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    2014—2018年陜西省發(fā)病豬群主要疫病檢測與分析

    2020-12-09 09:13:05仇薪鑫孟姣張振倉
    江蘇農業(yè)科學 2020年19期
    關鍵詞:流行感染陽性率

    仇薪鑫 孟姣 張振倉

    摘要:為掌握近5年陜西省豬群主要疫病感染情況,進一步摸清陜西省規(guī)?;B(yǎng)豬場面臨的主要疫病負擔和流行特點,對2014—2018年來自陜西省西安、寶雞、商洛等10個地區(qū)發(fā)病豬群中的753份組織病料樣品的病毒及細菌檢測結果進行分析。結果顯示,2018年CSFV、PRRSV、PCV2、TGEV、PEDV、RV等病毒病感染情況呈明顯上升趨勢,其中,CSFV、PRRSV、PCV2和TGEV、PEDV、RV陽性檢出率較高,分別為50.00%、30.83%、72.50%和66.67%;PRV-gE、PPV和JEV 3種病毒病自2016年后呈明顯下降趨勢,已達控制水平;PPV、JEV 2種病毒病部分地區(qū)存在散發(fā)流行,陽性率在5%以下。渭南地區(qū)PRV-gE平均陽性率可達40.33%,應當注重PRV-gE的檢測和凈化工作,商洛地區(qū)JEV平均陽性率為24.00%,應重點控制,防止出現(xiàn)大規(guī)模感染和流行。近5年陜西省發(fā)病豬群細菌病以大腸桿菌、鏈球菌、巴氏桿菌感染為主,沙門氏菌和副豬嗜血桿菌陽性率總體上升,需要重點預防和控制。研究結果可為陜西省不同地區(qū)制定合理、有效防控措施和資源配置提供有力依據(jù)。

    關鍵詞:病毒;細菌;陽性率;流行;感染;豬群疫病

    中圖分類號:S858.28?? 文獻標志碼: A

    文章編號:1002-1302(2020)19-0172-05

    收稿日期:2019-11-15

    基金項目:動物疫病流行病學調查與研究項目(編號:2030208)。

    作者簡介:仇薪鑫(1993—),男,陜西富平人,碩士,講師,主要從事動物傳染病的檢測研究。E-mail:ylzyqiuxinxin@163.com。

    疫病的流行是影響我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要因素之一,特別是傳染性強、危害嚴重的病毒性與細菌性疫病一直是最具威脅的防控因素,長期的感染狀態(tài)與流行給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經濟損失。目前,國家對于危害嚴重的部分疫病已采取強制免疫措施,但仍然存在持續(xù)感染和呈現(xiàn)地方流行性特點。做好生豬疫病病原學檢測工作,有助于幫助人們掌握病原感染狀況及流行趨勢,為制定有效的防控措施提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 樣品

    組織病料來自2014—2018年接受送檢的陜西省各地區(qū)發(fā)病豬群樣品,共計763份。

    1.2 病毒毒株

    豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬偽狂犬病病毒(PRV-gE)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)、傳染性胃腸炎病毒(TGEV)、流行性腹瀉病毒(PEDV)、輪狀病毒(RV)、豬細小病毒(PPV)、豬乙型腦炎病毒(JEV)均由西北農林科技大學重大動物疫病防控與傳染病實驗室提供。

    1.3 主要試劑

    病毒DNA、RNA提取試劑盒、反轉錄試劑盒,均購自北京全式金生物技術有限公司;DL 2000 DNA Maker,購自寶生物工程(大連)有限公司;2×Taq Master Mix,購自康維試劑生物科技有限公司。

    1.4 方法

    1.4.1 病毒檢測

    通過聚合酶鏈式反應(PCR)或反轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)進行病毒檢測,病毒DNA、RNA提取及cDNA合成嚴格按照試劑盒說明書進行操作。PCR產物于1%的瓊脂糖凝膠中電泳,凝膠中含有0.5 μg/mL溴化乙錠,觀察結果。

    1.4.2 細菌的分離與鑒定

    無菌采集樣品,無菌環(huán)境中接種血液瓊脂培養(yǎng)基,37 ℃恒溫培養(yǎng)12~24 h,染色鏡檢,疑似大腸桿菌接種于麥康凱培養(yǎng)基,疑似鏈球菌、巴氏桿菌接種于血液瓊脂培養(yǎng)基,疑似沙門氏菌接種于沙門氏菌-志賀氏菌培養(yǎng)基,疑似副豬嗜血桿菌接種于胰蛋白酶大豆瓊脂(tryptic soy agar,TSA)培養(yǎng)基,均培養(yǎng)12~18 h,染色鏡檢,初步確定菌落,分別挑取單菌落,純化培養(yǎng),進行生化鑒定,確定細菌種屬,保存細菌于4 ℃。

