià)值。

1.4 慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型存在的問(wèn)題

目前，通過(guò)現(xiàn)有的文獻(xiàn)整理表明：慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型存在以下問(wèn)題：（1）構(gòu)建方法少（藥物灌胃或注射、手術(shù)），具體造模方式主要采用病理造模方法如藥物注射方式，個(gè)別采取藥物配合腎切除的復(fù)合造模，而造模藥物也局限于腺嘌呤、阿霉素與氫化可的松三種藥物，且應(yīng)用已經(jīng)達(dá)到達(dá)二十年左右，難以見(jiàn)到其他藥物的使用；（2）模型評(píng)價(jià)方式較為簡(jiǎn)單，主流是直觀反映中醫(yī)證型的一般狀況與反映病理機(jī)制的生化組織學(xué)相結(jié)合，這種評(píng)價(jià)體系已經(jīng)有多年歷史，雖然能在一定程度上起到病證結(jié)合、反映疾病的病理機(jī)制的作用，但存在創(chuàng)新性不足，而且評(píng)價(jià)指標(biāo)較為簡(jiǎn)單，比如認(rèn)為動(dòng)物出現(xiàn)一定癥狀表現(xiàn)即認(rèn)為造模成功，而這種評(píng)價(jià)方式容易受到主觀因素的干擾而損害可靠性，因此整體評(píng)價(jià)體系有待充實(shí)；（3）對(duì)于證候本質(zhì)的深入研究不足，與腎陽(yáng)虛證候有關(guān)的特異性標(biāo)志物檢測(cè)引入少，多為臨床常見(jiàn)生化指標(biāo)，分子生物學(xué)層面特別是組學(xué)研究參與不足；（4）與病理造模方法對(duì)應(yīng)的中醫(yī)病因造模方法更是未見(jiàn)到文獻(xiàn)報(bào)道，中醫(yī)證候因素參與明顯不足。隨著醫(yī)學(xué)研究的不斷深入，對(duì)于動(dòng)物模型能夠復(fù)刻人類疾病的還原程度以及對(duì)于中醫(yī)證候本質(zhì)認(rèn)識(shí)的要求也不斷提高，而滯后的造模方法嚴(yán)重阻礙了對(duì)疾病本質(zhì)的研究探索。

2 標(biāo)準(zhǔn)化慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型的構(gòu)建與評(píng)價(jià)

2.1 對(duì)慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型構(gòu)建的思考

2.1.1 動(dòng)物模型的構(gòu)建

慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型，顧名思義，除了“慢性腎臟病”之外還有“腎陽(yáng)虛證”，即中醫(yī)證候表現(xiàn)。作為病證結(jié)合模型，在目前的模型構(gòu)建中，主要著眼于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的病理表現(xiàn)，而對(duì)于引入中醫(yī)證候因素則存在不足。單純的采用以藥物模擬腎陽(yáng)虛證表現(xiàn)，雖然可以再現(xiàn)陽(yáng)虛證候，但實(shí)際上中醫(yī)證候發(fā)展是一個(gè)多變而復(fù)雜的過(guò)程，單純采用藥物模擬可能并不能完全真實(shí)反映中醫(yī)證候的發(fā)生發(fā)展,難以將“病”與“證”有機(jī)結(jié)合，采用復(fù)合因素，盡可能還原真實(shí)疾病情況與模擬病因病機(jī)制備模型可能是更加理想的選擇。在造模方式上，可以考慮參考腎陽(yáng)虛證本證的造模方式，不單獨(dú)使用藥物從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)腎損害的角度來(lái)造模，還要從中醫(yī)病因病機(jī)上入手，加入能體現(xiàn)中醫(yī)思想并能在一定程度上量化的方式對(duì)腎陽(yáng)虛證的病因病機(jī)進(jìn)行模擬，從而達(dá)到還原真實(shí)疾病發(fā)生發(fā)展的目的。

