ATX-LPA 和MAPK 信號通路與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎臨床征象的關(guān)系研究

馬衍慧 章建峰 劉麗敏

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）臨床常見，可累及全身多個關(guān)節(jié)及其周圍組織，臨床表現(xiàn)為關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、活動受限，患者生存質(zhì)量明顯降低[1-2]。RA 發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，涉及免疫、炎癥等多個環(huán)節(jié)，受到多個免疫炎癥相關(guān)信號通路的影響[3]。自分泌運(yùn)動因子-溶血磷脂酸（ATX-LPA）是與機(jī)體免疫相關(guān)的信號通路，絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路與關(guān)節(jié)炎癥密切相關(guān)[4-5]。本研究探討ATX-LPA和MAPK 信號通路與RA 臨床征象的關(guān)系，旨在為通過ATX-LPA 和MAPK 信號通路干預(yù)進(jìn)行RA 防治提供證據(jù)，報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 前瞻性連續(xù)選取2017 年1 月—2018 年3 月浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬湖州中醫(yī)院收治的RA[6]患者72 例為RA 組，并以同期30 例膝骨關(guān)節(jié)炎（OA）[7]患者為OA 組，以30 名健康志愿者為健康對照組。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過，符合《赫爾辛基宣言》倫理原則，三組研究對象均簽署知情同意書。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) RA 組、OA 組患者均根據(jù)影像學(xué)檢查、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查等確診，健康對照組無急慢性病癥；三組研究對象在3 個月內(nèi)未使用糖皮質(zhì)激素；性別不限，年齡均在18 周歲以上。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) 合并其他骨關(guān)節(jié)疾病、其他免疫系統(tǒng)疾病、嚴(yán)重外傷感染者；合并全身重要臟器功能障礙者；哺乳期或孕期女性；因各類原因無法配合完成相關(guān)治療或檢查檢測者等。

2 方 法

2.1 觀察指標(biāo)及方法 （1）RA 組、OA 組治療前，健康對照組入組次日取空腹靜脈血5mL，置于肝素抗凝管中，上高速離心機(jī)，以5000r/min 轉(zhuǎn)速、3cm 半徑在4℃環(huán)境中離心處理10min，待分層后取上層血清冷藏待測。ELISA 法檢測三組血清ATX、LPA、MAPK、類風(fēng)濕因子（RF）表達(dá)水平，檢測試劑盒（批號2017006、20160025、20170003、20160442）均購自上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，檢測儀器為美國Awareness STAT FAX2100 酶標(biāo)儀，具體檢測按照儀器和試劑盒說明書進(jìn)行。（2）采用疼痛視覺模擬評分（VAS）[8]分析關(guān)節(jié)疼痛程度。（3）采用DAS28 評分分析RA 組疾病活動度，DAS28 評分≤5.1 分為病情低中度活動，DAS28 評分＞5.1 分為病情高度活動[9]。比較RA 組不同病情活動情況患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平及VAS 評分。

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（） 表示，多組比較采用方差分析，兩組比較采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson 線性相關(guān)法；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 三組研究對象基線資料比較 三組研究對象基線資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 三組研究對象基線資料比較

3.2 三組研究對象血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平比較 與健康對照組比較，RA 組血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平均升高，OA 組血清MAPK 水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與OA 組比較，RA組血清ATX、LPA、RF 水平均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組研究對象血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平比較（）

表2 三組研究對象血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平比較（）

注：RA 為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；OA 為膝骨關(guān)節(jié)炎；ATX 為自分泌運(yùn)動因子；LPA 為溶血磷脂酸；MAPK 為絲裂原活化蛋白激酶；RF 為類風(fēng)濕因子；與健康對照組比較，aP＜0.05；與OA 組比較，bP＜0.05

3.3 RA 組不同病情活動程度患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平及VAS 評分比較 RA 組72 例中，病情低中度活動患者27 例，病情高度活動患者45例。與病情低中度活動患者比較，高度活動患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平以及VAS 評分均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

