竹靈消根的化學(xué)成分研究*

孫 麗 ，杜繼權(quán)，張志君

(湖北科技學(xué)院藥學(xué)院，湖北 咸寧 437100)

竹靈消(cynanchuminamoenum)為蘿藦科(asclepiadaceae)鵝絨藤屬植物，產(chǎn)于遼寧、河北、河南、山東、山西、安徽、浙江、湖北、湖南、陜西、甘肅、貴州、四川、西藏[1-2]，生長于海拔100～3500米的山地疏林、灌木叢或山頂、山坡草地上[3]，朝鮮和日本也有分布[4]。根可藥用，能除煩清熱、散毒、通疝氣；民間用作治療婦女血厥、產(chǎn)后虛煩、妊娠遺尿、疥瘡及淋巴炎等[5-6]。鵝絨藤屬植物如白薇、白前、徐長卿等富含C21甾體苷類成分，它們具有廣泛的生物活性，C21甾體苷多變的骨架和糖鏈上去氧糖種類、數(shù)量以及連接方式的多變，不斷有新化合物被發(fā)現(xiàn)，近年來C21甾體苷一直是藥物化學(xué)家的研究熱點[7-8]。竹靈消作為鵝絨藤屬的藥用植物，也含有豐富的C21甾體苷類成分，目前對其化學(xué)成分研究較少，據(jù)報道從竹靈消中分離的C21甾體苷類化合物在20個左右[2-6]。本課題對竹靈消根80%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中分離得到5個化合物，所有化合物均為首次從該植物中發(fā)現(xiàn)。

1 材料與方法

1.1 儀器與藥材

高效液相色譜儀(北京清博華科技有限公司)；電子天平(上海越平科學(xué)儀器有限公司)；半制備液相色譜儀(大連依利特分析儀器有限公司)；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(蘇州博海電子有限公司)；核磁共振儀(瑞士Bruker公司)。

柱色譜硅膠和薄層硅膠板(青島海洋化工廠)；SephadexLH-20(凝膠Pharmacia有限公司)；甲醇、二氯甲烷等試劑(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑)。

本實驗原材料竹靈消的根(8kg)，于2016年12月購買于云南龍陵縣，由湖北科技學(xué)院藥學(xué)院張志君鑒定為鵝絨藤屬植物竹靈消的根。

1.2 提取與分離

竹靈消藥材8.0kg，加80%的乙醇加熱回流提取3次，每次2h合并濾液減壓濃縮得總浸膏(1400g)，加水3L混合均勻，用石油醚萃取后再用乙酸乙酯萃取，蒸餾除去乙酸乙酯，得到乙酸乙酯部位的浸膏(180g)，再用二氯甲烷-甲醇(50∶1,12.5∶1,8∶1,3∶1)梯度洗脫，共得到極性不同的8個部分，命名為A-H。其中A、C、D、H部分先用硅膠柱進(jìn)行初步分離。

2 結(jié) 果

通過半制備液相，分別得到化合物1(60mg)，化合物2(18mg)，化合物3(15mg)，化合物4(17mg)，化合物5(23mg)?；衔?-5的結(jié)構(gòu)見圖1。

圖1 竹靈消中分離的化合物結(jié)構(gòu)

化合物1：無色針晶(C28H40O8)，香草醛-濃硫酸反應(yīng)(TLC)顯紫紅色。1H NMR譜中去屏蔽三取代烯氫δ6.25 (1H，s)和烯氫δ5.38(1H，d，4.8Hz)，以及一個氧取代亞甲基組δ4.15/3.85(1H/1H；t like，7.0Hz/t like；9.0Hz)，和兩個角甲基δ0.94(3H，s)和1.53(3H，s)揭示化合物為典型的13,14:14,15-雙裂環(huán)孕甾烷苷元結(jié)構(gòu)。13C NMR譜中，共有28個C信號，21個C為苷元，其余的7個為去氧糖部分，苷元上有2組烯鍵碳信號δ143.3、140.2 、120.2和118.0以及去氧糖部分的端基碳信號δ97.8，顯示連接了一個單糖oleandrose，13C NMR數(shù)據(jù)見表1。通過與參考文獻(xiàn)[7]對照，該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的波譜數(shù)據(jù)基本一致，鑒定該化合物為Cynatratoside A。

表1 化合物(1～3)的13C NMR(δppm)數(shù)據(jù)