    1.5 引物設計

    引物由筆者所在實驗室設計或來自文獻查閱,已證明具有較高特異性和敏感性,引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成,詳見表1。

    2 結果與分析

    2.1 陜西省發(fā)病豬群病毒檢測總體結果

    2014—2018年期間,對陜西省發(fā)病豬群的763份組織病料進行病毒檢測。由表2、圖1可知,CSFV核酸陽性率在2017年最低,為18.67%;2018年最高,達50.00%,總體呈上升趨勢。PRRSV核酸陽性率在2015年最高,為32.95%;2016—2018年從13.38%上升至30.83%。PRV-gE核酸陽性率在2016年最高,為26.02%,之后逐年下降,到2018年最低,為13.33%。PCV2核酸陽性率在2018年陽性率達72.50%,較2017年明顯升高。TGEV、PEDV、RV 3種病毒核酸陽性率在2018年最高,為66.67%;2017年最低,為13.33%。PPV核酸陽性率在2015年為最高,為10.23%;2016年下降至2.23%,2018年最低,為1.67%。JEV核酸陽性率從2014年的5.69%上升至2015年的14.77%,2016年下降至2.23%,2017年未檢測到陽性,2018年為4.17%。結果表明,2018年CSFV、PRRSV、PCV2、TGEV、PEDV、RV等病毒病核酸陽性率較2017年均有明顯升高,特別是PCV2和TGEV、PEDV、RV等病毒病,應引起重視,加強防控工作;而PRV-gE、PPV和JEV 3種病毒病自2016年以后發(fā)病較輕或呈明顯下降趨勢,已達到控制水平,未來應做好監(jiān)測工作,使其維持較低的發(fā)病水平。

    2.2 陜西省各地區(qū)發(fā)病豬群病毒檢測結果

    對2014—2018年期間來自陜西省不同地區(qū)發(fā)病豬群送檢病料組織樣品進行病毒檢測,其中西安地區(qū)117份、銅川地區(qū)81份、寶雞地區(qū)95份、咸陽地區(qū)74份、渭南地區(qū)54份、延安地區(qū)52份、漢中地區(qū)136份、榆林地區(qū)44份、安康地區(qū)82份、商洛地區(qū)28份。由表3和圖2可知,CSFV、PRRSV、PCV2 3種腹瀉病毒病在西安、銅川、咸陽、渭南、漢中、榆林、安康、商洛等地均為高陽性率,平均在20%~40%,應當繼續(xù)加大檢測力度,優(yōu)化防控措施,進一步降低感染水平,降低發(fā)病率;PRV-gE在西安、銅川2地陽性率較低,平均在5%以下,其他地區(qū)均為高陽性率,最高為渭南地區(qū),平均可達40.33%,渭南地區(qū)應當注重PRV gE的檢測和凈化,逐步降低其感染情況;PPV在銅川、寶雞、延安等地未檢測到陽性,其他地區(qū)均呈較低陽性率,5年期間平均維持在10.80%以下;JEV在寶雞、漢中未檢測到陽性,商洛地區(qū)最高,平均陽性率為25.33%,其他地區(qū)呈較低發(fā)病水平,平均陽性率均在9.33%以下。對于PPV、JEV 2種病毒病,在未檢測到陽性的地區(qū)應做好監(jiān)測和預防工作,其他地區(qū)應繼續(xù)加強控制措施,進一步降低發(fā)病風險,保持其較低的感染狀態(tài),以防出現(xiàn)大規(guī)模感染和流行。

    2.3 陜西省發(fā)病豬群細菌分離鑒定結果

    經對送檢病料組織進行細菌分離鑒定,由表4和圖3可知,2014—2018年期間,陜西省發(fā)病豬群中細菌感染以大腸桿菌、鏈球菌、巴氏桿菌為主,其中大腸桿菌檢出率連續(xù)2年達50.00%,鏈球菌檢出率最高為33.33%,巴氏桿菌檢出率連續(xù)3年在25.00%~33.33%之間,2018年檢出率下降為1.41%。沙門氏菌和副豬嗜血桿菌也呈地方流行趨勢,特別是2018年沙門氏菌檢出率明顯升高,達21.12%,說明沙門氏菌感染情況嚴重,未來應更加注重其檢測和控制力度,防止大規(guī)模感染。通過以上5種細菌檢測結果,說明近年來陜西地區(qū)細菌總體感染情況呈明顯上升趨勢,并呈現(xiàn)地方流行性,難以根除,在養(yǎng)殖過程中,需要注重消毒工作,進一步加強管理、凈化養(yǎng)殖環(huán)境、合理用藥,以防止豬群產生更強的耐藥性,發(fā)生嚴重感染和疫情,影響豬群生產及衛(wèi)生安全。

