鮮美型香菇品種選育及栽培研究

孫 燕 ，李 浪 ，劉 妮 ，唐金剛 ，王玉珠 ，潘高潮 ，鄒方倫 ，龍漢武*，喬?hào)|生，陽(yáng)旭

（1.貴州科學(xué)院山地資源研究所，貴州貴陽(yáng) 550001；2.貴州科學(xué)院生物研究所，貴州貴陽(yáng) 550009；3.大方縣東生昂立食用菌基地，貴州畢節(jié) 551600；4.織金竹蓀產(chǎn)業(yè)辦，貴州織金 552199）

香菇（Lentinus edodesSing.）屬于中低溫、變溫結(jié)實(shí)性腐生真菌[1]，其特有的香味是香菇區(qū)別其他食用菌的重要特征。作為助推山區(qū)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展、增加農(nóng)民收入的第一大菇種，香菇已被我國(guó)許多地區(qū)定位為貧困農(nóng)戶脫貧致富食用菌發(fā)展大宗品種之一。據(jù)行業(yè)統(tǒng)計(jì)，貴州省2018年香菇年產(chǎn)量已達(dá)42.4萬(wàn)t，發(fā)展規(guī)模遙遙領(lǐng)先于其他菇種。目前，市場(chǎng)上香菇主栽品種眾多，由于遺傳基礎(chǔ)狹窄、引種盲目，優(yōu)良菌株的篩選和定向培育工作做得較少，長(zhǎng)期栽培過(guò)程中不可避免地出現(xiàn)菌株嚴(yán)重退化、優(yōu)良菌株儲(chǔ)備不足的現(xiàn)象。采集野生香菇菌株子實(shí)體，通過(guò)分離菌種、馴化、栽培試驗(yàn)，開(kāi)展香菇新品種選育研究、補(bǔ)充香菇優(yōu)質(zhì)菌株菌種對(duì)香菇產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。

優(yōu)良菌株選育指標(biāo)，文獻(xiàn)報(bào)道常以農(nóng)藝性狀、產(chǎn)量[2-4]為主，也有以溫度[5-7]（耐高溫、中溫）、短周期[8]（早熟型）為選育標(biāo)準(zhǔn)，按味道鮮美（香氣和氨基酸種類(lèi)）選育香菇品種未見(jiàn)報(bào)道。馬桑香菇是馬桑樹(shù)枯枝上生長(zhǎng)的一種野生香菇，早期在黔西北高寒地區(qū)海拔1 200～2 200 m處的灌木林中發(fā)現(xiàn)[9]，后在貴州其他地區(qū)也有報(bào)道。該香菇品種為貴州所特有，無(wú)論從形態(tài)、生態(tài)或風(fēng)味等方面來(lái)看都與普通香菇有不同之處，其香菇香味較普通香菇更加濃郁，測(cè)試其香氣成分（85種）較普通香菇（81種）多；氨基酸含量高達(dá)17種，尤以谷氨酸含量特別高，是其味道鮮美異常的原因所在[10]。此外，該香菇還可用作預(yù)防熱天飯菜變餿，深受農(nóng)村群眾的喜愛(ài)。筆者選取馬桑香菇為育種親本，依據(jù)《食用菌品種選育技術(shù)規(guī)范》[11]，通過(guò)系統(tǒng)選育法獲得適應(yīng)中、高海拔，出菇季節(jié)廣、產(chǎn)量高的香菇新菌株，為香菇優(yōu)良菌株的篩選和定向培育，增加香菇品種多樣化以及種質(zhì)資源優(yōu)良菌株儲(chǔ)備等工作提供重要參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

普安縣青山鎮(zhèn)香菇種植基地，地處云貴高原向黔中過(guò)渡的梯級(jí)狀斜坡地帶，境內(nèi)有地勢(shì)相對(duì)平坦的山地大壩子。主要山脈有西南向東北走向的卡子坡山，最高峰舊城市位于東南部，海拔1 888.8 m，最低點(diǎn)位于下節(jié)河村海馬，海拔1 506.6 m。境內(nèi)河流屬珠江流域南盤(pán)江水系，主要河道有下節(jié)河，總長(zhǎng)3.5 km。有21個(gè)水庫(kù)和水塘，其中幸福水庫(kù)儲(chǔ)量860萬(wàn)m3，居全縣第一。森林覆蓋率為26.5%，屬高海拔緩丘陵地區(qū)，海拔在1 400～1 500 m，氣候溫和濕潤(rùn)，屬亞熱帶季風(fēng)氣候，年平均降雨量1 438.9 mm。

