三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子E1與P300/CBP相關(guān)因子在食管鱗癌組織中的表達(dá)及臨床意義*

梁宗英，孫光蕊，趙寶山，鄭競雄，劉世全，辛國華

承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院胸外科(承德 067000)

食管癌是我國常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和生存率低[1]。食管癌以手術(shù)結(jié)合放化療的綜合治療為主，預(yù)后差[2]。三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子E1(ATP binding cassette gene E1，ABCE1)和P300/CBP相關(guān)因子(P300/CBP associatied factor，PCAF)與人體多種腫瘤發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。研究[3-6]表明腫瘤組織中高表達(dá)的ABCE1與非小細(xì)胞、膀胱癌及多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展均關(guān)系密切。PCAF在多數(shù)腫瘤組織中低表達(dá)甚至不表達(dá)，也參與了腫瘤細(xì)胞的凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移和血管的生成[7]。ABCE1和PCAF在食管癌的發(fā)生、發(fā)展過程中是否存在協(xié)同作用鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。本研究通過檢測(cè)ABCE1和PCAF在食管鱗癌組織中的表達(dá)及其協(xié)同作用，探究二者在食管癌發(fā)生與發(fā)展中的作用。

資料與方法

1 一般資料 選取承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院60例食管鱗癌患者為研究對(duì)象。其中，男性51例，女性9例；≥60歲43例，<60歲17例；國際抗癌聯(lián)盟(UICC)標(biāo)準(zhǔn)TNM分期中，Ⅰ期14例，Ⅱ期39例，Ⅲ期7例；細(xì)胞分化程度中，低分化11例，中分化32例，高分化17例；有淋巴轉(zhuǎn)移14例，無淋巴轉(zhuǎn)移46例。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者的臨床資料完整；②均為首發(fā)病例；③無放化療及免疫治療史。

2 研究方法 采用免疫組化S-P法檢測(cè)食管鱗癌組織及癌旁正常組織(標(biāo)本殘端距癌組織8 cm的正常鱗狀上皮組織)中ABCE1和PCAF蛋白的表達(dá)，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行。以試劑盒提供的已知ABCE1和PCAF陽性切片作為陽性對(duì)照，以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。 ABCE1抗體購于上海冠導(dǎo)生物工程有限公司(批號(hào)：GD-A075724)；PCAF單克隆抗體購自艾美捷生物科技有限公司(批號(hào)：E29000-1)；S-P試劑盒購自北京杰輝博高生物技術(shù)有限公司(批號(hào)：YAD987412s)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，ABCE1和PCAF陽性表達(dá)等計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 ABCE1和PCAF在食管鱗癌組織和癌旁組織中的表達(dá) 見表1(圖1)。食管鱗癌組織中ABCE1表達(dá)陽性率高于癌旁正常組織，PCAF陰性率也高于癌旁正常組織，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 ABCE1和PCAF在食管癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)[例(%)]

A：ABCE1在食管鱗癌組織中高表達(dá)；B：ABCE1在癌旁正常組織中低表達(dá)；C：PCAF在食管鱗癌組織中低表達(dá)；D：PCAF在癌旁正常組織中高表達(dá)圖1 ABCE1和PCAF在食管鱗癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)(免疫組化染色，×400)

2 ABCE1和PACF表達(dá)與臨床病理特征相關(guān)性 見表2。ABCE1表達(dá)與TNM分期、腫瘤浸潤深度、腫瘤分化程度和淋巴有無轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，而PCAF表達(dá)與腫瘤分化程度存在相關(guān)性(P<0.05)。

討 論

食管癌是我國常見的上消化道惡性腫瘤。晚期食管癌患者以吞咽困難、進(jìn)食疼痛為主要特點(diǎn)，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量[8]。近年來食管癌的治療取得一定進(jìn)展，但5年生存率仍不容樂觀。食管癌是一個(gè)多基因參與和多種癌基因過度表達(dá)而導(dǎo)致的惡性腫瘤。隨著現(xiàn)代精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展以及食管癌分子生物學(xué)機(jī)制的深入研究，分子靶向治療應(yīng)運(yùn)而生。

