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    HS-SPME-GC-MS分析大青葉和板藍根中揮發(fā)性成分

    2020-10-09 10:13:00田宇江漢美韓蔓蔡夢瑩
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020年14期
    關(guān)鍵詞:揮發(fā)性成分大青葉板藍根

    田宇 江漢美 韓蔓 蔡夢瑩

    摘要:采用頂空固相微萃取法(HS-SPME)與氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)相結(jié)合對大青葉和板藍根中揮發(fā)性成分進行比較分析,利用面積歸一化法計算各成分的相對百分含量。結(jié)果表明,從大青葉中分離出38個峰,鑒定出31種成分,占揮發(fā)性成分的81.58%;從板藍根中分離出35個峰,鑒定出28種成分,占揮發(fā)性成分的80.00%;兩者共有成分有16種,分別占大青葉和板藍根揮發(fā)性成分總量的48.16%和48.40%。大青葉和板藍根中揮發(fā)性成分和含量有一定的差異,同時二者又有一部分相同的藥理作用。

    關(guān)鍵詞:大青葉;板藍根;頂空固相微萃取;氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù);揮發(fā)性成分

    中圖分類號:R284.1? ? ? ? ?文獻標識碼:A

    文章編號:0439-8114(2020)14-0159-03

    DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.14.033 開放科學(xué)(資源服務(wù))標識碼(OSID):

    Abstract: The volatile components of folium isatidis and radix isatidis were analyzed and compared by headspace solid phase microextraction (HS-SPME) combined with GC-MS. The relative percentage of each component was calculated by area normalization method. Results showed that 38 peaks were isolated from folium isatidis and 31 components were identified, accounting for 81.58% of the volatile components. 35 peaks were isolated from radix isatidis and 28 components were identified, accounting for 80.00% of the volatile components. There are 16 kinds of volatile components in the two, which account for 48.16% and 48.40% of the total volatile components of folium isatidis and radix isatidis, respectively. There were some differences in the volatile components and content of folium isatidis and radix isatidis, and they have some of the same pharmacological effects.

    Key words: folium isatidis; radix isatidis; HS-SPME-GC-MS; volatile components

    大青葉和板藍根為十字花科植物崧藍(Isatis indigotica Fort.)的干燥葉與干燥根[1]。大青葉和板藍根皆味苦,性寒,歸心、胃經(jīng),具有清熱涼血的功效。大青葉長于涼血消斑,主治口瘡,喉痹,丹毒,血熱發(fā)斑等;板藍根長于涼血利咽,主治痄腮,喉痛,癰腫瘡毒等[2]?,F(xiàn)代藥理研究表明,大青葉有抗腫瘤、清除氧自由基、加強人體免疫的藥理作用;板藍根有抗內(nèi)毒素、抗炎、解熱、抗病原微生物、增強免疫力的藥理作用[3]。目前對大青葉和板藍根有效成分中靛藍、靛玉紅、氨基酸等研究較多,對其中的揮發(fā)性成分研究較少。本研究采用HS-SPME-GC-MS對菘藍不同藥用部位(大青葉、板藍根)中揮發(fā)性成分進行提取和分析研究,以期為這方面研究提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 試驗材料 大青葉、板藍根藥材購于廣盛商貿(mào)有限公司,經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)教研室鑒定為十字花科植物崧藍(Isatis indigotica Fort.)的干燥葉和干燥根。

    1.1.2 儀器 手動固相微萃取進樣裝置(德國 IKA公司);Agilent6890/5973型氣相-質(zhì)譜-計算機聯(lián)用儀(美國Hewlett-Packard公司);頂空瓶(15 mL);65 μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯;萃取纖維頭(美國Supelco公司);ALC-210.2型電子天平(北京賽多利斯天平有限公司,d=0.01 g)。

    1.2 方法

    1.2.1 頂空固相微萃取條件 大青葉樣品0.6 g,置于15 mL頂空瓶中,插入裝有65 μm PDMS/DVB萃取纖維頭的手動進樣器,在80 ℃平衡10 min,壓縮手柄伸出萃取頭,萃取15 min后取出,立即插入氣相色譜儀進樣口解析3 min,不分流進樣。板藍根萃取條件同上。

    1.2.2 GC-MS色譜與質(zhì)譜條件

    1)色譜條件。色譜柱為HP-5MS石英毛細管柱(30.00 m×0.25 mm,0.25 μm);載氣為高純度氦氣(99.999%),柱流速為0.8 mL/min,進樣口溫度為230 ℃;升溫程序為從50 ℃開始,以10 ℃/min升溫至230 ℃,保留3 min。

    2)質(zhì)譜條件。EI源;離子源溫度230 ℃,電離能70 eV;四級桿溫度150 ℃;掃描質(zhì)量范圍35~550 m/z。

    2 結(jié)果與分析

    對大青葉和板藍根藥材中揮發(fā)性成分進行分析,通過數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)和面積歸一化法對各總離子流中各組分相對百分含量進行計算,經(jīng)NIST08 質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫對各峰的質(zhì)譜圖進行檢索,并結(jié)合其相對保留時間,確定各個組分,具體結(jié)果見圖1、圖2和表1。

