醫(yī)院制劑用麻油的純度含量測(cè)定方法

李雯霞，王秀真，趙紅霞，張鴻超

(河南省洛陽正骨醫(yī)院(河南省骨科醫(yī)院)，河南 洛陽)

0 引言

現(xiàn)在醫(yī)院制劑的傳統(tǒng)工藝中仍有相當(dāng)部分使用芝麻油，其用途為潤(rùn)滑劑及賦形劑，內(nèi)服可潤(rùn)腸、潤(rùn)肺；外用作為軟膏及硬膏基質(zhì)。芝麻油中主要成分為多酚、黃酮、維生素、不飽和脂肪酸等生物活性成分以及芝麻素、芝麻林素、芝麻酚及芝麻素酚等木脂素類化合物[1-2]。其中芝麻酚可通過減弱氧化應(yīng)激反應(yīng)，抑制細(xì)胞凋亡和炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)減輕腦缺血再灌注損傷，近年來其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的生物活性備受關(guān)注[3]。芝麻酚有特征的“波多因試驗(yàn)”，即在濃鹽酸的催化下蔗糖縮合物羥甲基糠醛與芝麻油中芝麻酚發(fā)生特異性反應(yīng)，生成在520nm 處有最大吸收峰的紅色化合物[4]。本研究摸索出一種用鹽酸-蔗糖顯色法結(jié)合UV 快速測(cè)定麻油純度含量的方法，來評(píng)價(jià)麻油的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV2450 型紫外分光光度計(jì)(日本島津)，UVProbe2.0 軟件；分析天平XS205(Dual Range)。

1.2 藥品與試劑

自制純麻油對(duì)照液(炒制榨油)、東都糧油店7 批樣品(樣1～樣7)，超市購李學(xué)堂香油3 批(樣8～樣10)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對(duì)照品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取純麻油2.500g 至50mL 量瓶，用石油醚(60～90℃)定容至刻度。得標(biāo)準(zhǔn)純麻油基礎(chǔ)液放冰箱備用。

2.1.2 供試品溶液的制備

各取樣品0.5g 于10mL 量瓶中，用石油醚(60～90℃)溶解并定容至刻度。

2.1.3 蔗糖鹽酸液的制備

試驗(yàn)所需試劑主要有：四氯化碳，氮?dú)?，無水乙醇，氯化銨，基準(zhǔn)碳酸鈣粉末，3-甲氧基丙胺 （用作吸收液），氫氧化鈉，鹽酸，氯化鈣，1,2,4-三甲苯，丙二醇甲醚，2,5-二苯基噁唑（簡(jiǎn)稱 PPO），1,4-雙(2-甲基苯乙烯基)苯（簡(jiǎn)稱 bis-MSB），含 14C的正十六烷標(biāo)準(zhǔn)溶液等。

取1.0g蔗糖溶解于100mL濃鹽酸中，攪拌溶解(臨用時(shí)新配)。

2.2 測(cè)定方法

分別取對(duì)照品與供試品溶液1mL 于10mL 比色管中，加石油醚至3mL。加蔗糖鹽酸液3mL、緩緩搖動(dòng)15 分鐘，于各管加蒸餾水2mL，搖勻，水層用1cm比色杯，在526nm處測(cè)吸光度，計(jì)算含量。

2.3 方法學(xué)驗(yàn)證

2.3.1 最大吸收波長(zhǎng)的確定

取對(duì)照品溶液0.6mL 于10mL 比色管中，按照“2.2”項(xiàng)下方法操作，以石油醚為空白，按照“2.2”項(xiàng)下方法操作，用島津UV2450 于190nm～900nm 掃描光譜圖，如圖表所示：

圖1 空白對(duì)照全波長(zhǎng)的掃描圖譜

圖2 純香油對(duì)照液全波長(zhǎng)掃描圖

表1 純香油對(duì)照液峰值檢測(cè)表

由圖表可看出純麻油基礎(chǔ)液在526.5nm 處有最大吸收，且此峰型略圓鈍，結(jié)合文獻(xiàn)采用526nm 為最大吸收波長(zhǎng)。

2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取純香油基礎(chǔ)液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2mL(相當(dāng)于純香油0,0.01,0.02,0.03,0.04,0.05,0.06g)分別置于10mL 比色管中，按照“2.2”項(xiàng)下方法操作，吸光度分別為：0.0045,01275,0.248 9,0.3439,0.4698,0.6247,0.7161，以麻油含量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3 所示。

