藥物體外抗輪狀病毒方法研究進(jìn)展

陳建雯 張鶴 劉韜 劉超

摘? 要：目的? 通過研究篩選近5年以來治療小兒秋季腹瀉體外有效的中藥制劑和合成藥物，總結(jié)治療小兒秋季腹瀉藥物體外藥效評(píng)價(jià)方法和藥物，對(duì)臨床治療進(jìn)行幫助指導(dǎo)。方法? 查閱大量文獻(xiàn)，對(duì)治療小兒秋季腹瀉的各種中藥制劑和合成藥物、輪狀病毒疫苗體外藥效評(píng)價(jià)方法進(jìn)行歸納總結(jié)。結(jié)果? 篩選匯總治療小兒秋季腹瀉藥物體外藥效評(píng)價(jià)更有效的方法。結(jié)論? 為臨床快速治療小兒秋季腹瀉、抑制輪狀病毒感染提供有力參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：秋季腹瀉? 輪狀病毒? 體外試驗(yàn)? 中藥制劑

中圖分類號(hào)：R373 ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2020）08（b）-0195-03

Research Progress of Drug Anti Rotavirus Methods in Vitro

CHEN Jianwen? ZHANG He? LIU Tao*? LIU Chao

（Honghe Health Vocational College， Mengzi， Yunnan Province， 661199 China）

Abstract： Purpose Through the research and selection of effective Chinese medicine and synthetic drugs in vitro for the treatment of children's autumn diarrhea in recent 5 years， the evaluation methods and drugs in vitro for the treatment of children's autumn diarrhea were summarized to help guide the clinical treatment. Method A large number of literatures were consulted to summarize the evaluation methods of various traditional Chinese medicine preparations and synthetic drugs for the treatment of children's autumn diarrhea in vitro. Result To select and summarize the more effective methods for the evaluation of the in vitro efficacy of the drugs in the treatment of children's autumn diarrhea. Conclusion To provide a strong reference for clinical rapid treatment of autumn diarrhea in children.

Key Words： Autumn diarrhea; Rotavirus; In vitro test; Traditional chinese medicine preparation

輪狀病毒（Rotavirus，RV）是澳大利亞學(xué)者Bishop和他的同事1973年利用電鏡法發(fā)現(xiàn)的，在電鏡下呈車輪狀，故叫輪狀病毒，人輪狀病毒（Human Ratavirus，HRV）是秋冬季嬰幼兒腹瀉的主要病原體，每年全世界因RV感染而死亡的超過100萬(wàn)人，是嬰幼兒急診和死亡的第二大疾病，也是引起全世界范圍內(nèi)嚴(yán)重兒童急性腹瀉的病原體之一，主要易感人群為6～14月齡的嬰幼兒，是WHO和我國(guó)重點(diǎn)防治的疾病之一。由RV引起的腹瀉占我國(guó)腹瀉病的50%。目前，對(duì)RV腸炎尚無(wú)特異的治療藥物，主要是對(duì)癥治療。中藥對(duì)腹瀉的治療有一定優(yōu)勢(shì)，RV屬呼腸孤病毒科，其核心部分由11個(gè)基因組成的線形雙股，核衣殼為雙層多肽，根據(jù)內(nèi)層殼衣中Vp6蛋白上抗原的差異，RV被分為A、B、C、D、E、F、G這7組，RV有很強(qiáng)的宿主局限性，感染人類的主要為A、B組。病毒感染的關(guān)鍵是病毒與靶細(xì)胞的結(jié)合，章薔等人[1]研究表明在目前藥物的研發(fā)過程中，研究影響因素試驗(yàn)是一項(xiàng)非常重要的任務(wù)，通過研究影響因素試驗(yàn)，有效地對(duì)藥物性質(zhì)與穩(wěn)定性進(jìn)行分析，在藥物研發(fā)對(duì)確保藥物治療效果得到有效的保證。因此，該文通過對(duì)近5年國(guó)內(nèi)外有關(guān)藥物體外抗輪狀病毒方法及效果進(jìn)行研究，以期為臨床治療小兒秋季腹瀉提供更有力的依據(jù)，對(duì)今后研究者提供有力的借鑒。

1? 中藥及其制劑體外抗輪狀病毒研究

1.1 葛根芩連體外抗輪狀病毒作用實(shí)驗(yàn)研究

王曉妍等人[2]研究葛根芩連湯含藥血清體外抑制輪狀病毒（RV）的作用及其機(jī)制。觀察CPE及MTT法，從抑制病毒生物合成、直接滅活病毒、抗病毒吸附3個(gè)方面，測(cè)定葛根芩連湯含藥血清對(duì)RV感染MA104細(xì)胞病變的作用。結(jié)果表明葛根芩連湯主要通過直接滅活輪狀病毒以及抑制輪狀病毒生物合成而發(fā)揮其抗病毒作用。楊蒙蒙等人[3]研究葛根芩連湯中有效部位總生物堿類體外干預(yù)對(duì)人輪狀病毒（rotavirus，RV）的藥理作用，結(jié)果表明葛根芩連湯中有效部位總生物堿類體外干預(yù)對(duì)人輪狀病毒（rotavirus，RV）的藥理作用。

1.2 秋瀉靈合劑體外抗輪狀病毒作用實(shí)驗(yàn)研究

李金松等人[4]研究秋瀉靈和兒瀉停顆粒體外傳代細(xì)胞上抗輪狀病毒的作用，結(jié)果表明秋瀉靈和兒瀉停在適宜濃度時(shí)對(duì)輪狀病毒SA11有滅活作用，二者對(duì)阻止SA11輪狀病毒入侵MA104細(xì)胞顯示了一定的保護(hù)作用。