    3 討論

    本試驗通過對2014—2018年期間送檢的來自陜西省10個地區(qū)的發(fā)病豬群病料組織樣品進行病毒和細菌檢測,分析其主要疫病5年期間在陜西省各地的發(fā)病和感染情況。病毒病中PCV2和PRRSV平均陽性檢出率最高,雖然陜西省在這2種疫病方面采取了較好的免疫措施,但由于2種病毒具有對外界環(huán)境有較強的抵抗力和易產生變異性的特點,因此,單純的疫苗免疫措施并不能很好地控制其感染和發(fā)病,應當注重及時評估環(huán)境的凈化和消毒效果,做好多層面防控工作[2-3]。CSFV、PRV-gE及3種腹瀉病毒病在陜西各地區(qū)均呈地方流行性,普遍存在于各養(yǎng)殖場,特別是PRV-gE一旦感染母豬群,會表現(xiàn)為循環(huán)感染,呈長期攜帶狀態(tài),對豬群的健康造成很大威脅,并且很難根除,只有通過免疫和檢測手段不斷淘汰母豬,才能逐步實現(xiàn)豬群中PRV-gE的清除。PPV、JEV 2種病毒病在陜西的部分地區(qū)存在感染和流行,2014—2016年受檢樣品陽性率呈同步升高趨勢,2016年后,基本達到了控制甚至消滅的狀態(tài),基本不影響正常養(yǎng)殖。細菌病中,本試驗比較了2014年以來,5種細菌的陽性檢出率,主要表現(xiàn)為大腸桿菌、鏈球菌和巴氏桿菌感染率較高;沙門氏菌和副豬嗜血桿菌感染近5年也呈總體上升趨勢,已嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康生產。

    由于病毒感染的持續(xù)存在,引起豬機體免疫功能受損,抵抗力下降,導致細菌病普遍存在,加上外界環(huán)境因素的應激,容易出現(xiàn)呼吸道癥狀和腹瀉癥狀。近幾年,由于養(yǎng)殖企業(yè)防疫意識的提高,政府越來越重視免疫監(jiān)測工作,基本預防措施能夠保證,但由于環(huán)境衛(wèi)生質量的降低,生物安全措施很難實現(xiàn)落地,導致病毒病和細菌病長期存在流行[5-6]。因此,對于陜西省當前面臨的疫病負擔,在做好當前防控工作的基礎上,應該更加注重生物安全、環(huán)境消毒和凈化工作,通過建立合理健全的生物安全體系,完善并細化消毒制度,制定高效的免疫程序,設計合理的環(huán)境凈化方案,實現(xiàn)疫病的有效控制,降低其感染和發(fā)病水平,減輕養(yǎng)殖負擔,促進高效健康養(yǎng)殖的發(fā)展。

    參考文獻:

    [1]楊漢春,蘇 佳,周 磊. 2015年豬病流行情況與2016年流行趨勢及防控對策[J]. 豬業(yè)科學,2016,33(2):39-41.

    [2]王釗哲,舒相華,楊亮宇,等. 云南省部分地區(qū)72家規(guī)?;i場豬偽狂犬病凈化效果分析[J]. 中國獸醫(yī)學報,2017,37(4):597-600.

    [3]鄭 浩,張建武,袁世山. 豬源乙型腦炎病毒的分離鑒定及其E基因分析[J]. 中國獸醫(yī)科學,2009,39(6):476-482.

    [4]王娟萍,姚敬明,高英杰,等. 多重PCR/RT-PCR技術檢測PRRSV、PPV、PRV和PCV-2[J]. 中國獸醫(yī)學報,2009,29(3):258-262.

    [5]董 波,張寄香,戴愛玲,等. 閩西地區(qū)仔豬病毒性腹瀉流行情況調查[J]. 江蘇農業(yè)科學,2018,46(12):144-146.

    [6]馬振乾,楊旭兵,劉曉東,等. 2017年上半年我國4種常見豬病流行特點分析[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī),2018(18):97-99.

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