    從圖1以及表1可以看出,采用HS-SPME-GC-MS技術(shù),從大青葉揮發(fā)性成分中分離出38個峰,鑒定出31種成分,占總揮發(fā)性成分的81.58%。其中,大青葉中揮發(fā)性成分含量最高的為甲基乙烯基甲酮,占揮發(fā)性成分的16.51%,其次為苯乙醛(8.61%)、異戊醛(7.37%)、壬醛(6.91%)、D-檸檬烯(5.86%)、苯乙醇(5.05%)等。苯乙醇具有免疫調(diào)節(jié)作用,其調(diào)節(jié)機制是多樣性的[4]。從板藍根揮發(fā)性成分中分離出35個峰,鑒定出28種成分,占總揮發(fā)性成分的80.00%。板藍根中揮發(fā)性成分含量最高的為4-異硫氰基-1-丁烯,占揮發(fā)性成分的17.31%,其次為壬醛(11.87%)、1R-α-蒎烯(9.18%)、3,5-辛二烯-2-酮(7.04%)。4-異硫氰基-1-丁烯是抗病毒口服液揮發(fā)油的主要成分之一[5];1R-α-蒎烯有良好的藥物活性,具有抑菌抗炎等藥理作用[6,7]。

    3 小結(jié)與討論

    大青葉和板藍根來源于同一種基源植物菘藍,其揮發(fā)性成分有很多為兩者所共有。大青葉和板藍根含有16種共有成分,分別為己醛、正己醇、庚醛、苯甲醛、1-辛烯-3-醇、辛醛、D-檸檬烯、苯乙醛、3,5-辛二烯-2-酮、壬醛、苯乙醇、左旋樟腦、正十二烷、癸醛、5-甲基-2-(1-甲基亞乙基)環(huán)己酮和正十四烷,共有成分分別占大青葉和板藍根揮發(fā)性成分總量的48.16%和48.40%。其中大部分都具有藥理活性,D-檸檬烯有很多生理活性,其中最突出的是抗腫瘤的活性,除此之外還有抑菌、消炎、鎮(zhèn)痛等作用[7];苯乙醛有一定的抑菌活性[8]和抗氧化的藥理作用[9];壬醛對細菌和真菌具有明顯的抑制作用[10];苯乙醇具有免疫調(diào)節(jié)作用,其調(diào)節(jié)機制是多樣性的[11];1-辛烯-3-醇和癸醛對細菌有一定的抑制作用[12,13]。

    在共有成分中,大青葉所含的D-檸檬烯、苯乙醇和苯乙醛均明顯高于板藍根;而板藍根中3,5-辛二烯-2-酮和壬醛的含量則明顯高于大青葉,表明大青葉和板藍根的揮發(fā)性成分和含量有一定的差異,同時二者又有一部分相同的藥理作用,大青葉長于抗腫瘤和抗氧化,而板藍根則長于抑菌抗炎。

    參考文獻:

    [1] 國家藥典委員會.中華人名共和國藥典(一部)[S].

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    [3] 李偉劍.板藍大青葉有效成分提取和精制工藝研究[J].生物技術(shù)世界,2016(3):222.

    [4] 劉先芳,梁敬鈺,孫建博,等.女貞子化學(xué)成分和藥理活性研究進展[J].海峽藥學(xué),2018,30(1):1-8.

    [5] 許雄博,劉 韶,彭應(yīng)枝.GC-MS結(jié)合化學(xué)計量學(xué)用于抗病毒口服液揮發(fā)油的研究[J].中南藥學(xué),2015,13(1):87-90.

    [6] 陳凌霄,張 帥,胡德俊,等.頂空-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析比較雪菊不同產(chǎn)地和部位的揮發(fā)性成分[J].藥物分析雜志,2018,38(2):251-255.

    [7] 王偉江.天然活性單萜——檸檬烯的研究進展[J].中國食品添加劑,2005(1):33-37.

    [8] 葉文斌,張和平,樊 亮.黃瑞香干燥葉片揮發(fā)油的GC-MS分析及抑菌活性研究[J].甘肅高師學(xué)報,2013,18(2):65-68.

    [9] 何躍君,岳永德,湯 鋒,等.竹葉揮發(fā)油化學(xué)成分及其抗氧化特性[J].林業(yè)科學(xué),2010,46(7):120-128.

    [10] 陳 崢,劉 波,陳梅春,等.基于頂空-固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用的短短芽胞桿菌揮發(fā)性抑菌代謝物的鑒定[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2014,5(9):2844-2852.

    [11] 吳彩霞,常 星,康文藝.多枝檉柳揮發(fā)性成分分析[J].中國藥房,2010,21(23):2164-2166.

    [12] 楊 波,劉志剛,劉丹丹,等.鮑魚菇菌絲體揮發(fā)油化學(xué)成分及抗菌活性分析[J].中國食用菌,2009,28(3):40-42.

    [13] 蓋苗苗,周春玲,曲 寧,等.雪松的揮發(fā)性物質(zhì)成分及抑菌效率研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報,2010,26(7):311-313.

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