2.1.2 作者團(tuán)隊(duì)的探索

在本團(tuán)隊(duì)的實(shí)際研究中，采取基礎(chǔ)疾病合并復(fù)合因素的造模思路。即首先采用阿霉素尾靜脈注射方式制備慢性腎臟病模型，阿霉素腎病模型其原理是阿霉素?fù)p害腎臟足細(xì)胞，腎小球出現(xiàn)節(jié)段性硬化，腎小管變形，呈現(xiàn)大量蛋白尿，在疾病表現(xiàn)上較為接近人類腎病綜合征，隨著阿霉素腎病的發(fā)展，大量蛋白的丟失，模型本身即有可能出現(xiàn)腎陽(yáng)虛證的表現(xiàn)，隨后采取增加復(fù)合因素二次造模的方式，復(fù)合因素參考腎陽(yáng)虛證模型制備方法，如引入氫化可的松、羥基脲、他巴唑等藥物方式，在保持模型動(dòng)物器官完整的情況下利用藥物誘導(dǎo)動(dòng)物出現(xiàn)腎陽(yáng)虛證的表現(xiàn)，最后篩選獲得最符合要求的慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證動(dòng)物模型。這種造模方式優(yōu)點(diǎn)在于：首先，不通過(guò)手術(shù)造模，保持實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織與器官完整，符合臨床大多數(shù)患者雙腎保存的實(shí)際，也可以規(guī)避手術(shù)對(duì)動(dòng)物造成的不必要損傷與死亡；其次，采取阿霉素腎病作為基礎(chǔ)慢性腎臟病模型，可以較好地模擬人類慢性腎臟病疾病表現(xiàn)，并隨病程發(fā)展逐漸出現(xiàn)腎陽(yáng)虛的癥狀；再者引入其他腎陽(yáng)虛證造模藥物，可以提高模型成功率，并且這些藥物作用的靶器官表現(xiàn)可以一定程度上模擬慢性腎臟病后期機(jī)體多器官多系統(tǒng)受累的表現(xiàn)，從而再現(xiàn)陽(yáng)虛證的多種證候表現(xiàn)；最后，通過(guò)這種多復(fù)合因素并行比較的方式，可以從現(xiàn)有的多種造模方式中篩選出最符合人類慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證表現(xiàn)的造模因素，進(jìn)而建立標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物模型制備標(biāo)準(zhǔn)。而對(duì)于模型的評(píng)價(jià)，采取中醫(yī)證候評(píng)分量表、臨床生化指標(biāo)檢測(cè)、特異性靶腺軸標(biāo)志物檢測(cè)與組學(xué)指標(biāo)檢測(cè)，以及中藥方劑反證方式相結(jié)合的評(píng)價(jià)體系，從而盡可能的全面準(zhǔn)確把握慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證的證候與其本質(zhì)。

2.2 對(duì)慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證模型評(píng)價(jià)方式的思考

2.2.1 評(píng)價(jià)指標(biāo)

2.2.1.1 特異性指標(biāo)的充實(shí)

在上文實(shí)驗(yàn)指標(biāo)部分中，癥狀體征，靶腺軸指標(biāo)和代謝指標(biāo)cAMP∕cGMP屬于常用的腎陽(yáng)虛證的特異性指標(biāo)，而其他指標(biāo)大部分是CKD常規(guī)病理指標(biāo)。有文獻(xiàn)顯示，慢性腎臟病標(biāo)證以濕熱、瘀血為主，本虛證包括脾腎氣虛、肺腎氣虛、脾腎陽(yáng)虛證等[21-22]。而對(duì)這些證型的認(rèn)定，目前根據(jù)文獻(xiàn)總結(jié)來(lái)看仍以臨床證候?yàn)橹?，?duì)于中醫(yī)證型對(duì)應(yīng)生化指標(biāo)研究仍以常規(guī)臨床檢驗(yàn)指標(biāo)為主，如上海龍華醫(yī)院對(duì)中醫(yī)證型與實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)關(guān)系進(jìn)行了研究，研究采用的指標(biāo)均為臨床常用指標(biāo)[23]。而要完善模型的評(píng)價(jià)方式，確定模型證候是否符合造模要求，只有臨床常規(guī)指標(biāo)尚不能滿足，需要在評(píng)價(jià)指標(biāo)中增加靶腺軸等特異性指標(biāo)的項(xiàng)目比重，從多個(gè)特異性位點(diǎn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，這樣才能全面準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)模型。

