影響氨基酸分析儀分析系統(tǒng)的研究

馬曉蕾 徐麗麗

摘 要：隨著市場經(jīng)濟的發(fā)展，對氨基酸分析儀進行檢定具有重要意義。氨基酸分析儀分析系是決定檢定結(jié)果的關(guān)鍵因素，本文就分離柱、緩沖溶液、茚三酮溶液等影響氨基酸分析儀分析系統(tǒng)的決定性因素進行了研究。

關(guān)鍵詞：氨基酸分析儀;分析系統(tǒng)

氨基酸是食品中重要的營養(yǎng)物質(zhì)，隨著人民生活水平的提高，人們越來越關(guān)注食品的營養(yǎng)。氨基酸作為添加劑、調(diào)味劑、飼料添加劑、醫(yī)藥等在食品工業(yè)、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)及人類健康、醫(yī)療保健等諸多方面有著廣泛的應(yīng)用。對氨基酸的分析，因其方法特點、分析過程復(fù)雜，不同實驗室出具的數(shù)據(jù)可比性差，分析結(jié)果的有效性問題日顯突出，由于氨基酸分析儀在科研及日常測試中大量使用，為保證測量結(jié)果準確可靠，對儀器進行計量檢定勢在必行。為此，中國計量科學研究院建立了《JJG 1064-2011氨基酸分析儀檢定規(guī)程》，開展了氨基酸分析儀的計量檢定。

氨基酸分析儀的主要檢定項目包括泵流量設(shè)定誤差，流量穩(wěn)定性，基線噪聲的檢定和分析系統(tǒng)的檢定，即對氨基酸分析儀檢測限、分離度、定性、定量重復(fù)性和儀器線性誤差的評價。

1氨基酸分析儀工作原理

所有的氨基酸在低PH值的條件下都帶有正電荷，均可被吸附在陽離子樹脂上，但吸附的程度不同（堿性氨基酸結(jié)合力最強、其次為芳香族氨基酸、中性氨基酸、酸性氨基酸結(jié)合力最弱）。在進行分析時，按照氨基酸分析儀設(shè)定的洗脫程序，用不同離子強度、PH值的緩沖液依次將氨基酸按不同的吸附力洗脫下來（先酸性氨基酸再中性氨基酸最后堿性氨基酸），然后與茚三酮反應(yīng)液在加熱的條件下反應(yīng)，生成可在570nm、440nm檢測到的藍紫色物質(zhì)（仲氨生成淺黃色物質(zhì)440nm檢測），外標法定量。

2影響氨基酸分析系統(tǒng)的主要因素

對氨基酸分析儀檢定時，在儀器規(guī)定的標準分析條件下，注入氨基酸標準混合溶液，記錄譜圖，測量蘇氨酸和絲氨酸 、甘氨酸和丙氨酸、亮氨酸和異亮氨酸的平均峰高及兩峰交點到基線的距離，計算分離度。由組氨酸的濃度、進樣量、峰高和儀器噪聲計算檢出限。對分析系統(tǒng)性能的影響，直接關(guān)系到檢定的結(jié)果。檢定時準確評價各種影響因子，成為氨基酸分析儀檢定工作的關(guān)鍵。影響分析系統(tǒng)檢定結(jié)果的主要因素有：

2.1色譜柱的填充效果：（分離柱-影響分離度）

氨基酸分析儀的中心部件是離子交換柱（氨基酸分析儀交換柱為磺酸型陽離子交換樹脂分離柱）。離子交換柱、樹脂的再生處理、離子交換柱的裝填是影響分離度的關(guān)鍵因素。所以儀器分離柱除首次使用外，使用一段時間后需要實驗人員自己退出樹脂再生處理，恢復(fù)其分離能力。

2.2緩沖溶液的配制和操作程序的設(shè)置：（緩沖溶液-影響分離度和基線;操作程序的設(shè)置-影響分離度）

緩沖溶液除首次使用儀器時所攜帶的緩沖溶液，一般情況下需要實驗人員配制，也是影響分離的重要因素。配制茚三酮溶液的試劑（如氯化鈉、氫氧化鈉、檸檬酸）決定著茚三酮溶液的Ph值，對分離起決定性作用，茚三酮與氨基酸顯色的最佳pH值為5。分離酸性和中性氨基酸的洗脫液pH值較低，為了把它們的pH值調(diào)節(jié)到5，必須采用pH值高于5的緩沖溶液與洗脫液相平衡。通常氨基酸分析儀采用pH值5.5的緩沖溶液（或者5.2）。而配制茚三酮溶液所加入的液體試劑（如苯甲醇、硫二甘醇）對分離起輔助作用。

操作程序是對緩沖溶液轉(zhuǎn)換時間的設(shè)置，主要影響分離度。時間較長或較短都達不到分離的效果。

2.3茚三酮溶液的試劑與配制：（茚三酮溶液-影響基線噪聲和面積重復(fù)性）

茚三酮溶液在購買氨基酸分析儀時都會隨機配送，當首次攜帶的茚三酮溶液用完時，一般情況下需要實驗人員自行配制，由于人員自身操作能力的差異，所配制的溶液也不盡相同。所以茚三酮溶液是影響面積重復(fù)性的重要因素。

3定期對儀器進行維護和計量檢定，保證分析數(shù)據(jù)的準確可靠

為保證儀器的正常使用和計量檢定順利通過，應(yīng)加強儀器操作人員的責任心，嚴格按照儀器操作規(guī)程進行，決不簡化操作步驟;做好儀器的日常維護保養(yǎng)工作和技術(shù)資料管理;定期對儀器進行檢驗校準和計量檢定，對影響氨基酸分析分析系統(tǒng)精確度、靈敏度、分辨率等技術(shù)指標的因素進行科學評價，以保證使用儀器的完好性與準確性。

參考文獻：

[1]《氨基酸分析儀》檢定規(guī)程介紹馬康，中國計量， 2012年第1期 119-120，

[2] 曹讓《氨基酸分析儀管理使用之經(jīng)驗點滴 》 ，現(xiàn)代儀器2007年第3期 57-58，

[3]宋治軍，紀重光等《現(xiàn)代分析儀器與測試方法》，西北大學出版社 ，1994