3.4 RA 組患者血清ATX、LPA、MAPK 水平與血清RF 水平、DAS28 評分以及VAS 評分相關(guān)性分析Pearson 線性相關(guān)分析結(jié)果顯示，RA 組血清ATX、LPA、MAPK 水平與血清RF 水平、DAS28 評分及VAS 評分均呈正相關(guān)（ATX：r=0.796、0.889、0.886；LPA：r=0.843、0.875、0.898；MAPK：r=0.858、0.752、0.879，P＜0.05）。

4 討論

RA 臨床主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)腫脹疼痛以及關(guān)節(jié)活動受限，甚至殘疾，嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量[10-11]。RA的發(fā)生發(fā)展與多個病理過程及其相關(guān)信號通路有關(guān)[12-13]。ATX 為分泌型糖蛋白，可將溶血磷脂酸膽堿水解為LPA，LPA 參與細(xì)胞增殖、遷移等生物學(xué)效應(yīng)，ATX-LPA 與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移、血管發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、神經(jīng)病理性疼痛和瘙癢、肥胖、糖尿病等均密切相關(guān)[14-15]。本研究顯示，RA 患者血清ATX、LPA、RF表達(dá)水平均明顯高于OA 患者及健康人群（P＜0.05），提示ATX-LPA 信號通路與RA 發(fā)生發(fā)展可能相關(guān)。本研究中病情高度活動的RA 患者血清ATX、LPA、RF 水平以及VAS 評分均高于病情低中度活動患者（P 均＜0.05），進(jìn)一步Pearson 線性相關(guān)分析顯示，RA患者血清ATX、LPA 水平與病情指標(biāo)血清RF 水平、疼痛評價指標(biāo)VAS 評分以及疾病活動度DAS28 評分均密切相關(guān)（P 均＜0.05），認(rèn)為ATX-LPA 信號通路參與RA 發(fā)生發(fā)展，可作為其防治干預(yù)靶點(diǎn)。

MAPK 為絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族，是重要的激酶傳導(dǎo)信號通路，多項(xiàng)研究證實(shí)其與軟骨細(xì)胞損傷和凋亡相關(guān)，且可通過影響多條信號通路而加速骨關(guān)節(jié)炎的進(jìn)展[16-18]。本研究結(jié)果顯示，RA 患者血清MAPK 表達(dá)水平與OA 患者無明顯差異，而RA與OA 患者血清MAPK 表達(dá)水平均明顯高于健康人群（P＜0.05），提示MAPK 亦可能參與RA 和OA 發(fā)生發(fā)展。本研究中病情高度活動的RA 患者血清MAPK、RF 水平以及VAS 評分均高于病情低中度活動患者（P＜0.05），Pearson 線性相關(guān)分析結(jié)果顯示，RA 患者的血清MAPK 水平與與RF、VAS 評分及DAS28 評分均密切相關(guān)（P＜0.05），認(rèn)為MAPK 信號通路參與RA 發(fā)生發(fā)展，可能作為其防治干預(yù)靶點(diǎn)。ATX-LPA 信號通路、MAPK 信號通路抑制及其相關(guān)藥物開發(fā)應(yīng)用可能有助于控制RA 患者疼痛癥狀和病情，提高治療效果。

表3 RA 組不同病情活動程度患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平及VAS 評分比較（）

表3 RA 組不同病情活動程度患者血清ATX、LPA、MAPK、RF 水平及VAS 評分比較（）

注：病情高度活動為DAS28 評分＞5.1 分；病情低中度活動為DAS28 評分≤5.1 分；RA 為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；ATX 為自分泌運(yùn)動因子；LPA 為溶血磷脂酸；MAPK 為絲裂原活化蛋白激酶；RF 為類風(fēng)濕因子；VAS 為疼痛視覺模擬評分；與病情低中度活動患者比較，aP＜0.05

綜上所述，ATX-LPA 信號通路和MAPK 信號通路均與RA 疾病活動度、疼痛程度等臨床征象相關(guān)，ATX-LPA 信號通路和MAPK 信號通路干預(yù)可能為RA 防治新靶點(diǎn)。