2.2.1.2 新指標(biāo)的引入

在新指標(biāo)的引入上，目前在腎陽(yáng)虛模型中已經(jīng)廣泛引入代謝組學(xué)等研究方法，并發(fā)現(xiàn)在腎陽(yáng)虛證中在能量代謝、氨基酸和脂肪酸代謝上存在變化。比如關(guān)氏等[24]運(yùn)用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對(duì)CKDⅠ-Ⅴ期分期患者和健康人血漿代謝物進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)不同階段CKD患者血漿標(biāo)本存在明顯差異,在血漿中找到鞘氨醇、?；撬?、原卟啉Ⅸ等27個(gè)差異化合物。認(rèn)為不同階段CKD患者血漿中膽紅素循環(huán)、鞘脂類代謝、類固醇類代謝等通路出現(xiàn)紊亂。李氏等[25]進(jìn)行慢性腎衰竭早中期慢性腎衰竭患者血清代謝分析，發(fā)現(xiàn)與健康人血清相比較，精氨酸、脯氨酸、乙酸、谷氨酸、三甲胺、丙三醇、苯丙氨酸、乳酸等含量明顯上升；檸檬酸、丙三醇磷酰膽堿、甘氨酸、α-葡萄糖、三甲銨乙內(nèi)酯含量明顯下降。林氏[26]等用血清蛋白質(zhì)組學(xué)對(duì)糖尿病慢性腎臟疾病致病因子和早期診斷指標(biāo)進(jìn)行探索發(fā)現(xiàn)：MASP2、前凝血酶原、Igα1鏈C區(qū)段等與CKD的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，由此認(rèn)為臨床血清蛋白質(zhì)組學(xué)可作為CKD診斷有效研究手段。謝氏[27]對(duì)CKD4期不同證候及證候演變過(guò)程中脂質(zhì)代謝物異常分析后得出結(jié)論：脾腎氣虛兼濕濁瘀阻證、脾腎氣虛、濕濁瘀阻兼濕熱證的發(fā)展伴隨eGFR降低，兩組證候潛在脂質(zhì)標(biāo)志物主要是溶血性磷脂、磷脂和鞘脂。這些代謝組學(xué)結(jié)果可以反映機(jī)體內(nèi)實(shí)時(shí)的代謝變化，與證候的發(fā)生發(fā)展具有同步性。但這些組學(xué)研究在慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證模型評(píng)價(jià)中卻未見(jiàn)到相關(guān)報(bào)道。一些隨著現(xiàn)代研究不斷深入被挖掘的新指標(biāo)新位點(diǎn)也極少體現(xiàn)在現(xiàn)行模型評(píng)價(jià)體系中，阻滯了對(duì)中醫(yī)證型下疾病機(jī)制的揭示，這是發(fā)展腎陽(yáng)虛腎病模型迫切需要解決的問(wèn)題。

2.2.2 評(píng)價(jià)體系

2.2.2.1 整體評(píng)價(jià)體系的構(gòu)建

在腎病模型的評(píng)價(jià)方式這一問(wèn)題上，首先應(yīng)對(duì)現(xiàn)有評(píng)價(jià)體系進(jìn)行回顧，篩選針對(duì)性強(qiáng)的評(píng)價(jià)方式，在證候上選擇表現(xiàn)明顯，區(qū)分度好，有量化可能，并符合臨床表現(xiàn)的證候。在生化指標(biāo)上，增加特異性生化指標(biāo)內(nèi)容，特別是已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)中獲得證實(shí)的靶腺軸指標(biāo)應(yīng)該作為常規(guī)評(píng)價(jià)方式。然后要建立非單一評(píng)價(jià)方式，對(duì)模型成模與否進(jìn)行全面綜合的評(píng)價(jià)。應(yīng)注意考慮引入腎陽(yáng)虛證的相關(guān)分子生物學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)，特別是代謝組學(xué)、蛋白組學(xué)、基因組學(xué)這三大組學(xué)，這些組學(xué)研究極大地推動(dòng)了對(duì)于疾病證候的物質(zhì)基礎(chǔ)的認(rèn)識(shí)，因此作為揭示疾病物質(zhì)基礎(chǔ)的重要手段，組學(xué)研究在慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證模型的評(píng)價(jià)體系中應(yīng)是重要的組成部分。再有不可忽視從中醫(yī)理論出發(fā)，根據(jù)腎的生理病理特點(diǎn)以及臟腑關(guān)系思考引入腎系以外的臟腑體系評(píng)價(jià)。最后，還應(yīng)加入藥物反證的內(nèi)容。觀察模型動(dòng)物對(duì)證候?qū)?yīng)方藥的反應(yīng)是驗(yàn)證模型是否符合所研究證候的重要方式。

