貴州土家族1例B（A）血型鑒定和家系分析

蘇莉 楊家煥 譚安超 楊眉

B（A）血型是一種ABO血型系統(tǒng)中比較罕見的亞型，據(jù)報(bào)道 B（A）血型在歐洲高加索人種中發(fā)生頻率非常低，約為1/（17～58）萬[1]，在我國北方人群中的發(fā)生頻率為1/（5～10）萬[2]，在上海地區(qū)的基因頻率為（0.3～1.6）/10萬[3]，而在貴州地區(qū)未曾見報(bào)道。筆者在工作中檢出1例正反定型不一致的標(biāo)本，疑似AxB血型，并對(duì)其直系親屬進(jìn)行了調(diào)查?，F(xiàn)報(bào)道如下。

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 女性，任某，38歲，土家族，籍貫貴州銅仁印江縣合水鎮(zhèn)，2018年11月20日前來我院申請(qǐng)產(chǎn)前檢查。血型鑒定時(shí)出現(xiàn)正反定型不一致，正定型AB型，反定型B型，經(jīng)血型血清學(xué)及分子生物學(xué)試驗(yàn)證實(shí)該患者血型為B(A)型，并對(duì)其直系親屬父親、母親、丈夫以及孩子的血型進(jìn)行鑒定。

2 試劑 血型微柱凝膠卡（批號(hào)：ABR295A）由美國奧森多公司提供，抗-A（批號(hào)：20180907）、抗-B（批號(hào)：201800504）、ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（批號(hào)：2018110101）均由長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，抗-H（批號(hào)：20170918）、抗-A1（批號(hào)：20180420）均由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供，人源B型血漿由2個(gè)正常人的B型血漿混合而成。

3 方法 血型鑒定按說明書和文獻(xiàn)[4]進(jìn)行操作，基因測(cè)序外送天津市秀鵬生物技術(shù)有限公司檢測(cè)。

結(jié) 果

1 ABO血型血清學(xué)鑒定 分別用卡式法和試管法進(jìn)行檢測(cè)?？ㄊ椒ǎ赫ㄐ褪続B，反定型示B；試管法：正定型顯示與抗-A凝集，抗-A1不凝集，抗-H強(qiáng)凝集，反定型A1c凝集，提示AxB，人源B型血漿弱凝集，也提示為AxB。見表1。注：“w”表示弱凝集，“c”表示細(xì)胞

表1 患者血型血清學(xué)結(jié)果

2 家系調(diào)查結(jié)果 先證者與其母親血清學(xué)表達(dá)格局一致，疑為AxB，父親為O型，丈夫?yàn)锳型，兒子為AB 型。見表2及圖1。

3 基因測(cè)序結(jié)果 患者與母親基因結(jié)果均相同，以A101為參考序列，外顯子1～5未見基因突變，第6外顯子區(qū)域存在261G/del和297A＞G，第7外顯子存在526C＞G、657C＞T、700C＞G、703G＞A、796C＞A、803G＞C、930G＞A的突變，符合B(A)02/O01的基因型特點(diǎn)。見圖2。

表2 家系血型血清學(xué)結(jié)果

討 論

B(A)血清學(xué)特點(diǎn)表現(xiàn)為較弱的A抗原和接近正常的B抗原特異性，血清中存在針對(duì)弱抗原產(chǎn)生的比較強(qiáng)的不規(guī)則抗-A，與抗-H反應(yīng)強(qiáng)度僅次于或接近于 O 型細(xì)胞[2，5]。本次血清學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示紅細(xì)胞上有較強(qiáng)的A抗原和強(qiáng)凝集的B抗原，反定型鑒定格局顯示B血型，提示AxB或B(A)。根據(jù)本地區(qū)亞型的出現(xiàn)頻率，高度懷疑該患者的血型為AxB，但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示抗-H凝集程度4+，而AxB與抗-H的凝集強(qiáng)度較弱，一般為±～1+，B(A)同抗-H的凝集強(qiáng)度比較強(qiáng)，一般為3+～4+，則提示B(A)的可能性更大。因本實(shí)驗(yàn)室無A2細(xì)胞試劑，不能檢測(cè)是否存在抗-A，于是，我們便用人源的B型血漿進(jìn)行正定型，若凝集強(qiáng)度在3+～4+則為AxB；陰性則為B(A)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：人源B型血漿呈現(xiàn)弱凝集（1+w），為了明確血型，將先證者及其母親的血液外送，進(jìn)行基因測(cè)序。測(cè)序發(fā)現(xiàn)患者及母親均是B(A)02/O01，突變位點(diǎn)均一致。在實(shí)際工作中，血清學(xué)方法可以篩選出血型亞型，而DNA技術(shù)可以明確鑒定亞型類型，兩者相互結(jié)合，有利于準(zhǔn)確鑒定疑難血型。

正常A型、B型和AB型等位基因分別位于9號(hào)同源染色體的ABO位點(diǎn)上，分別從父方或母方遺傳得到。B(A)02血型的遺傳機(jī)制是正常的B等位基因發(fā)生關(guān)鍵的堿基突變，即700C＞G的突變，該位點(diǎn)的突變導(dǎo)致234位的脯氨酸變?yōu)楸彼醄6，7]，不僅可以正常編碼產(chǎn)生B轉(zhuǎn)移酶活性，還可產(chǎn)生弱的A轉(zhuǎn)移酶活性[8]。在直系親屬調(diào)查中，先證者父親的血型是O型，母親是B(A)02/O01，丈夫是A型，孩子是AB型?？梢?，先證者的血型由母親遺傳而來，其與A型丈夫所生的孩子為正常的AB型，“正?！笔侵秆鍖W(xué)方面與正常的AB型表現(xiàn)一致，實(shí)質(zhì)上應(yīng)是B(A)02/A，符合遺傳學(xué)定律。

先證者任某預(yù)計(jì)劃二胎，但由于血型稀有，擔(dān)心后期輸血及新生兒溶血等風(fēng)險(xiǎn)問題。對(duì)于輸血問題，可以采用自體儲(chǔ)存式輸血或者輸注O型血。對(duì)于胎兒，發(fā)生新生兒溶血的機(jī)率是多個(gè)因素作用的，首要因素是母嬰血型不合（如:孕A型胎兒），且母親體內(nèi)有針對(duì)胎兒血型抗原高效價(jià)的IgG類抗體，即使以上均滿足，我們也可在規(guī)律產(chǎn)檢發(fā)現(xiàn)問題及時(shí)干預(yù)。雖然是稀有血型，但不足以成為生二胎的阻攔。

至2017年，B(A)血型國內(nèi)已有17個(gè)省、直轄市報(bào)道過相關(guān)文獻(xiàn)[9]，而在貴州省內(nèi)此次為首次報(bào)道。經(jīng)調(diào)查，該家系均是貴州本土土家族，祖輩三代未曾發(fā)生過地域遷移。貴州地處中國西南腹地，是一個(gè)多民族共居的省份。在這樣獨(dú)特的人文地理?xiàng)l件下，現(xiàn)階段我們的工作正致力于對(duì)本地區(qū)內(nèi)長居且占比較高的少數(shù)民族與當(dāng)?shù)貪h族人群分別進(jìn)行血型基因檢測(cè)，望能發(fā)現(xiàn)人類血型上不同的基因靶點(diǎn)。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突