中國(guó)人群PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與胃癌易感性Meta分析

秦思遠(yuǎn) 李成浩

胃癌（gastric cancer）是一種常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，位居全國(guó)癌癥死因的第2位［1］，但其病因目前尚未明確。近年來，越來越多的研究［2-4］證實(shí)基因遺傳多態(tài)性與胃癌發(fā)病關(guān)系密切。前列腺干細(xì)胞抗原（prostate stem cell antigen，PSCA）基因是LY-6/Thy-1細(xì)胞表面抗原超家族成員，位于8號(hào)染色體長(zhǎng)臂24區(qū)第2號(hào)亞帶上，由其編碼產(chǎn)生的PSCA蛋白錨定在細(xì)胞表面，可介導(dǎo)細(xì)胞黏附和增殖活動(dòng)［5-6］。其中，位于PSCA基因第2個(gè)內(nèi)含子上的rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與胃癌易感性的相關(guān)性已被大量報(bào)道［7-9］，但是兩者的關(guān)系尚存在爭(zhēng)議，也未見基于我國(guó)人群的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。因此，本研究收集國(guó)內(nèi)外針對(duì)我國(guó)人群公開發(fā)表的研究結(jié)果，采用Meta分析方法探討PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與中國(guó)人群胃癌發(fā)病的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)的納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴國(guó)內(nèi)外關(guān)于胃癌與PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)公開發(fā)表的文獻(xiàn)；⑵語種為中文和英文；⑶研究類型為病例對(duì)照研究；⑷經(jīng)手術(shù)病理組織學(xué)或經(jīng)胃鏡活檢病理檢查確診為胃癌；⑸等位基因及基因頻率相關(guān)數(shù)據(jù)完整；⑹結(jié)局指標(biāo)為胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴非中國(guó)人群的研究；⑵綜述或系統(tǒng)評(píng)價(jià)文獻(xiàn)；⑶動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；⑷重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)。

1.2 文獻(xiàn)檢索策略

計(jì)算機(jī)檢索中國(guó)知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫、維普數(shù)據(jù)庫、美國(guó)國(guó)家生物信息中心（NCBI）、荷蘭醫(yī)學(xué)文摘數(shù)據(jù)庫（Embase）、科學(xué)引文索引（Web of Science）等數(shù)據(jù)庫，搜集關(guān)于胃癌與PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)相關(guān)的病例對(duì)照研究，同時(shí)回溯納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)，檢索時(shí)間為自建庫起至2020年3月22日。中文檢索詞包括胃癌、多態(tài)性、rs2976392等，英文檢索詞包括 Stomach Neoplasms、polymorphism、rs2976392 等。

1.3 文獻(xiàn)篩選及質(zhì)量評(píng)價(jià)

由2位研究者獨(dú)立篩選文獻(xiàn)、提取相關(guān)資料并交叉核對(duì)，如遇分歧，則通過討論或與第三方協(xié)商解決。首先閱讀文獻(xiàn)標(biāo)題和摘要部分進(jìn)行初篩，排除明顯不符合的文獻(xiàn)，初篩后的文獻(xiàn)閱讀全文進(jìn)一步篩查。提取納入文獻(xiàn)的資料，主要內(nèi)容包括第一作者姓名、發(fā)表年份、所在地區(qū)、民族、樣本量、基因檢測(cè)方法及各基因型分布情況。采用NOS量表（Newcastle-Ottawa scale）對(duì)納入文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。若NOS評(píng)分≥5分，則認(rèn)為該文獻(xiàn)可靠性高；同時(shí)采用HWE（Hardy-Weinberg equilibrium）評(píng)分對(duì)納入Meta分析研究中的群體基因遺傳平衡進(jìn)行檢驗(yàn)，以P≥0.05為衡量基因分布偏差較小的閾值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用RevMan 5.3軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)算合并比值比（OR）和 95%置信區(qū)間（95% CI），以 P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用I2檢驗(yàn)對(duì)異質(zhì)性進(jìn)行檢驗(yàn)，若 P＞0.1，I2＜50%，則認(rèn)為研究間不存在異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型；若 P＜0.1，I2＞50%，則認(rèn)為研究間存在異質(zhì)性，采用隨機(jī)效應(yīng)模型。采用RevMan軟件制作漏斗圖對(duì)是否存在發(fā)表偏倚進(jìn)行初步評(píng)估，同時(shí)使用Stata 12軟件進(jìn)行Egger檢驗(yàn)評(píng)估納入研究的發(fā)表偏倚，當(dāng)P＞0.05時(shí)說明研究間不存在發(fā)表偏倚；采用逐一剔除各研究的方式進(jìn)行敏感性分析，當(dāng)P＜0.05時(shí)表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果

