枳飲對(duì)酒精性肝損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究

莫桂蕓 吳 英 馬端鑫 葉 勇*

（云南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，云南 昆明650000）

飲酒不當(dāng)及飲酒過量均可導(dǎo)致全身多系統(tǒng)的損傷，尤其對(duì)消化道損傷、肝臟損傷更為顯著。但在日常生活中，糾正酒精性所引起的肝臟損傷則是一個(gè)長期性、世界性的難題[1-2]。云南省名老中醫(yī)趙淳教授、祁濤教授經(jīng)多年臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，應(yīng)用枳飲方取得很好的臨床療效。葉勇教授在兩位教授的經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)代營養(yǎng)治療學(xué)及現(xiàn)代中藥、食品工藝技術(shù)調(diào)配而成枳飲顆粒，更方便的應(yīng)用于臨床。本文對(duì)枳飲對(duì)酒精性肝損傷保護(hù)作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 試劑及試藥

乙醇：食品級(jí)

聯(lián)苯雙酯：武漢東康源科技有限公司生產(chǎn)。

氯化鈉注射液：山東省齊都藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：1D09090302。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

臺(tái)式低速自動(dòng)平衡離心機(jī)；KHB 酶標(biāo)儀ST-360

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

小鼠120 只，雄，體重20+2g，由成都市達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，質(zhì)量合格證：SCXK（川）2008-24，檢疫后備用，用SPF級(jí)飼養(yǎng)房飼養(yǎng)1 周后使用。

2 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)分兩部分同時(shí)進(jìn)行，隨機(jī)選取60 只大鼠，建立急性酒精肝損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃吐跃凭愿螕p傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/p>

2.1 急性酒精肝損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?/h3>

將動(dòng)物隨機(jī)分為6 組，設(shè)置每組10 只，分別為正常組、模型組，聯(lián)苯雙酯組（陽性組），枳飲高劑量組、中劑量組、低劑量組。灌胃給藥，正常組和模型組予以氯化鈉注射液，陽性組1.5mg/kg，枳飲高劑量是0.6mg/kg，中劑量組是0.3mg/kg，低劑量組是0.15mg/kg。連續(xù)給藥15 天，在最后給藥1 小時(shí)，除正常組外，其他各組灌胃濃度為50%乙醇12ml/kg，并且禁食16h，處死并采集實(shí)驗(yàn)鼠的肝組織及血液。

2.2 慢性酒精性肝損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕?/h3>

將動(dòng)物隨機(jī)分為6 組，設(shè)置每組10 只，分別為正常組、模型組以及聯(lián)苯雙酯組（陽性組），枳飲高、中、低劑量組。正常對(duì)照組予以氯化鈉注射液，其他陽性組15mg/kg，枳飲高劑量0.42mg/kg，中劑量組0.21mg/kg，低劑量組0.11mg/kg，給藥后每天上午定時(shí)對(duì)給藥組予同等劑量50%乙醇6ml/kg，正常對(duì)照組同樣的灌胃相同劑量組供試樣品，連續(xù)給藥8 周，在最后給藥1小時(shí)后，將模型組大鼠處死，并取其血液以及其相應(yīng)的肝組織[3-4]。

2.3 指標(biāo)測量

2.3.1 血清的制備

將上述血液樣品經(jīng)低速自動(dòng)平衡離心機(jī)離心后取血清，測定其ALT、AST、TG 含量。

2.3.2 肝臟組織學(xué)觀察

將實(shí)驗(yàn)鼠處死后立即取其肝臟，泡入新鮮配制4℃的預(yù)冷標(biāo)準(zhǔn)10%標(biāo)準(zhǔn)福爾馬林溶液中。對(duì)實(shí)驗(yàn)肝組織予以相應(yīng)石蠟切片，并將其脫蠟至水，進(jìn)行HE 染色，其中實(shí)驗(yàn)步驟包括分化、脫蠟、染色、脫水、促藍(lán)、透明、侵水等實(shí)驗(yàn)相關(guān)過程，待染色處理完畢后，用高倍顯微鏡完成實(shí)驗(yàn)觀察[3]。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

數(shù)據(jù)采取標(biāo)準(zhǔn)均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s），分析采用spss13.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相關(guān)分析。P<0.05 表示其實(shí)驗(yàn)結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，p<0.01 表示其實(shí)驗(yàn)結(jié)果有顯著差異。兩組間比較均采用t 檢驗(yàn)；多組間用方差分析，多組間多兩兩進(jìn)行比較，若方差齊采用LSD 檢驗(yàn)；若方差不齊，采用Tamhane’s T2法。

3.1 急性酒精肝損傷結(jié)果分析（表1）

與模型組比較：*p<0.05, **p<0.01；與給藥前自身比較：#p<0.05,##p<0.01（n=10）

3.2 慢性酒精性肝損傷結(jié)果分析（表2）

與模型組比較：*p<0.05, **p<0.01; 與給藥前自身比較：#p<0.05,##p<0.01（n=10）

表1 枳 飲高、中、低劑量組中對(duì)急性肝損傷中ALT、AST、TG 的影響

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表2 枳 飲高、中、低劑量組中對(duì)慢性肝損傷中ALT、AST、TG 的影響

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