中藥復(fù)方催情顆粒劑的制備工藝優(yōu)化

蘇圓圓楊耀森尹薪項(xiàng)楊艷艷褚秀玲?

（1．吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院，吉林吉林132022；2．聊城大學(xué)農(nóng)學(xué)院，山東聊城252000；3．河北科為先生物科技有限公司，河北衡水053000）

隨著毛驢養(yǎng)殖數(shù)量的增加和養(yǎng)殖模式的改變，毛驢人工授精的比例越來(lái)越高［1］，而提供精液的種公驢由于采精的頻繁表現(xiàn)出來(lái)精液稀薄，精子活力低等精液質(zhì)量不達(dá)標(biāo)的現(xiàn)象［2］。 為了改善種公驢的精液質(zhì)量，查閱相關(guān)文獻(xiàn)，自擬種公驢催情散劑方，初步試驗(yàn)效果良好。 但是散劑存在體積大、不易運(yùn)輸、保存和儲(chǔ)存難使用不便及口感差等缺點(diǎn)，故進(jìn)一步將其開(kāi)發(fā)為顆粒劑。 顆粒劑是在散劑的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步提取、濃縮，添加輔料，制成的固體劑型［3］，不僅除去了大量的雜質(zhì)，起效快，且體積小，易保存，使用方便［4］，更適合現(xiàn)代規(guī)模化養(yǎng)驢的飼喂模式。 其中，顆粒劑成型是顆粒制備的重要工藝，輔料的選擇和制粒的方法是影響顆粒劑質(zhì)量的關(guān)鍵因素。 本試驗(yàn)采用濕法制粒，將散劑配方提取、濃縮和干燥后，優(yōu)化輔料的種類和比例，優(yōu)選出最佳成型工藝，為處方臨床大規(guī)模生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1．1 材料與儀器 淫羊藿、熟地黃和菟絲子等7味中藥飲片購(gòu)自聊城利民大藥店；可溶性淀粉和糊精購(gòu)自天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；無(wú)水乙醇購(gòu)于萊陽(yáng)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠。 中藥萬(wàn)能粉碎機(jī)，天津市泰斯特儀器有限公司；標(biāo)準(zhǔn)樣篩，振興中泰五金絲網(wǎng)商貿(mào)有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮。

1．2 方法

1．2．1 干膏粉的制備 根據(jù)散劑處方準(zhǔn)確稱量中藥飲片，使用萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎后，過(guò)60 目篩備用。首先采用60%乙醇浸提，料液比1∶20，提取條件為60 ℃，2 h，提取完成后，雙層紗布過(guò)濾藥渣，重復(fù)提取一次，料液比改為1∶10，其他條件不變，完成后布氏漏斗過(guò)濾藥渣，合并提取液。 提取后的藥渣再次使用熱水浸提，料液比為1∶15，提取溫度90 ℃，提取時(shí)間2 h，提取完成后，過(guò)濾，濾液合并。 將所有濾液減壓蒸餾濃縮，然后60 ℃低溫干燥，干燥后的膏劑，粉碎，過(guò)80 目篩，備用。

1．2．2 濕法制粒 按處方準(zhǔn)確稱取藥物（干膏粉）和輔料，混合均勻，使用乙醇作為潤(rùn)濕劑，通過(guò)噴淋的方法加入，邊加邊攪拌，直至能形成軟材，使其“握之成團(tuán)，輕觸即散”，使用14 目篩手動(dòng)制粒，在60 ℃下干燥，用10 目篩整粒，用于指標(biāo)的測(cè)定。

1．2．3 測(cè)定指標(biāo) 采用成型率、堆密度和休止角三個(gè)指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)顆粒的質(zhì)量［5］，采用加權(quán)評(píng)分法分析試驗(yàn)結(jié)果，優(yōu)化輔料的篩選和顆粒的成型工藝。1．2．3．1 成型率測(cè)定 采用雙篩分法，將干燥后的顆粒先稱重，記為a，先過(guò)1 號(hào)篩，再過(guò)5 號(hào)篩，收集能過(guò)1 號(hào)篩而不能通過(guò)5 號(hào)篩的合格顆粒稱重，記為b，顆粒的成型率（%） ＝b／a × 100。

1．2．3．2 堆密度測(cè)定 準(zhǔn)確稱取樣品顆粒10 g，將其放入干燥的25 mL 量筒中，輕輕震動(dòng)，直至顆粒體積不再變化，讀出其體積毫升數(shù)（mL），記為c，堆密度值（g／mL） ＝10／c。

1．2．3．3 休止角測(cè)定 采用固定漏斗法測(cè)定，將3只相同的玻璃漏斗依次串聯(lián)固定到鐵架臺(tái)上，前兩個(gè)漏斗的出口要接觸到下一個(gè)漏斗的壁上，使最下面的漏斗出口距離桌面約2 cm，桌面上鋪好畫(huà)有刻度的坐標(biāo)紙，將制備好的顆粒勻速的從最上面的漏斗緩慢倒入，觀察下面顆粒的體積，直到顆粒的頂部接觸到最下面的漏斗口時(shí)即停止。 測(cè)量坐標(biāo)紙上圓錐形顆粒的底部直徑，計(jì)為D，休止角α 按公式計(jì)算，tanα ＝tan（2／0．5D） ＝tan （4／D）。