1.2 育種親本

在野生馬桑香菇生長(zhǎng)季節(jié)3—6月，從貴州中部龍里、黔南的平塘，黔西北的畢節(jié)林口、大方馬干山，黔北綏陽(yáng)寬闊水自然保護(hù)區(qū)，海拔高度1000～2200m，采集馬桑樹(shù)上野生香菇標(biāo)本15號(hào)（5個(gè)地點(diǎn)，每點(diǎn)采集3號(hào)）。要求菌株生長(zhǎng)健壯，形態(tài)完整，成熟度達(dá)70%～80%，清潔無(wú)異物，未受其他微生物和昆蟲(chóng)侵染。

1.3 選育標(biāo)準(zhǔn)及方法

首先突出其味道、品相、產(chǎn)量，其次是抗逆性及生長(zhǎng)勢(shì)。選育程序?yàn)椋阂吧R桑香菇種質(zhì)資源收集→純菌種分離→菌種培養(yǎng)→生理性能測(cè)定（拮抗試驗(yàn)淘汰與親本無(wú)差異的培養(yǎng)物）→初篩→復(fù)篩→區(qū)別性鑒定（DNA分子鑒定）→中間試驗(yàn)（均一性、穩(wěn)定性觀察）→示范栽培（均一性、穩(wěn)定性調(diào)查）→優(yōu)良品種。

1.4 實(shí)驗(yàn)室篩選（純菌種分離、菌種培養(yǎng)、生理性能測(cè)定）

對(duì)采集子實(shí)體消毒處理后，組織分離每號(hào)菌株各45管，進(jìn)行純菌種培養(yǎng)。篩選菌絲潔白、生長(zhǎng)整齊、健壯、濃密各15管，進(jìn)行耐低溫、高溫試驗(yàn)，同時(shí)擴(kuò)管備用。

1.5 栽培篩選

1.5.1 小試初篩。接種制作栽培種，發(fā)菌、出菇試驗(yàn)中，觀察菌絲生長(zhǎng)吃料、長(zhǎng)勢(shì)、形態(tài)、發(fā)菌時(shí)間、出菇時(shí)間、出菇整齊度、出菇量、品相情況等，篩選綜合性狀優(yōu)良的菌株3個(gè)。

1.5.2 小試復(fù)篩。將初篩選定的優(yōu)良株系進(jìn)行品比試驗(yàn)，對(duì)品相、產(chǎn)量等綜合性狀進(jìn)行篩選，篩選出性狀穩(wěn)定、優(yōu)良的菌株系1個(gè)。

1.5.3 區(qū)別性鑒定。不同采集地點(diǎn)，同一采集地點(diǎn)之間，進(jìn)行菌絲拮抗試驗(yàn)（淘汰無(wú)差異培養(yǎng)物）。將所采集到5個(gè)地點(diǎn)野生菌株子實(shí)體，送上海生工生物檢測(cè)股份有限公司進(jìn)行DNA分子鑒定。

1.5.4 中間試驗(yàn)（均一性、穩(wěn)定性觀察）。2016—2017年，將復(fù)篩后菌株，在香菇生產(chǎn)基地安排栽培試驗(yàn)，進(jìn)行均一性、穩(wěn)定性觀察。

1.5.5 示范栽培。2018年在貴陽(yáng)烏當(dāng)區(qū)某食用菌種植基地（具有明顯的高原氣候特點(diǎn)，海拔1 242 m，年平均氣溫14.6℃，年降雨量1 179.1～1 271 mm，冬無(wú)嚴(yán)寒，夏無(wú)酷暑，光、熱、水同季，垂直氣候差異明顯）安排栽培示范，觀察均一性、穩(wěn)定性，進(jìn)行測(cè)產(chǎn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物學(xué)特性

2.1.1 形態(tài)特性。菌絲體潔白，濃密，絨毛狀，粗壯。外形完整，子實(shí)體較小，受日照或溫度超過(guò)28℃時(shí)容易變?yōu)楹稚?，香氣濃郁，烹調(diào)滋味極佳。