初選共檢索到78篇文獻(xiàn)，經(jīng)EndNote×7軟件剔除重復(fù)文獻(xiàn)37篇，閱讀題目及摘要部分剔除與本研究不相關(guān)及綜述文獻(xiàn)22篇，閱讀全文后剔除7篇。最終共納入13篇文獻(xiàn)［8-20］，其中1篇為計(jì)算機(jī)未檢索到的文獻(xiàn)［8］；包括14項(xiàng)病例對(duì)照研究，病例組6 618例，對(duì)照組6 952例，涉及國(guó)內(nèi)10個(gè)省市自治區(qū)，漢族、藏族、回族共3個(gè)民族。納入研究的基本信息見表1。

2.2 質(zhì)量評(píng)價(jià)

采用NOS量表對(duì)納入文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，結(jié)果所有納入文獻(xiàn)的NOS評(píng)分均在7～8分，說明納入文獻(xiàn)可靠。4 項(xiàng)研究［15，18-20］不符合 HWE 平衡（P＜0.05），其余研究均符合HWE平衡（P≥0.05）。見表1。

表1 納入研究的基本信息Tab.1 Basic characteristics of studies

2.3 Meta分析結(jié)果

采用I2檢驗(yàn)進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，根據(jù)I2和P值決定效應(yīng)模型種類，結(jié)果詳見表2。Meta分析結(jié)果顯示，除隱性基因模型（AA vs GG+GA）和1個(gè)共顯性基因模型（AG vs GG）外，等位基因模型（A vs G）、顯性基因模型（AA+GA vs GG）和另1個(gè)共顯性基因模型（AA vs GG）均顯示中國(guó)人群PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)（均 P＜0.05），見表 2、圖 1～3。

對(duì)民族進(jìn)行亞組分析，有關(guān)回族的研究只有1項(xiàng)［13］，故只納入漢族［9-10，12-20］、藏族［8，11］進(jìn)行 Meta 分析，結(jié)果顯示，所有基因遺傳模型均與漢族人群胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)（均P＜0.001），而與藏族人群胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無關(guān)（均 P＞0.05），見表 2。

2.4 敏感性分析與異質(zhì)性分析

依次剔除各遺傳模型中每項(xiàng)研究的數(shù)據(jù)后，其余研究的合并OR值無明顯改變，說明Meta分析結(jié)果可靠。異質(zhì)性分析結(jié)果顯示，剔除QIU的研究［18］后整體無明顯異質(zhì)性（I2=0，P＞0.1）。

2.5 發(fā)表偏倚

采用漏斗圖和Egger檢驗(yàn)對(duì)各基因模型進(jìn)行發(fā)表偏倚檢驗(yàn)，結(jié)果納入的研究均完整出現(xiàn)在漏斗圖上，且以合并效應(yīng)量OR值為中心，基本對(duì)稱分布成倒漏斗型；而Egger檢驗(yàn)結(jié)果亦提示各基因模型均無發(fā)表偏倚（P＞0.05），見表 2。

表2 PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與胃癌遺傳易感性的Meta分析Tab.2 Meta-analysis of PSCA gene rs2976392 polymorphism and gastric cancer susceptibility

圖1 等位基因模型（A vs G）與胃癌遺傳易感性的Meta分析Fig.1Meta-analysis of allele model（A vs G）and gastric cancer susceptibility

圖2 顯性基因模型（AA+GA vs GG）與胃癌遺傳易感性的Meta分析Fig.2Meta-analysis of dominant gene model（AA+GA vs GG）and gastric cancer susceptibility

圖3 共顯性基因模型l（AA vs GG）與胃癌遺傳易感性的Meta分析Fig.3 Meta-analysis of codominant gene model（AA vs GG） and gastric cancer susceptibility

3 討論

PSCA是由PSCA基因編碼生成的一種位于細(xì)胞表面的糖基化磷脂酰肌醇（GPI）錨定蛋白，由REITER等［21］于人前列腺癌裸鼠模型中發(fā)現(xiàn)，在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞增殖調(diào)控中發(fā)揮重要作。PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)位于PSCA基因第2個(gè)內(nèi)含子上，2008年SAKAMOTO等［7］首次發(fā)現(xiàn)PCSA基因多態(tài)性與胃癌易感性相關(guān)。隨后WU等［9］首次在中國(guó)漢族人群中開展PSCA基因多態(tài)位點(diǎn)與胃癌發(fā)病關(guān)系的研究，發(fā)現(xiàn)2種單核苷酸多態(tài)位點(diǎn)變異（rs2294008C>T，rs2976392G>A）與中國(guó)漢族人群胃癌易感性相關(guān)。此后針對(duì)中國(guó)多個(gè)省份和民族的研究不斷展開，其中關(guān)于PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與胃癌相關(guān)的研究中涉及中國(guó)人群的研究數(shù)量最多［8-20］。近年有Meta分析報(bào)道PSCA基因多態(tài)位點(diǎn)rs2976392與胃癌易感性相關(guān)，但均只納入英文文獻(xiàn)，且中國(guó)人群納入東亞人群進(jìn)行分析，忽視了中國(guó)人群內(nèi)部差異，也未從遺傳模型和亞組分析等方面進(jìn)行探討［22-23］。我國(guó)人口眾多，各地區(qū)各民族之間有明顯差異，因此針對(duì)我國(guó)人群進(jìn)行特異性分析十分必要。本次Meta分析最終納入13篇共14項(xiàng)關(guān)于PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與中國(guó)人群胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的病例對(duì)照研究，涉及10個(gè)省市自治區(qū)，漢族、藏族、回族共3個(gè)民族，同時(shí)納入中英文文獻(xiàn)，進(jìn)一步充實(shí)了樣本數(shù)量和來源。所有研究的NOS評(píng)分均≥7分，說明納入的文獻(xiàn)質(zhì)量較好，可信度較高。

