淺談高效液相色譜儀日常維護(hù)經(jīng)驗(yàn)

□ 柴梅梅 榆林市食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心

1 高效液相色譜儀

高效液相色譜，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，各成分在色譜柱內(nèi)被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。高效液相色譜儀是應(yīng)用高效液相色譜原理分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定和分子量大的有機(jī)化合物的分析儀器。它由儲(chǔ)液容器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器與記錄儀等組成。

2 高效液相色譜儀各單元日常維護(hù)

2.1 儲(chǔ)液容器

儲(chǔ)液器是儲(chǔ)存流動(dòng)相的容器。儲(chǔ)液器最好選用儀器公司配制的儲(chǔ)液瓶，不要亂用；超過(guò)有效期的流動(dòng)相和用久了的試劑瓶應(yīng)定期廢棄，防止瓶中生長(zhǎng)微生物和組分改變；每個(gè)儲(chǔ)液器要儲(chǔ)存固定的溶劑；要保證儲(chǔ)液器的清潔，定期清洗內(nèi)壁，經(jīng)常更換附件。

2.2 泵

提高泵的使用壽命主要有以下措施：時(shí)刻關(guān)注泵壓大小，根據(jù)泵壓變化及時(shí)發(fā)現(xiàn)漏液和堵塞的情況；使用緩沖液做流動(dòng)相一定要用0.45 μm 濾膜過(guò)濾；每次使用完要把泵中的緩沖液沖洗干凈，防止鹽分沉積，最好浸在有機(jī)溶劑中；使用過(guò)濾濾芯，并且定期清洗更換，防止泵阻塞。

2.3 檢測(cè)器

保證檢測(cè)器的清潔，每次使用后沖洗；做好排氣工作，整個(gè)流路中只要有一個(gè)氣泡就會(huì)在檢測(cè)器上得到強(qiáng)烈的信號(hào)反映，所有流動(dòng)相以及管路一定要排氣，以防氣泡殘留在檢測(cè)器內(nèi)部；不要頻繁開(kāi)關(guān)檢測(cè)器，頻繁的開(kāi)關(guān)會(huì)縮短燈的使用壽命，檢測(cè)結(jié)束長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)一定記得關(guān)燈。

2.4 自動(dòng)進(jìn)樣器及進(jìn)樣閥的維護(hù)注意事項(xiàng)

樣品在裝瓶前必須用0.45 μm 或0.22 μm 濾膜過(guò)濾，以減少微粒對(duì)進(jìn)樣閥的磨損或阻塞；防止緩沖鹽和樣品殘留在進(jìn)樣閥中，每次檢測(cè)結(jié)束后要記得沖洗進(jìn)樣閥，通?？捎盟疀_洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。

2.5 色譜柱

日常檢測(cè)工作中，對(duì)色譜柱的正確使用和維護(hù)非常重要。如果使用不當(dāng)就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。因此，要注意以下5 點(diǎn)。

①流速的調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)流速要緩慢，柱壓的急劇變化會(huì)影響柱內(nèi)的填充情況；②按照箭頭方向安裝色譜柱，不要反沖色譜柱，反沖會(huì)迅速降低柱效；③安裝預(yù)柱和保護(hù)柱，并且定期更換；④選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），使用前一定要仔細(xì)看說(shuō)明書(shū)，在合適的pH 范圍內(nèi)使用；⑤長(zhǎng)時(shí)間不用或存放色譜柱時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑（甲醇或乙腈），并擰上堵頭。

3 液相色譜儀短期關(guān)機(jī)和長(zhǎng)期關(guān)機(jī)的維護(hù)工作

3.1 液相色譜儀短期不使用時(shí)維護(hù)（兩三天如周末不用）

短期不使用液相色譜儀時(shí)，首先用超純水沖洗系統(tǒng)，尤其是在使用鹽類緩沖液以后，以防鹽結(jié)晶等有害沉淀留在管路中損壞儀器；然后用甲醇/水（甲醇比例由低到高逐漸增加）沖洗，再用純甲醇沖洗30 min 以上；最后關(guān)閉泵、檢測(cè)器、進(jìn)樣器的電源[1]。

3.2 液相色譜儀長(zhǎng)期不使用時(shí)維護(hù)（一周以上長(zhǎng)期不用）

長(zhǎng)時(shí)間不使用液相色譜儀時(shí)，一定要做在好徹底的維護(hù)以后關(guān)機(jī)。①清洗系統(tǒng)。如果流動(dòng)相是有機(jī)相，只包括：甲醇、乙腈等，只需用100%甲醇清洗40 ～60 min 即可關(guān)機(jī)；如果流動(dòng)相是緩沖鹽類，如：弱酸、弱堿（強(qiáng)酸堿絕對(duì)禁止進(jìn)入儀器）、乙酸、乙酸銨、三氟乙酸、磷酸、氨水、三乙胺與磷酸鹽等。清洗時(shí)，需要將緩沖鹽的管路放入水相，然后用95%水+5%甲醇清洗系統(tǒng)80 ～100 min，再用100%甲醇清洗40 min。②清洗完畢后，在工作站中關(guān)閉泵。③依次關(guān)閉檢測(cè)器、泵、柱溫箱的電源，關(guān)閉穩(wěn)壓電源，關(guān)閉工作站及電腦。④蓋好防塵罩。

4 小結(jié)

操作液相色譜儀的工作人員，應(yīng)在熟練掌握儀器操作的基礎(chǔ)上，了解各個(gè)部件的性能，做好日常維護(hù)保養(yǎng)工作，從而保證儀器的良好狀態(tài)，確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確可靠性。