圖3 純香油標(biāo)準(zhǔn)曲線

如圖3 所示，標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=11.965x+0.0033，R2=0.9972.其r 為0.9986，故我們可以用標(biāo)準(zhǔn)曲線法做樣品的含量。

2.3.3 精密度實(shí)驗(yàn)

精密吸取6 份對(duì)照溶液各0.6mL，按照“2.2”項(xiàng)下方法操作，測(cè)定各溶液的吸光度并計(jì)算RSD。其吸收度值分別為：0.335,0.321,0.330,0.326,0.321,0.317，其RSD% 為2.05%，證明該方法精密度合格。

2.3.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取1mL 樣品溶液按照“2.2”項(xiàng)下方法操作，重復(fù)測(cè)定6次，其吸收度值分別為：0.610,0.611,0.611,0.613,0.610,0.611，其RSD%為0.18%，證明該方法重復(fù)性合格。

2.3.5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取1mL 樣品溶液按照“2.2”項(xiàng)下方法操作，分別于0、15、30、60、90、120min 內(nèi)測(cè)定吸收度值，分別為：0.613,0.611,0.611,0.610,0.592,0.588，其RSD% 為1.84%，證明其在2h 內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.6 回收率實(shí)驗(yàn)

稱取6 份已知含量的供試品0.25g，加入純麻油標(biāo)準(zhǔn)液0.25g，于10mL 容量瓶中，用石油醚(60～90℃) 溶解并定容至刻度。取溶液1mL 于10mL 比色管中，按照“2.2”項(xiàng)下方法操作，計(jì)算含量。如表2 所示。計(jì)算得平均加樣回收率為99.78%，RSD 為2.07%，加樣回收率范圍96.44%～101.84%，表明該方法具有良好的加樣回收率。

2.3.7 樣品測(cè)定結(jié)果

用標(biāo)曲法以吸光度值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線得出樣品油含量，以下式進(jìn)行計(jì)算。如表所示。

X=(10*A/B)×100

式中：X 一樣品中純香油的百分含量(%)；A 一從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得的香油的量(g)；B 一比色測(cè)定所用樣品的量(g)。

結(jié)果顯示超市售3 批李學(xué)堂香油含量超過95%，但從東都糧油店購進(jìn)的7 批次樣品含量均不達(dá)標(biāo)，結(jié)合7 批樣品的外觀、氣味、色澤、是否有沉淀物等項(xiàng)目可以判斷7 批樣品均非純麻油，應(yīng)摻雜了其它植物油甚至動(dòng)物油，該7 批樣品已被退回，更換合格產(chǎn)品。

3 討論

目前常用的麻油摻假檢測(cè)方法主要有：顯色法、色譜法、核磁共振、色質(zhì)聯(lián)用和近紅外光譜及拉曼光譜結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法[5]等。顯色法就是拿標(biāo)準(zhǔn)色與芝麻油中特征物質(zhì)加顯色劑發(fā)生作用后產(chǎn)生的顏色相對(duì)照[5]。威勒邁志法、波多因法和硫酸顯色法這三種方法主要是用顯色法中的目視比色法，它具操作簡(jiǎn)單，不需設(shè)備，快速，現(xiàn)場(chǎng)操作，可快速定性和定量等這些優(yōu)點(diǎn)，本試驗(yàn)就基于波多因原理[5]。

芝麻酚的含量在純香油中也是很微量的，但是也是商家不容易進(jìn)行造假的一部分，故而用這個(gè)指標(biāo)來判斷麻油的質(zhì)量是可行的。本次試驗(yàn)是因?yàn)樵诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)商家的麻油質(zhì)量有好有壞，直接影響了藥品質(zhì)量，而檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)外觀、氣味、色澤、是否有沉淀物等都影響了含量的高低，而用數(shù)據(jù)說話更增強(qiáng)了可信度，有一個(gè)衡量的標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于醫(yī)院制劑的質(zhì)量來說無疑是有益的。

表2 加樣回收試驗(yàn)表

表3 樣品含量表