ABCE1是一種癌基因，在多種惡性腫瘤內(nèi)表達(dá)，與多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[3]。國內(nèi)學(xué)者通過實(shí)驗(yàn)沉默ABCE1，對(duì)膽囊癌、肝癌、腦膠質(zhì)瘤、食管癌及宮頸癌細(xì)胞的增殖和遷移有明顯的抑制作用，并能促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡[9-13]。目前國內(nèi)外關(guān)于ABCE1在食管癌組織內(nèi)的表達(dá)及意義鮮有報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)ABCE1在食管鱗癌組織中高表達(dá)，且與腫瘤TNM分期和分化程度存在相關(guān)性。這表明ABCE1可能參與了食管黏膜上皮癌的演變，并促進(jìn)了食管癌細(xì)胞的異常增殖和惡性化。黃波等[14]研究發(fā)現(xiàn)通過沉默ABCE1可抑制食管癌EC109細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。同時(shí)本研究結(jié)果顯示，ABCE1表達(dá)與患者的年齡、性別、腫瘤大小無相關(guān)性，而與TNM分期、腫瘤浸潤深度、腫瘤分化程度和淋巴有無轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。ABCE1陽性表達(dá)率隨著食管癌的惡性程度和TNM分期的增加而逐漸增加，在腫瘤浸潤程度和淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移方面亦存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。本研究結(jié)果顯示ABCE1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者中表達(dá)明顯升高，提示其可能促進(jìn)了食管癌細(xì)胞自身的侵襲和遷移能力，進(jìn)而使得食管癌的惡性程度增強(qiáng)，導(dǎo)致其容易通過淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移。ABCE1表達(dá)聯(lián)合食管癌臨床病理特征評(píng)估后發(fā)現(xiàn)，ABCE1陰性患者預(yù)后較好，可能原因?yàn)锳BCE1蛋白表達(dá)缺失促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞增殖的功能喪失，抑制了腫瘤的轉(zhuǎn)移，提高了早期患者的生存期。而ABCE1陽性時(shí)，細(xì)胞惡性程度高、腫瘤浸潤至深層及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者預(yù)后較差。本研究結(jié)果表明，ABCE1過度表達(dá)促進(jìn)了食管癌細(xì)胞的無限制生長及惡性轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致癌細(xì)胞的局部浸潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，縮短了患者的生存期。

PCAF是一種乙酰基轉(zhuǎn)移酶，與多種癌基因表達(dá)調(diào)控密切相關(guān)。PCAF可以通過調(diào)節(jié)癌癥發(fā)生過程中重要節(jié)點(diǎn)蛋白的乙酰化和去乙?；鴧⑴c腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。研究[15]發(fā)現(xiàn)，PCAF在多種人類腫瘤細(xì)胞和組織中低表達(dá)或不表達(dá)，與患者不良預(yù)后相關(guān)。國內(nèi)外針對(duì)PCAF與食管癌發(fā)病機(jī)制的研究報(bào)道少之又少。邱衛(wèi)芳等[16]研究發(fā)現(xiàn)，人宮頸癌組織中PCAF的陽性率低于正常組織，與腫瘤的分期和病理分級(jí)顯著相關(guān)。Ying等[17]研究發(fā)現(xiàn)腸型胃癌組織中PCAF陽性率越低，患者的整體生存情況越差。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCAF在食管癌組織中表達(dá)的陽性率明顯低于癌旁正常組織；且PCAF的表達(dá)與腫瘤分化程度相關(guān)，與其他病理特征不具有相關(guān)性，與He的研究結(jié)果基本一致。

綜上所述，ABCE1和PCAF的表達(dá)與食管癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)，但其具體作用機(jī)制尚不明確。今后研究中將以ABCE1和PCAF作為重點(diǎn)，對(duì)其促癌機(jī)制進(jìn)行深入研究。