2.1.2 栽培特性。該菌株試管母種菌絲在5～28℃均能生長(zhǎng)，以20～25℃最適宜，低于5℃停止生長(zhǎng)，高于32℃生長(zhǎng)受到抑制，菌絲耐低溫，不耐高溫，超過(guò)35℃菌絲失活。子實(shí)體分化需要合適的溫度及一定的溫差刺激，最適溫度在15～22℃，形成菌蕾時(shí)，溫度15℃左右為中心，有6～10℃溫差，低于10℃或高于20℃原基難以形成。生產(chǎn)菌包、發(fā)菌期管理（30～50 d）、轉(zhuǎn)色催蕾（25～30 d）、出菇管理、采收；栽培季節(jié)除7、8月外，其余時(shí)間均可，3—6月為盛產(chǎn)期。野生生長(zhǎng)期可達(dá)10個(gè)月之久。

1級(jí)種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基（Potato dextrose agar），簡(jiǎn)稱(chēng) PDA 培養(yǎng)基；2、3級(jí)種培養(yǎng)基配方：馬桑木屑+麩皮+過(guò)磷酸鈣+蔗糖。

馬桑香菇只有采用馬桑椴木或馬桑樹(shù)枝粉碎成木屑栽培，才能長(zhǎng)出馬桑香菇子實(shí)體；采用其他樹(shù)種樹(shù)枝或木屑栽培馬桑香菇，菌絲體雖生長(zhǎng)良好，但不能長(zhǎng)出馬桑香菇子實(shí)體。

2.1.3 拮抗試驗(yàn)及DNA分子鑒定。該馬桑香菇菌株與其他地點(diǎn)馬桑香菇菌株，及其他互不相同2個(gè)地點(diǎn)馬桑香菇菌株，在分離菌絲體，進(jìn)行拮抗試驗(yàn)培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)菌絲體互不相讓?zhuān)纬梢坏烂黠@的白色隔離帶，兩菌落都不能越過(guò)隔離帶繼續(xù)生長(zhǎng)，有明顯的拮抗現(xiàn)象。DNA分子鑒定結(jié)果表明，5個(gè)地區(qū)馬桑香菇Per.Ident相似度99.70%～99.83%，說(shuō)明是同一物種，但親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。

2.1.4 抗逆能力。接種栽培種感染雜菌，栽培仍能正常出菇。抗寒能力強(qiáng)，菌絲4～5℃存放，接種仍能復(fù)活，長(zhǎng)勢(shì)良好。

2.2 適應(yīng)性

不同海拔高度1 506 m（青山）、1 242 m（烏當(dāng)）分別進(jìn)行試驗(yàn)，在通透性較好的大棚種植，該品種耐陰、耐涼，生長(zhǎng)旺盛，幾乎無(wú)病害，品相正常，適應(yīng)性較好。

2.3 穩(wěn)定性、均一性

通過(guò)對(duì)該品種不同海拔高度、不同地點(diǎn)條件下栽培觀察，其所表現(xiàn)的生物學(xué)性狀與一代優(yōu)株個(gè)體一致且穩(wěn)定。

3 結(jié)論

貴州黔北綏陽(yáng)寬闊水自然保護(hù)區(qū)野生馬桑香菇馴化后，菌絲白色，絨毛狀，受日照或溫度超過(guò)28℃時(shí)容易變?yōu)楹稚Ｗ訉?shí)體較小，菌蓋直徑4～10 cm，表面棕色至褐色，光滑無(wú)鱗片（香菇常帶有白色或與菌蓋同色的鱗片），并具濃郁的香菇香味；菌褶較窄，褶緣平直（其他品種褶緣鋸齒狀），與菌柄呈凹生、直生，少數(shù)延生；菌柄側(cè)生或中央生，白色或微黃，表面光滑，有時(shí)下部多絨毛（一般香菇多數(shù)覆絨毛或鱗片）。可分為春、秋兩季種植，除7、8月外，其余時(shí)間該香菇均可生長(zhǎng)。菌絲萌發(fā)，形成原基能力強(qiáng)，香菇產(chǎn)量90 000 kg/hm2，生物學(xué)轉(zhuǎn)化率80%。在生產(chǎn)管理中，加強(qiáng)病蟲(chóng)害防治，有利于提高產(chǎn)量和品質(zhì)。適宜的栽培料：馬桑木屑、麩皮、過(guò)磷酸鈣、蔗糖。含水量65%，通風(fēng)，適宜溫度18～24℃。2016—2018年的中間試驗(yàn)、示范栽培，均表現(xiàn)出了高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗逆性強(qiáng)等優(yōu)良性狀。在不同海拔地區(qū)試驗(yàn)產(chǎn)量穩(wěn)定，沒(méi)有出現(xiàn)突變現(xiàn)象和性狀分化情況。