1.3 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ體內(nèi)外抗輪狀病毒作用研究

周若夏等人[5]研究白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ對(duì)細(xì)胞的毒性及對(duì)RV生物合成、吸附的抑制作用，對(duì)RV的直接滅活作用，以利巴韋林為陽(yáng)性對(duì)照藥。結(jié)果顯示白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ具有直接滅活RV的作用，TI值為8;體內(nèi)研究中白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ中劑量組抗RV效果最佳。白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在體內(nèi)外均具有一定的抗RV作用，主要通過體外直接滅活RV而發(fā)揮作用。

1.4 五加減正氣散含藥血清體外抗輪狀病毒作用研究

王偉等人[6]研究五加減正氣散大鼠含藥血清體外抗輪狀病毒（RV）的作用。結(jié)果表明五加減正氣散含藥血清具有顯著的抗病毒作用，其機(jī)制可能是抑制病毒進(jìn)入細(xì)胞后的病毒生物合成作用。

1.5 參苓白術(shù)散含藥血清體外抗輪狀病毒的作用研究

王曉妍等人[7]研究參苓白術(shù)散含藥血清體外抑制輪狀病毒（RV）的作用及其機(jī)制。結(jié)果表明參苓白術(shù)散在體外有一定的抗輪狀病毒作用，主要通過直接滅活輪狀病毒以及抑制輪狀病毒生物合成而發(fā)揮作用。

1.6 茜草藤提取物體外抗輪狀病毒研究及新劑型應(yīng)用研究

孫源源等人[8]研究表明茜草藤水提物可體外抑制輪狀病毒在MA-104細(xì)胞中的增殖，輪狀病毒可以引起輕微的細(xì)胞凋亡，茜草藤水提物可以促進(jìn)病毒感染細(xì)胞的凋亡，終止病毒在其宿主的增殖。

2? 合成藥物體外抗輪狀病毒研究

2.1 Jn219體外抗輪狀病毒作用實(shí)驗(yàn)研究

有研究顯示Jn219藥物可以殺滅RV病毒并建立了乳鼠輪狀病毒感染療效模型。有研究顯示抗輪狀病毒（RV）LLR株G10血清型特異性單克隆抗體，作為單抗，可以用于G10血清型RV的分型檢測(cè)或LLR毒株的鑒別。

2.2 lactdherin體外抗輪狀病毒的作用研究

lactadherin是母乳中含有的一種脂肪小球膜表面糖蛋白lactadherin。有學(xué)者研究了lactadherin對(duì)RV感染性腹瀉的體外實(shí)驗(yàn)，研究結(jié)果顯示母乳能抑制RV感染MA-104細(xì)胞（綠猴腎細(xì)胞）。Lactadherin可以結(jié)合4種主要的人類RV株繼而抑制它們感染宿主細(xì)胞。乳汁中的lactadherin可與輪狀病毒交聯(lián)，并且競(jìng)爭(zhēng)性抑制輪狀病毒結(jié)合到宿主小腸黏膜，對(duì)輪狀病毒感染性腹瀉可有預(yù)防和減輕病情的作用，lactadherin還可調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、改變免疫細(xì)胞活性的作用，有利于輪狀病毒感染性腹瀉的預(yù)防和治療。

2.3 止瀉退熱片體外抗輪狀病毒的作用研究

有學(xué)者研究止瀉退熱片體外干預(yù)對(duì)人輪狀病毒A組G3型 （RV709）株的藥理作用。研究結(jié)果顯示止瀉退熱片主要抑制人RV709株在MA104細(xì)胞內(nèi)的生物合成發(fā)揮抗輪狀病毒作用。

2.4 抗輪狀病毒雞卵黃IgY聯(lián)合葡萄糖酸鋅治療嬰幼兒輪狀病毒性腸炎的臨床療效作用研究

姜琳等人[9]研究抗輪狀病毒雞卵黃IgY及葡萄糖酸鋅顆粒。結(jié)果顯示抗輪狀病毒雞卵黃IgY聯(lián)合葡萄糖酸鋅治療輪狀病毒性腸炎療效確切，優(yōu)于常規(guī)基礎(chǔ)治療，可有效改善患兒癥狀，促進(jìn)腸道功能恢復(fù)。

2.5 P-VP8*IgY抗輪狀病毒的體內(nèi)保護(hù)作用研究

郭倫愛[10]研究利用輪狀病毒的外殼刺突樣蛋白VP8*基因片段插入到諾如病毒P顆粒的表面環(huán)形區(qū)域loop2，在大腸桿菌中穩(wěn)定表達(dá)出嵌合VP8*的P-VP8*蛋白，經(jīng)免疫來航雞制備純化出特異性P-VP8*IgY，結(jié)果表明P-VP8*lgY是一種有前景的抗諾如和輪狀病毒的雙價(jià)抗體藥物制劑。未來有很好的研究前景。

3? 展望

通過研究中藥及其制劑以及合成藥物、疫苗等對(duì)體外輪狀病毒抑制作用，綜合分析了近5年來中藥及其制劑，化學(xué)合成藥物、輪狀病毒疫苗對(duì)小兒輪狀病毒的體外抗病毒作用，發(fā)現(xiàn)他們各有優(yōu)勢(shì)，各有所長(zhǎng)。通過研究中藥及其制劑和合成藥物均有很好的體外抗輪狀病毒研究作用，對(duì)臨床治療小兒秋季腹瀉具有指導(dǎo)性意義。

參考文獻(xiàn)

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