多項(xiàng)研究［9-10，16-18，20］發(fā)現(xiàn) rs2976392 多態(tài)位點(diǎn)在顯性基因模型（AA+GA vs GG）下可增加胃癌易感風(fēng)險(xiǎn)，而部分研究［12-14，19］認(rèn)為只有純合AA基因與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)，但也有2項(xiàng)研究［8，15］認(rèn)為該位點(diǎn)與胃癌易感性無關(guān)。本次Meta分析結(jié)果顯示，除隱性模型和共顯性模型中（AG vs GG）模型外，其余遺傳模型中的rs2976392多態(tài)位點(diǎn)可增加中國(guó)人群胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，尤其是純合AA基因型時(shí)胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)最高，這與大多數(shù)納入研究的結(jié)論一致?？紤]到民族因素的影響，對(duì)納入研究的漢族、藏族進(jìn)行亞組分析，結(jié)果各遺傳模型均顯示漢族人群在rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與胃癌易感性上更加明顯，且漢族人群的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)在各基因模型下均高于中國(guó)人群發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，尤其在純合AA基因型時(shí)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)最高；而藏族人群的各遺傳模型結(jié)果顯示該多態(tài)位點(diǎn)與胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無關(guān)，與OU等［8］研究結(jié)果一致。但沈國(guó)雙等［11］研究發(fā)現(xiàn)rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與藏族人群胃癌易感性具有相關(guān)性，與上述結(jié)果不一致。結(jié)論的差異可能與研究數(shù)量少和基因檢測(cè)方式不同有關(guān)。本研究的敏感性分析顯示依次剔除各項(xiàng)研究后的合并OR值基本一致，說明納入研究間異質(zhì)性可接受；剔除HWE不平衡的QIU等［18］的研究后各遺傳模型的異質(zhì)性極低，由此推測(cè)QIU的研究［18］為本Meta分析的異質(zhì)性來源。分析原因可能與該研究的對(duì)照組人群來源選擇有關(guān)，該研究對(duì)照組納入的是非腫瘤疾病患者而非健康人群，雖然目前該位點(diǎn)的研究只涉及腫瘤方向，但是不能排除非腫瘤疾病與該位點(diǎn)無關(guān)。此外，采用漏斗圖和Egger檢驗(yàn)對(duì)各遺傳模型行發(fā)表偏倚檢驗(yàn)顯示不同基因模型發(fā)表偏倚不顯著，進(jìn)一步證明本Meta分析結(jié)果可靠。

本Meta分析存在以下局限性：⑴納入文獻(xiàn)均為正式發(fā)表的文獻(xiàn)，雖然未見發(fā)表偏倚，但是不能排除潛在的偏倚可能。⑵納入文獻(xiàn)較少，且樣本量有限。⑶基因檢測(cè)方式及胃癌檢出率不同，可能影響Meta分析結(jié)果的可靠性。⑷未考慮如性別、年齡、生活習(xí)慣、基因關(guān)聯(lián)性等因素的影響。⑸各研究以漢族人群為主，其他民族較少。而有流行病學(xué)統(tǒng)計(jì)報(bào)告［24］指出中國(guó)哈薩克族胃癌發(fā)病率高于同地區(qū)漢族和其他民族，但在關(guān)于中國(guó)朝鮮族群體的報(bào)告［25］中卻發(fā)現(xiàn)朝鮮族的胃癌檢出率低于同地區(qū)漢族群體。因此，未來尚需有更多針對(duì)不同民族和地區(qū)人群的研究，明確PSCA基因rs2976392多態(tài)位點(diǎn)與中國(guó)人群胃癌易感性的關(guān)系，使之作為分子標(biāo)志物應(yīng)用于篩選胃癌高危人群或易感個(gè)體。