2.2.2.2 腎外藏象評(píng)價(jià)體系

無(wú)論是慢性腎臟病還是腎陽(yáng)虛證，都是全身綜合性的病證，波及全身除腎外的多個(gè)臟腑器官。因此有必要考慮引入腎系之外的藏象評(píng)價(jià)。舉例來(lái)說(shuō)，腎具有主藏精、主水、主納氣的生理功能，腎陽(yáng)可以推動(dòng)和激發(fā)臟腑的各種機(jī)能，溫煦全身臟腑形體官竅，推動(dòng)和調(diào)控機(jī)體新陳代謝的過(guò)程，腎陽(yáng)虛衰則臟腑機(jī)能減退。臨床上與腎陽(yáng)衰退有關(guān)的臟腑兼證常可見(jiàn)心腎陽(yáng)虛和脾腎陽(yáng)虛，表現(xiàn)除了腎系病癥之外的心系和脾系癥狀，如心悸、胸悶、畏寒、腹瀉等。而腎陽(yáng)虛衰氣化不利，則腎氣衰弱攝納無(wú)力，呼多吸少，表現(xiàn)出肺系癥狀。這些腎外臟腑的病理表現(xiàn)乃至病理生化指標(biāo)也可以考慮作為參考，但也要把握證型之間的分界。當(dāng)然，腎外藏象體系的評(píng)價(jià)還需要更多的臨床與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)支持。總而言之，打開(kāi)思路，擴(kuò)大視野，深挖內(nèi)涵才能建立全面可靠的模型評(píng)價(jià)體系。

3 總結(jié)與展望

慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證模型對(duì)于揭示腎臟疾病與“腎陽(yáng)虛證”的物質(zhì)基礎(chǔ)，探索治療手段有著重要意義。但從文獻(xiàn)來(lái)看，慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證模型一直以來(lái)缺乏系統(tǒng)的分析與研究。本文首次對(duì)慢性腎臟病腎陽(yáng)虛證模型的文獻(xiàn)進(jìn)行了整理，總結(jié)了目前本模型的造模方法、評(píng)價(jià)指標(biāo)與應(yīng)用意義。同時(shí)也提出了目前模型存在的問(wèn)題，討論了可能的改進(jìn)空間。當(dāng)前模型發(fā)展的主要問(wèn)題有：模型缺乏規(guī)范化；造模因素單一；模型成模缺乏公認(rèn)可靠的判斷標(biāo)準(zhǔn)；科學(xué)量化的生化與分子生物學(xué)指標(biāo)體系不足等。在本團(tuán)隊(duì)的研究工作中，采用反復(fù)論證后確定的復(fù)合因素進(jìn)行造模的動(dòng)物已經(jīng)表現(xiàn)出一系列陽(yáng)虛證候，并為此制作了專門(mén)的分級(jí)量表進(jìn)行量化處理，同時(shí)取材收集了動(dòng)物的血清和多種靶器官組織進(jìn)行了一系列靶腺軸與代謝物生化指標(biāo)檢測(cè)，后續(xù)還將開(kāi)展三大組學(xué)的研究。因此，這一領(lǐng)域后續(xù)的研究，應(yīng)該包括合理選擇造模動(dòng)物，規(guī)范和創(chuàng)新性造模方式，應(yīng)用復(fù)合因素造模以及建立全面深入的動(dòng)物模型評(píng)價(jià)體系，從而建立符合中醫(yī)理論與臨床實(shí)際的動(dòng)物模型，這也是對(duì)于中醫(yī)證候研究的重要補(bǔ)充和促進(jìn)。