采用加權(quán)評(píng)分法分析試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)定顆粒的成型率加權(quán)系數(shù)為0．4、休止角的加權(quán)系數(shù)為0．3，堆密度的加權(quán)系數(shù)為0．3，綜合評(píng)分值＝（成型率／最大成型率×0．4 ＋最小休止角值／休止角值×0．3 ＋堆密度值／最大堆密度值×0．3） ×100。

1．2．4 輔料的篩選 輔料和藥物的配比以及輔料的種類是影響顆粒質(zhì)量的關(guān)鍵因素，根據(jù)2010 年《中國(guó)藥典》第Ⅰ部中的要求，輔料量一般不超過(guò)藥物量的2 倍［6］，因此，試驗(yàn)選擇藥物和輔料的配比為1∶1。 輔料種類是影響制粒成型的重要因素，根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇可溶性淀粉和糊精作為制粒輔料，輔料的配比見(jiàn)表1。 按1．2．2 制粒，按1．2．3 測(cè)定顆粒的成型率、休止角和堆密度指標(biāo)。

表1 不同處方顆粒配方表（份）Tab 1 Granules formulation of different formulations（portion）

1．2．5 乙醇濃度的優(yōu)化 中藥干膏粉的含糖量高，粘度較大，易吸濕，因此，選擇乙醇作為制粒的潤(rùn)濕劑，分別考察乙醇濃度為60%、70%、80%、90%和100%時(shí)，成品顆粒的品質(zhì)，制粒方法和評(píng)價(jià)指標(biāo)見(jiàn)1．2．4。

1．2．6 乙醇用量的優(yōu)化 選用80%的乙醇，分別考察乙醇和粉劑比例為0． 3 ∶1、0． 35 ∶1、0． 4 ∶1、0．45∶1和0．5∶1 時(shí)，成品顆粒的品質(zhì)、制粒過(guò)程和評(píng)價(jià)指標(biāo)見(jiàn)1．2．4。

1．2．7 正交試驗(yàn)優(yōu)化 根據(jù)已有文獻(xiàn)資料和單因素試驗(yàn)結(jié)果，選擇藥物與輔料配比，乙醇濃度和乙醇用量三個(gè)因素，進(jìn)行三因素三水平的L9（33）正交試驗(yàn)優(yōu)化，試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)表2。

表2 L9（33） 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表Tab 2 The design of orthogonal test

1．2．8 驗(yàn)證性試驗(yàn) 根據(jù)正交試驗(yàn)的結(jié)果，重復(fù)制備三批顆粒制劑。 按處方量準(zhǔn)確稱取原料，按正交試驗(yàn)優(yōu)選工藝進(jìn)行制粒，測(cè)定各項(xiàng)評(píng)價(jià)指標(biāo)，計(jì)算綜合評(píng)分。

1．2．9 統(tǒng)計(jì)與分析 采用SPSS．13 軟件對(duì)計(jì)算處理后的數(shù)據(jù)進(jìn)行正交統(tǒng)計(jì)分析，兩兩比較采用LSD 法。

2 結(jié)果與分析

2．1 輔料的篩選 合適輔料的使用是顆粒成型和顆粒質(zhì)量的關(guān)鍵，輔料包括賦形劑、濕潤(rùn)劑、矯味劑和崩解劑等，由于各種輔料的特性不同，在制粒中通常都是多種輔料的混合使用。 輔料篩選和優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3，綜合評(píng)分顯示淀粉和糊精的比例為1∶3 時(shí)，顆粒的綜合評(píng)分最高，達(dá)到95．96%。 因此，選擇輔料為淀粉：糊精比例為1∶3 作為制粒的輔料。

表3 不同比例輔料處方顆粒綜合評(píng)分Tab 3 The comprehensive score of granules formulation of different ratio excipient

2．2 乙醇濃度的優(yōu)化 乙醇用來(lái)作為制粒的潤(rùn)濕劑，通過(guò)考察不同濃度的乙醇對(duì)制粒的影響效果。由表4 可知，發(fā)現(xiàn)80%的乙醇綜合評(píng)分最高，達(dá)到94．52%。 因此，選擇80% 的乙醇作為制粒的潤(rùn)濕劑。

表4 乙醇濃度對(duì)顆粒成型工藝的影響Tab 4 The effect on granules formation by ethanol concentration

2．3 乙醇用量的優(yōu)化 乙醇的用量關(guān)系到軟材的硬度，影響顆粒的成型率和顆粒的大小。 選用80%的乙醇，評(píng)價(jià)不同用量乙醇的綜合評(píng)分；由表5 可知，乙醇用量為1 ∶0． 4 時(shí)，綜合評(píng)分最高，達(dá)到95．00%，因此，乙醇用量選擇（原料∶乙醇）1∶0．4。