化合物2：白色無定形粉末(C42H64O14)，香草醛-濃硫酸反應(yīng)(TLC)顯紫紅色。1H NMR(500MHz,CDCl3)：δ6.24(1H,m,H-18)，3.55(1H,m,H-3)，3.42(1H,m,H-17)，2.36(1H,m,H-4)，5.39(1H,d,H-6)，1.55(3H,m,H-21)，2.60(1H,m,H-11)，0.91(3H,m,H-19)。13C NMR數(shù)據(jù)見表1。通過與參考文獻(xiàn)[8]對照，該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的波譜數(shù)據(jù)基本一致，鑒定該化合物為Atratcynoside C。

化合物3：無色針晶(C28H40O7)，香草醛-濃硫酸反應(yīng)(TLC)顯紫紅色。1H NMR (500MHz,CDCl3)：δ6.24(1H,m,H-18)，0.92(3H,s,H-19)，1.58(3H，s,H-21)，3.86(1H，m,H-3)，3.81(1H,dd,H-15)，1.72(1H，m,H-2)，4.26(1H,brd,H-15)，5.41(1H,br s,H-6)，4.78(1H,dd,H-16)，4.10(1H,d,H-18)。13C NMR數(shù)據(jù)見表1。通過與參考文獻(xiàn)[8]對照，該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的波譜數(shù)據(jù)基本一致，鑒定該化合物為Atratcynoside F。

化合物4：無色針晶(C30H50O)，Libermann-Burchard反應(yīng)顯紫紅色。1H NMR (500 MHz，CDCl3)：δ3.24(1H，dd，H-3)，8個甲基信號如下：δ0.76(3H，s)，0.77(3H，s)，0.79(3H，s)，0.83(3H，d)，0.84(3H，d)，0.94(3H，s)，0.95(3H，s)，1.00(3H，s)，其中有2個二重裂峰，耦合常數(shù)都為6.4Hz，6個是單峰。13C NMR(125 MHz，CDCl3)：δ35.8(C-1)，27.9(C-2)，78.9(C-3)，38.1(C-4)，50.3(C-5)，19.0(C-6)，28.3(C-7)，134.1(C-8)，134.2(C-9)，37.5(C-10)，20.3(C-11)，26.9(C-12)，36.6(C-13)，41.0(C-14)，30.2(C-15)，35.4(C-16)，42.8(C-17)，52.6(C-18)，18.9(C-19)，27.2(C-20)，59.7(C-21)，30.7(C-22)，27.9(C-23)，15.7(C-24)，20.1(C-25)，22.0(C-26)，15.4(C-27)，14.6(C-28)，22.0(C-29)，23.0(C-30)。通過與參考文獻(xiàn)[9]對照，該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的波譜數(shù)據(jù)基本一致，鑒定該化合物為異莫替醇。

化合物5：無色油狀物(C16H28O3)。1H NMR(500 MHz，CD3OD)：δ2.34(1H，m，H-2)，4.06(1H，dd，H-3)，5.60(1H，dd，H-4)，6.49(1H，dd，H-5)，5.96(1H，t，H-6)，5.41(1H，m，H-7)，2.20(2H，m，H-8)，1.60(1H，m，H-9)，1.33(2H，m，H-10)，1.33(2H，m，H-11)，1.33(2H，m，H-12)，1.33(2H，m，H-13)，1.33(2H，m，H-14)，1.33(2H，m，H-15),0.91(3H，t，H-16)。13C NMR(125MHz,CDCl3)：δ177.0(C-1)，37.1(C-2)，72.0(C-3)，135.9(C-4)，125.1(C-5)，128.0(C-6)，131.6(C-7)，27.2(C-8)，25.2(C-9)，29.5(C-10),29.2(C-11)，29.1(C-12)，29.0(C-13)，31.2(C-14)，22.2(C-15)，13.1(C-16)。通過與參考文獻(xiàn)[10]對照，該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的波譜數(shù)據(jù)基本一致，鑒定該化合物為3(ζ)-hydroxy-hexadeca-4(E),6(Z)-dienoic acid。

3 討 論

鵝絨藤屬的植物具有較高的藥用價值，如藥典收載的徐長卿、白前和白薇，它們普遍含有豐富的C21甾體類化合物，竹靈消同為鵝絨藤屬植物，據(jù)文獻(xiàn)報道[11-12]，竹靈消中也含有C21甾體類的化合物，但是學(xué)者對其化學(xué)成分研究較少，發(fā)現(xiàn)的化合物結(jié)構(gòu)類型不多，本文分離獲得到的3個C21甾體類的化合物，1個植物甾醇類化合物和1個二烯酸類化合物均為首次從竹靈消中發(fā)現(xiàn)，對竹靈消化學(xué)成分的研究進(jìn)行了補(bǔ)充，為C21甾體類的化合物的研究提供了理論和物質(zhì)基礎(chǔ)。