表5 乙醇用量對(duì)顆粒成型工藝的影響Tab 5 The effect on granules formation by ethanol dosage

2．4 正交試驗(yàn)結(jié)果 通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化制粒的最佳工藝，可以系統(tǒng)優(yōu)化制粒參數(shù)，并比較各因素對(duì)制粒綜合評(píng)分影響的大小。 由表6 可知，極差分析顯示藥物和輔料比為1∶1，乙醇濃度80%，乙醇用量1∶0．3 時(shí)，效果最好，制粒最優(yōu)工藝程序?yàn)锳2B2C1，根據(jù)極差R 值可知，三個(gè)因素對(duì)制粒影響的順序是C ＞A ＞B。 正交試驗(yàn)方差分析結(jié)果見(jiàn)表7，C和A 顯著性均小于0．05（P＜0．05），說(shuō)明乙醇用量和藥物輔料比顯著影響制粒的綜合評(píng)分。 組間差異比較顯示，C 與A 或B 比較，差異均顯著（P＜0．05），A 與B 之間差異不顯著（P＞0．05），既乙醇用量C 對(duì)制粒效果影響最明顯。

表6 正交試驗(yàn)結(jié)果Tab 6 The result of orthogonal test

表7 正交試驗(yàn)方差分析Tab 7 The variance analysis of orthogonal test

2．5 驗(yàn)證性試驗(yàn) 為了驗(yàn)證正交試驗(yàn)的結(jié)果，根據(jù)優(yōu)選工藝A2B2C1重復(fù)制粒三次。 由表8 可知，平均綜合評(píng)分達(dá)到94．13%，顆粒外觀均勻，呈棕褐色，表明該工藝具有較好的重現(xiàn)性和操作性。

表8 最佳成型工藝驗(yàn)證Tab 8 The verification test of granules formation

3 討論與結(jié)論

3．1 關(guān)于浸膏的干燥 中藥提取后，由于含糖量高，浸膏的黏稠度大，干燥過(guò)程中經(jīng)常會(huì)外部已經(jīng)板結(jié)，中間還沒(méi)有完全干透，研磨后，粉劑易吸濕，成塊。 試驗(yàn)起初將浸膏和輔料混合后，再進(jìn)行干燥以便減少浸膏粘度，但由于浸膏含水量不好控制，導(dǎo)致輔料的用量不能統(tǒng)一，且浸膏太稠了，導(dǎo)致無(wú)法混合均勻。 最終采用單獨(dú)對(duì)浸膏進(jìn)行干燥，將浸膏鋪開(kāi)，且以發(fā)現(xiàn)60 ℃干燥效果較好，優(yōu)于75 ℃－80 ℃干燥效果。

3．2 關(guān)于輔料的選擇 輔料的種類是影響顆粒成型的重要因素之一。 乳糖、糊精、可溶性淀粉和蔗糖都是制粒中常用的賦形劑［7］。 由于中藥浸膏中含糖量很高，故不宜使用蔗糖和乳糖，否則，會(huì)增加軟材的粘性和顆粒的吸濕性［8－10］。 選擇可溶性淀粉和糊精作為輔料，糊精具有較好的粘合性和成型性，但顆粒的溶化性和抗?jié)裥暂^差。 可溶性淀粉具有較好的流動(dòng)性和潤(rùn)滑性，但吸濕性較大。 通常都是二者配合使用，本研究表明，糊精和可溶性淀粉的比例是3∶1 時(shí)，制粒效果較好，既降低了顆粒的吸濕性，又避免了糊精較強(qiáng)的粘性。 本試驗(yàn)的結(jié)果和裴香萍的實(shí)驗(yàn)結(jié)果［11］一致，即采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選中藥方劑門氏養(yǎng)榮顆粒的成行工藝，試驗(yàn)結(jié)果也顯示糊精∶可溶性淀粉為3∶1 時(shí)，成形性較好。

3．3 關(guān)于潤(rùn)濕劑的優(yōu)化 常用的潤(rùn)濕劑有水和不同濃度的乙醇等，潤(rùn)濕劑的作用主要是使粉劑增加粘性，而便于制粒［12］。 由于中藥中含有大量的糖，輔料使用的糊精粘性也很大，故在中藥的制粒中通常使用乙醇。 高濃度的乙醇由于含水少，制成的軟材太松散，不容易成型，且顆粒細(xì)粉多，而低濃度的乙醇，由于含水多，軟材粘性大，不容易成型，顆粒容易粘結(jié)，不易散開(kāi)［13－14］。 本研究表明采用80%的乙醇，制成的顆粒大小適中，成型率較好。

3．4 結(jié)論 試驗(yàn)結(jié)果表明，藥物干膏與輔料比為1∶1，輔料淀粉與糊精比為1∶3，潤(rùn)濕劑乙醇濃度為80%，用量為（干料∶乙醇）1∶0．3 時(shí)，制備的顆粒劑綜合質(zhì)量評(píng)分最高。 根據(jù)優(yōu)選條件制備的催情顆粒，大小均勻，流動(dòng)性好，呈棕褐色，顆粒指標(biāo)符合藥典標(biāo)準(zhǔn)，且制粒工藝簡(jiǎn)單，操作方便，試驗(yàn)為臨床擴(kuò)大生產(chǎn)提供了較好的參考依據(jù)。